孙越[1]2003年在《阿扑吗啡对帕金森病神经保护作用的电化学和组织化学实验研究》文中提出阿扑吗啡(apomorphine，APO)作为神经递质多巴胺(dopamine，DA)D_1-D_2受体激动剂，它在清除自由基、抑制膜脂质过氧化和螯合铁离子等神经保护作用方面具有极大的潜质。本实验旨在观察APO对6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine，6-OHDA)单侧损毁大鼠的神经保护作用。应用快速周期伏安法(fast cyclic voltammetry，FCV)，在体动态监测了预先腹腔注射APO对电刺激6-OHDA单侧损毁大鼠内侧前脑束(medial forebrain bundle，MFB)诱发的尾壳核(caudate putamen，CPu)DA释放量的影响，应用高效液相色谱电化学(high performance liquid chromatography-electrical chemistry，HPLC-ECD)检测法观察了CPu内DA及其代谢产物二羟基苯乙酸(dihydroxyphenylacetic acid，DOPAC)和高香草酸(homovanillic acid，HVA)的含量变化，并结合酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase，TH)免疫组织化学技术观察了黑质(substantia nigra，SN)中DA能神经元的存活情况。应用Perls’铁染色技术观察SN中铁的变化。结果如下： 1、正常大鼠腹腔注射APO10mg／kg后CPu DA的释放量与注射同等剂量生理盐(normal saline，NS)的对照组相比在1小时内无明显差别。 2、预先腹腔注射APO(10mg／kg)，6-OHDA单侧损毁大鼠损毁侧CPu内DA的释放量无明显降低，与NS组6一OHDA单侧损毁大鼠未损毁侧义。对照组相比差异有显着性。而两CPu DA释放量差别无统计学意3、预先腹腔注射APO，6一OHDA单侧损毁大鼠损毁侧CPu内DA及其 代谢产物HVA的含量不仅无明显降低，而且明显高于NS对照组。 但是两组未损毁侧无明显差别。4、预先腹腔注射APO，6一OHDA单侧损毁大鼠损毁侧SN内TH阳性神 经元数目降低不明显，与NS对照组相比差异有显着性。而两组 6一OHDA单侧损毁大鼠未损毁侧SN内的TH阳性神经元数目差别无 统计学意义。5、预先腹腔注射APO，6一OHDA单侧损毁大鼠损毁侧SN内铁染色阳性 细胞数明显低于NS对照组，差别有显着性。而两组6-OHDA单侧损 毁大鼠未损毁侧SN内的铁染色细胞数差别无统计学意义。 上述结果表明:APO可抑制6一OHDA诱发的细胞毒性作用，对PD具有神经保护作用。其机制可能主要是通过鳌合由6一OHDA诱发的过量铁离子，从而抑制自由基的生成，阻断氧化应激反应来完成的。同时，还为证明APO不是作为DAD:、D:受体激动剂来起神经保护作用提供了另一佐证。本实验为临床应用APO防治PD提供了强有力的实验依据。
张阳, 张志坚, 俞晓岚, 黄志新, 吴秀丽[2]2011年在《慢病毒介导的新型Tet-On系统大鼠GDNF和TH双基因脑内转移对帕金森病大鼠模型的保护作用》文中进行了进一步梳理目的探讨慢病毒介导的新型Tet-On系统大鼠胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因和酪氨酸羟化酶(TH)双基因直接转移对帕金森病(PD)大鼠的保护作用。方法将携带TH、GDNF基因并含启动子为Palb的四环素应答元件的慢病毒(Lv-TH-GDNF)和四环素反式作用子rtTA2s-M2病毒共同注射到SD大鼠左侧纹状体,用强力霉素(DOX)诱导大鼠目的基因GDNF和TH的表达。1周后在大鼠的同侧纹状体注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)损毁纹状体的DA能神经元。通过旋转行为、黑质TH免疫组化染色以及高效液相色谱-电化学方法(HPLC-ECD)检测纹状体DA含量评估其保护效应;通过RT-PCR、免疫印迹观察Lv-TH-GDNF在脑内的表达。实验与健康对照组、磷酸缓冲液(PBS)对照组进行比较。结果在6-OHDA损伤后4周,Lv-TH-GDNF+rt-TA2s-M2+DOX组大鼠阿扑吗啡诱发的旋转效应均明显低于PBS对照组(P<0.01),损毁侧的的黑质区TH阳性细胞表达强度、纹状体DA含量均明显高于PBS对照组(P<0.01),但二者均低于健康对照组(P<0.01)。RT-PCR、免疫印迹结果显示,与PBS对照组比较,Lv-TH-GDNF+rtTA2s-M2+DOX组大鼠纹状体TH、GDNF基因的表达明显增高(P<0.01)。结论慢病毒介导的新型Tet-On系统大鼠GDNF和TH双基因脑内直接转移,在强力霉素诱导下可减缓6-OHDA诱发的大鼠DA能神经元进行性变性,具有保护作用。
参考文献：
[1]. 阿扑吗啡对帕金森病神经保护作用的电化学和组织化学实验研究[D]. 孙越. 青岛大学. 2003
[2]. 慢病毒介导的新型Tet-On系统大鼠GDNF和TH双基因脑内转移对帕金森病大鼠模型的保护作用[J]. 张阳, 张志坚, 俞晓岚, 黄志新, 吴秀丽. 中国药理学通报. 2011