导读:本文包含了人骨形成蛋白基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:蛋白,肺动脉,高压,软骨,细胞,胶原,湖羊。
人骨形成蛋白基因论文文献综述
张秀华,刘飞,刘英梅,陈勉,刘霞[1](2019)在《重组人骨形成蛋白-2基因工程菌株的构建及蛋白复性纯化》一文中研究指出目的构建一株高效表达人骨形成蛋白2(hBMP-2)的基因工程菌株,并通过复性、纯化获得有生物活性的rhBMP-2。方法采用基因工程法将hBMP-2基因片段与pET-28a(+)质粒载体相连,构建大肠杆菌表达系统。工程菌发酵后,超声破碎收集包涵体,包涵体经裂解后通过稀释复性法进行复性,SDS-PAGE检测复性情况,并采用HiTrap Heparin HP纯化,C2C12细胞检测活性。结果 rhBMP-2在大肠杆菌中以无活性的包涵体形式表达,1 L发酵罐高密度发酵rhBMP-2包涵体湿重可达20 g/L。采用稀释法复性,蛋白复性率大于40%,亲和层析纯化后,二聚体蛋白纯度达95%以上,且能诱导C2C12细胞碱性磷酸酶的表达,具有同市售产品相同的细胞活性。结论成功构建了高效表达rhBMP-2的基因工程菌株,复性方法简单且无需对包涵体进行纯化,蛋白复性浓度高,纯化方法简便,大大降低了工业化生产成本。(本文来源于《食品与药品》期刊2019年05期)
杜永胜,周思静,周学欣,周璐茜,徐爱群[2](2018)在《骨形成蛋白2型受体及其基因突变与肺动脉高压》一文中研究指出肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)是一类由多种病因侵犯肺小动脉,致小血管增厚、闭塞及重构,导致肺血管床阻力增加,最终导致肺动脉高压、右心室肥厚扩张,甚至右心功能衰竭的恶性心血管疾病。骨形成蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)是转化生长因子(transforming growth factor,TGF)超家族中一类重要的细胞因子。骨形(本文来源于《临床肺科杂志》期刊2018年08期)
郑亚国,林松,张航,谢渡江,周陵[3](2018)在《全外显子组测序证实家族性肺动脉高压骨形成蛋白受体2基因新突变的研究》一文中研究指出目的:探讨一个中国汉族肺动脉高压(PAH)家系的致病基因及其位点。方法:对该PAH家系中的2例PAH患者与2名正常者作对照进行全外显子组测序,利用生物信息学分析和组间比较,筛选出患者特有的变异,并对筛选出的变异使用Sanger测序法验证,同时在100名健康志愿者中进行测序验证。结果:共纳入该家系成员8例,有2位已确诊为PAH,其中男性1例(先证者),女性1例,为母子关系。先证者表现为活动后胸闷、气喘,右心导管测量肺动脉平均压77 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),心输出量4.92 L/min,肺小动脉阻力13.4 Wood units。本家系中母子患病符合常染色体显性遗传模式特征。经外显子组测序、数据分析和Sanger测序验证后发现骨形成蛋白受体2(BMPR2)基因6号外显子747位点发生插入杂合突变(c.747_748ins CCTTTG ATGGAACATGA:p.V250fs)。另外,在100名健康志愿者中,Sanger测序没有发现该位点杂合突变。结论:发现了BMPR2基因的一个新的突变位点,扩大了BMPR2致病基因位点谱。(本文来源于《中国循环杂志》期刊2018年05期)
