产纤维素酶细菌的分离、鉴定与酶学性质研究

产纤维素酶细菌的分离、鉴定与酶学性质研究

论文摘要

目的筛选并鉴定纤维素酶高产菌株,初步研究其所产纤维素酶的酶学性质,为纤维素资源的综合利用提供菌种资源。方法通过刚果红染色和酶活测定,从广州凉茶中药渣堆肥和黑龙江玉米地土壤中筛选出纤维素酶高产菌株,进行基于16S rDNA分析的分子鉴定,同时采用单因素试验方法确定菌株最佳培养时间,判断温度、pH值、金属离子、有机溶剂和盐浓度对所产纤维素酶活性及稳定性的影响。结果筛选获得3株纤维素酶高产菌株,其中Z-1鉴定为甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus),Z-2和H-3鉴定为枯草芽孢杆菌(B.subtilis),其所产CMCase酶学活性分别为977.92 U/mL、1 089.79 U/mL和1 538.44 U/mL。所产纤维素酶最适反应温度为50℃,最适pH值范围为pH4~5,该纤维素酶可被Ag+、Co2+和Mg2+离子激活,也可被一定浓度的Tris-100和甲醇激活。经浓度为1.5 mol/L的NaCl处理4 h后,其酶活力仍剩余56.34%以上。结论 B.methylotrophicus Z-1,B.subtilis Z-2以及B.subtilis H-3为纤维素酶高产菌株,其所产纤维素酶耐热、耐酸、耐盐,并可被部分金属离子和有机物质所激活,具有潜在的开发价值。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 样品
  •   1.2 试剂
  •   1.3 培养基
  •   1.4 样品处理
  •   1.5 初筛
  •   1.6 纯化和复筛
  •   1.7 纤维素酶酶活测定
  •   1.8 分离菌株的16S rDNA序列分析与鉴定
  •   1.9 分离菌株所产纤维素酶性质分析
  • 2 结果
  •   2.1 产纤维素酶菌株的获得与酶活测定
  •   2.2 菌株的基因鉴定
  •   2.3 最佳发酵时间测定
  •   2.4 温度对菌株所产纤维素酶活性及稳定性的影响
  •   2.5 酸碱度对菌株所产纤维素酶活性及稳定性的影响
  •   2.6 金属离子对菌株所产纤维素酶活性的影响
  •   2.7 有机溶剂对菌株所产纤维素酶活性的影响
  •   2.8 盐浓度对菌株所产纤维素酶活性的影响
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 梁倩,李荷,王卓娅

    关键词: 纤维素酶产生菌,菌种筛选,酶学性质

    来源: 广东药科大学学报 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 广东药科大学生命科学与生物制药学院,广东药科大学药学院

    基金: 广东省大学生创新创业训练计划项目(201610573030),广东省科技计划项目(2017A010105011),广州市科技计划项目(201802030009)

    分类号: Q939.9

    DOI: 10.16809/j.cnki.2096-3653.2018110503

    页码: 120-125

    总页数: 6

    文件大小: 1988K

    下载量: 709

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