阮蔷,赵刚,郭睿,肖月,李超[4](2016)在《纳米级多孔负载人骨形成蛋白2基因修饰支架对前成骨细胞株分化的影响》一文中研究指出背景:对于骨缺损,通常需要通过骨组织或成骨材料的移植或充填进行修复。切取自体骨组织会给患者带来额外的损伤和继发畸形,为此,新一代的成骨材料研究迫在眉睫。目的:构建含人骨形成蛋白2质粒DNA的β-磷酸叁钙/胶原支架材料,并观察其对小鼠前成骨细胞MC3T3-E1分化的影响。方法:制备纳米级多孔β-磷酸叁钙/胶原支架并负载含人骨形成蛋白2目的基因的质粒DNA形成基因修饰的支架材料。建立小鼠前成骨细胞细胞株MC3T3-E1与复合支架的体外培养体系。将其分为支架组和平皿组,再根据质粒的浓度每组再分为2个小组。复合培养后取样通过扫描电镜和光镜进行细胞形态学观察;诱导1,3,7,14 d行茜素红染色观察钙结节情况;实时荧光定量PCR检测细胞周期;诱导1,3,7,14 d观察成骨细胞相关基因Ⅰ型胶原αⅠ链基因、锌指结构转录因子、骨唾液酸蛋白的表达。结果与结论:(1)含人骨形成蛋白2为目的基因的质粒DNA修饰纳米β-磷酸叁钙/Ⅰ型胶原溶液复合材料上细胞黏附数、分化数量及材料表面分布都高于单纯含人骨形成蛋白2为目的基因的质粒DNA(P<0.05);(2)通过用茜素红染色、实时荧光定量PCR检测,结果显示支架组对小鼠前成骨细胞MC3T3-E1成骨能力的影响优于平皿组;(3)结果提示,负载人骨形成蛋白2基因修饰的β-磷酸叁钙/胶原支架材料将具有骨传导性的支架与具有生物活性的成骨因子复合,形成复合支架同时具备骨传导性和骨诱导性,是一种理想的骨缺损修复材料。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2016年38期)
李晓林,牛志刚,袁燕,李列刚,周成全[5](2016)在《湖羊和小尾寒羊骨形成蛋白受体IB型基因多态性与泌乳性状的相关性分析》一文中研究指出为探究骨骼形成蛋白IB型受体基因(BMPR-IB)与泌乳性状的相关性,采用PCR-RFLP方法检测BMPR-IB在湖羊(41只)和小尾寒羊(30只)群体中的多态性,并分析了其泌乳期1~56 d的泌乳性状。结果显示:在湖羊群体中发现BB和B+两种基因型,基因频率为0.965和0.035;与泌乳性状结合分析:BB基因型乳蛋白显着高于B+型个体(P<0.05)。小尾寒羊群体中发现BB、B+和++3种基因型,频率分别为0.27,0.4和0.33;++型个体泌乳量极显着高于BB型个体(P<0.01),B+型个体泌乳量显着高于BB型个体(P<0.05);从群体泌乳量来看为++型>B+型>BB型;++型个体乳糖显着高于BB型个体(P<0.05)。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2016年08期)
彭力,何庆南,李晓燕,帅兰军,陈海霞[6](2015)在《同源盒基因A13转染对肾小管上皮细胞间充质转化和骨形成蛋白7表达的影响》一文中研究指出目的探讨转染同源盒基因A13(HOXA13)对人血清白蛋白(HSA)诱导的人肾小管上皮细胞(HKC)间充质转化(EMT)和骨形成蛋白7(BMP-7)表达的影响。方法体外培养的HKC细胞株经人血清白蛋白(20 mg/m L)作用48 h后,采用免疫印迹法检测HKC细胞角蛋白(CK)、波形蛋白(vimentin)和HOXA13蛋白的表达。应用脂质体转染技术上调HKC细胞HOXA13表达,观察HOXA13不同表达水平对人血清白蛋白超载诱导CK、vimentin、BMP-7表达改变的影响。结果 20 mg/m L HSA刺激HKC细胞48 h后,HKC细胞出现EMT样改变:CK表达下降(P<0.01)、vimentin表达增高(P<0.01);HSA超载同时使HKC细胞内HOXA13、BMP-7表达下降。HOXA13转染上调HKC细胞内HOXA13表达后,显着抑制了HSA超载诱导的EMT发生(P<0.05)和BMP-7表达的下降(P<0.05)。结论转染HOXA13可拮抗白蛋白超载诱导HKC细胞发生EMT的作用,这种作用可能与HOXA13上调BMP-7表达有关。(本文来源于《中国当代儿科杂志》期刊2015年12期)
王东,张禅那,宋雷,邹玉宝,王继征[7](2015)在《骨形成蛋白受体2基因突变Q433X导致恶性临床表型》一文中研究指出目的探讨骨形成蛋白2型受体基因(BMPR2)突变与临床表型的关系。方法我们收集了一个包含四代成员的中国人FPAH家系,该家系中有3名成员被诊断为PAH。我们提取了该家系所有成员的外周血基因组DNA并利用PCR方法直接扩增BMPR2基因的13个外显子,扩增产物纯化后直接测序并分析其序列是否存在变异位点。结果该家系被诊断为肺动脉高压的3名成员均携带BMPR2基因c.1297C>T突变,此突变导致BMPR2蛋白433位的谷氨酰胺变为终止密码子(p.Q433X)。携带此突变的3名家系成员临床表型均较恶性,平均肺动脉压力达到72.7mm Hg,且均伴有心电图的异常改变。结论 BMPR2基因突变大约占到肺动脉高压突变总数的90%以上,是其最主要的致病基因。本研究中发现的BMPR2无义突变Q433X与恶性临床表型相关联,提示该突变在疾病的发生和发展中可能扮演重要角色。(本文来源于《中国分子心脏病学杂志》期刊2015年02期)
芮丹云,唐丽媛,陈洁,鲁宁[8](2015)在《辛伐他汀对体外培养鼠骨形成蛋白BMP-2基因的调控》一文中研究指出目的研究辛伐他汀对鼠骨形成蛋白(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)及其m RNA表达的影响,验证辛伐他汀是否能够促进鼠成骨细胞的骨形成.方法将兔子分为假手术组,模型组和辛伐他汀组3个小组,每组6只.在辛伐他汀组用药1月、2月和4月时,收集各组兔子的耳中央动脉血清,将上述血清加入鼠MC3T3-E1细胞培养4d后提取总RNA,逆转录出骨形成蛋白BMP-2的cDNA后进行实时荧光定量PCR,对产物进行检测.结果用药1个月,辛伐他汀组BMP-2表达量较假手术组高2.79倍(P=0.0004),较模型组高2.66(P=0.001);用药2个月,辛伐他汀组BMP-2表达量较假手术组高1.88倍,较模型组高1.75倍(P=0.001);用药4个月,辛伐他汀组BMP-2表达量较假手术组高0.86倍(P=1.000),较模型组高1.04倍.结论辛伐他汀对骨形成有正效应.(本文来源于《昆明医科大学学报》期刊2015年04期)
张辉,李亮,王茜,甘洪全,王辉[9](2015)在《骨形成蛋白-7对多孔钽/软骨细胞复合物分泌功能以及Col-Ⅱ、AGG和Sox9基因表达的影响》一文中研究指出目的:研究人重组骨形成蛋白-7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7)对国产多孔钽/软骨细胞复合物中软骨细胞分泌功能以及Ⅱ型胶原(typeⅡcollagen,Col-Ⅱ)、蛋白聚糖(aggrecan,AGG)和SRY相关高迁移率组基因9(SRY-related high mobility group-box gene 9,Sox9)mRNA表达的影响。方法:3周龄新西兰幼兔,取双膝关节软骨细胞分离培养及鉴定,将生长状态良好的第2代细胞以1×106/m L浓度接种于多孔钽并给予不同浓度BMP-7,分为对照组(多孔钽/软骨细胞组)、50μg/L BMP-7/多孔钽/软骨细胞组、100μg/L BMP-7/多孔钽/软骨细胞组及200μg/L BMP-7/多孔钽/软骨细胞组。CCK-8法检测不同浓度BMP-7对多孔钽/软骨细胞生长及增殖的影响,扫描电镜观察各组软骨细胞在多孔钽表面及内部生长情况,二甲基亚甲蓝(dimethyl methylene blue,DMMB)比色定量法对BMP-7/多孔钽/软骨细胞复合物糖胺多糖(glycosaminoglycan,GAG)进行定量检测,实时荧光定量PCR检测Col-Ⅱ、AGG和Sox9 mRNA的表达。结果:原代软骨细胞培养24 h后呈梭形生长,4 d后细胞呈多角形,胞浆丰富。阿辛蓝(alcian blue)、番红O(safranin O)、Col-Ⅱ免疫细胞化学染色均呈阳性反应。CCK-8法细胞增殖检测结果显示,100μg/L BMP-7/多孔钽/软骨细胞组细胞增殖水平高于其他各组(P<0.05)。扫描电镜示各组软骨细胞在多孔钽表面生长状态良好,细胞有多个突起、伸展、迭层生长并覆盖于多孔钽表面。GAG定量检测显示,100μg/L BMP-7/多孔钽/软骨细胞组GAG含量比其他各组均明显升高(P<0.05);实时荧光定量PCR检测显示,各实验组Col-Ⅱ、AGG和Sox9 mRNA表达量均高于对照组,以200μg/L BMP-7/多孔钽/软骨细胞组升高最为明显(P<0.05)。结论:BMP-7/多孔钽/软骨细胞复合体能促进体外软骨细胞增殖及细胞外基质的分泌,促进软骨基因的表达。(本文来源于《北京大学学报(医学版)》期刊2015年02期)
李亮[10](2014)在《骨形成蛋白-7促进多孔钽—软骨细胞分泌功能及基因表达的实验研究》一文中研究指出目的通过比较不同浓度的BMP-7对多孔钽-软骨细胞复合物分泌功能及相关基因的表达作用,探讨BMP-7与多孔钽-软骨细胞复合培养构建组织工程软骨的可行性,为组织工程软骨修复软骨缺损提供实验依据。方法1软骨细胞的培养及分组:3周龄幼兔,取膝关节软骨行原代培养,将生长状态良好的第3代细胞以1×106/ml细胞浓度接种于多孔钽金属,分为4组:①对照组(软骨细胞与多孔金属钽共培养);②50ng/ml组(软骨细胞与多孔金属钽共培养,加入rhBMP-7使其在培养基浓度达到50ng/ml);③100ng/ml组(软骨细胞与多孔金属钽共培养,加入rhBMP-7使其在培养基浓度达到100ng/ml);④200ng/ml组(软骨细胞与多孔金属钽共培养,加入rhBMP-7使其在培养基浓度达到200ng/ml)。2软骨细胞鉴定:行II型胶原免疫细胞化学染色、阿利新蓝染色(Alcian Blue),番红-O(Safranin-O)染色。3CCK-8法检测不同浓度的BMP-7对多孔钽-软骨细胞生长及增殖情况。4扫描电镜观察各组软骨细胞在多孔钽生长情况。5二甲基亚甲蓝(DMMB)比色定量法对多孔钽-软骨细胞的糖胺多糖(GAG)进行定量分析。6II型胶原、Sox9转录因子免疫细胞化学染色并对其结果进行统计分析。7Real Time-PCR检测COL-II、AGG和Sox9mRNA的表达。结果1软骨细胞形态特点及鉴定:第3代软骨细胞接种后6~8h完成贴壁,24h后细胞呈短梭形、叁角形生长;3d时,细胞数量显着增加。Alcian Blue染色、Safranin-O染色、II型胶原免疫细胞化学染色均呈阳性反应。2CCK-8法检测不同浓度BMP-7对多孔钽-软骨细胞的生长、增殖影响,BMP-7对多孔钽-软骨细胞有促进增殖的效果,其中100ng/ml的BMP-7促增殖效果最好,但当BMP-7浓度达到200ng/ml时,细胞增殖受到轻度抑制。3扫描电镜观察各组软骨细胞生长情况,软骨细胞在多孔钽表面上伸展良好,伪足伸展充分,迭层生长,覆盖于多孔钽表面。4二甲基亚甲蓝(DMMB)比色定量法糖胺多糖(GAG)定量检测:各组细胞在培养5d和14d后,50ng/ml组和100ng/ml组均比对照组分泌GAG多,其中以100ng/ml组分泌量最多,并且随着培养时间的延长各组分泌GAG的量均显着增加。5Col-II和Sox9因子免疫细胞化学染色结果:100ng/ml组Col-II和Sox9因子的IOD值均最大,表明100ng/ml组分泌Col-II的量最多。6Real Time-PCR检测软骨细胞COL-II、AGG和Sox9的mRNA表达:50ng/ml组、100ng/ml组和200ng/ml组之间COL-II、AGG和Sox9mRNA表达量,两两比较均有统计学差异(P<0.05)且随着BMP-7浓度的提高功能基因的表达量也相应提高,第14d与第5d相比较,各基因的表达增幅程度均有所下降。结论1BMP-7对多孔钽-软骨细胞有促进增殖的效果,其中100ng/ml的BMP-7促增殖效果最好,当BMP-7浓度达到200ng/ml时,细胞增殖受到轻度抑制。2BMP-7对多孔钽-软骨细胞分泌COL-II、AGG起到了促进作用,其中浓度为100ng/ml的BMP-7促进软骨细胞分泌细胞外基质的作用最强。3BMP-7对多孔钽-软骨细胞COL-II、AGG及Sox9因子mRNA表达上调,并且随着浓度的提高各因子的mRNA相对表达量也相应升高。(本文来源于《河北联合大学》期刊2014-05-05)
人骨形成蛋白基因论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)是一类由多种病因侵犯肺小动脉,致小血管增厚、闭塞及重构,导致肺血管床阻力增加,最终导致肺动脉高压、右心室肥厚扩张,甚至右心功能衰竭的恶性心血管疾病。骨形成蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)是转化生长因子(transforming growth factor,TGF)超家族中一类重要的细胞因子。骨形
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
人骨形成蛋白基因论文参考文献
[1].张秀华,刘飞,刘英梅,陈勉,刘霞.重组人骨形成蛋白-2基因工程菌株的构建及蛋白复性纯化[J].食品与药品.2019
[2].杜永胜,周思静,周学欣,周璐茜,徐爱群.骨形成蛋白2型受体及其基因突变与肺动脉高压[J].临床肺科杂志.2018
[3].郑亚国,林松,张航,谢渡江,周陵.全外显子组测序证实家族性肺动脉高压骨形成蛋白受体2基因新突变的研究[J].中国循环杂志.2018
[4].阮蔷,赵刚,郭睿,肖月,李超.纳米级多孔负载人骨形成蛋白2基因修饰支架对前成骨细胞株分化的影响[J].中国组织工程研究.2016
[5].李晓林,牛志刚,袁燕,李列刚,周成全.湖羊和小尾寒羊骨形成蛋白受体IB型基因多态性与泌乳性状的相关性分析[J].畜牧与兽医.2016
[6].彭力,何庆南,李晓燕,帅兰军,陈海霞.同源盒基因A13转染对肾小管上皮细胞间充质转化和骨形成蛋白7表达的影响[J].中国当代儿科杂志.2015
[7].王东,张禅那,宋雷,邹玉宝,王继征.骨形成蛋白受体2基因突变Q433X导致恶性临床表型[J].中国分子心脏病学杂志.2015
[8].芮丹云,唐丽媛,陈洁,鲁宁.辛伐他汀对体外培养鼠骨形成蛋白BMP-2基因的调控[J].昆明医科大学学报.2015
[9].张辉,李亮,王茜,甘洪全,王辉.骨形成蛋白-7对多孔钽/软骨细胞复合物分泌功能以及Col-Ⅱ、AGG和Sox9基因表达的影响[J].北京大学学报(医学版).2015
[10].李亮.骨形成蛋白-7促进多孔钽—软骨细胞分泌功能及基因表达的实验研究[D].河北联合大学.2014