导读:本文包含了周期性机械拉伸论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:细胞,周期性,机械,纤维,干细胞,组织,力学。
周期性机械拉伸论文文献综述
何玉童,张马辉,宋晨,叶根澜,余磊[1](2017)在《周期性机械拉伸促进C2C12细胞成肌过程中microRNA表达谱分析》一文中研究指出背景:近年来,骨骼肌损伤的发生率越来越高,但骨骼肌本身的修复能力有限,研究骨骼肌损伤修复的分子机制对于骨骼肌损伤的治疗具有积极的作用。目的:探讨microRNA在骨骼肌再生中的作用。方法:Flexcell-5000拉伸装置周期性体外拉伸C2C12成肌细胞,选取合适的拉伸频率促进成肌发生;高通量测序检测对照组和拉伸组C2C12细胞中差异microRNA的表达;并对这些差异microRNA进行生物信息学分析。结果与结论:(1)10%形变、0.125 Hz拉伸频率可促进C2C12成肌细胞增殖,并可提高C2C12细胞中成肌因子Myo D和Myogenin的表达;(2)0.125 Hz拉伸组和对照组比较共有10个差异microRNA,包括上调的miR-340-5p/449c-5p/1941-3p和下调的miR-500-3p/1934-5p/31-3p/378a-5p/3473b/331-3p/5097;(3)这些microRNA可能通过多种的调节机制对C2C12成肌细胞的成肌过程进行调节,其中较为重要的通路有MAPK信号通路;(4)结果表明,低频率周期性力学刺激可能通过microRNA的变化引起成肌因子的表达升高最终引起成肌发生,其中可能参与的信号通路是MAPK信号通路。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2017年28期)
何继保[2](2017)在《不同频率的周期性机械拉伸对兔纤维环源干细胞增值的影响》一文中研究指出目的提取鉴定兔纤维环源干细胞(Annulus Fibrosus-derived Stem Cells,AFSCs),探讨不同频率的周期性机械拉伸对兔纤维环源干细胞增殖的影响。方法这项研究的目的是以离体实验探讨不同频率的周期性机械拉伸对兔纤维环源干细胞的影响。分离6周龄左右新西兰大耳白兔的纤维环,酶消化法提取、培养并鉴定纤维环源干细胞,将细胞种植于纤连蛋白修饰的聚二甲硅氧烷拉伸皿内,按照以下不同频率的周期性机械拉伸条件来分组实验,实验组细胞周期性机械拉伸频率为0.1Hz、0.5Hz、1.0Hz、2.0Hz,拉伸幅度为5%,加载相同的拉伸时间4h。对照组纤维环源干细胞与实验组细胞保持培养条件一致的前提下不进行拉伸刺激。应用RT-PCR及Elisa检测加载不用频率的周期性循环拉伸应变后细胞合成与分解代谢基因(COL-1,COL-II,Aggrecan,MMP-3,MMP-13,Timp-1)及相关蛋白的表达变化;应用免疫荧光染色评估兔纤维环源干细胞在采用不同频率的周期性机械拉伸后形态学上的变化。结果成功提取并鉴定出兔纤维环源干细胞,具有良好的增值能力及干细胞表面标记物OCT-4,Nucelostemin(NS)及SSEA-4表达;具有成骨、成脂及成软骨的多向诱导分化能力。加载以不同频率周期性机械拉伸的兔纤维环源细胞在0.5Hz频率时合成代谢基因(aggrecan,type I collagen,and type II collagen)及相关蛋白明显表达,分解代谢基因(MMP-3,MMP-13,TIMP-1)及相关蛋白表达受限。在应用1.0Hz、2.0Hz高频率的周期性循环拉伸力学过度刺激时,兔纤维环源干细胞的分解代谢基因(MMP-3,MMP-13,TIMP-1)及相关蛋白则呈现高表达,尤其是2.0Hz频率拉伸时,合成代谢基因(aggrecan,type I collagen,and type II collagen)及相关蛋白则受到了明显的抑制。在应用了0.1Hz、0.5Hz、1.0Hz、2.0Hz频率的周期性机械拉伸刺激后细胞形态学上未见明显变化,在2.0Hz拉伸刺激的细胞骨架染色上可见细胞骨架轻微增大扩散。结论给予兔纤维环源干细胞适当频率的拉伸刺激能够促进兔纤维环源干细胞合成基因及相关蛋白的表达,抑制分解代谢基因及相关蛋白的表达。(本文来源于《苏州大学》期刊2017-05-01)
宋怿江,杨力[3](2015)在《周期性机械拉伸对原代人皮肤成纤维细胞的影响》一文中研究指出目的:在正常情况下,人皮肤成纤维细胞处于相对静止状态,当皮肤受到损伤或发生某些病变后,成纤维细胞常会表现为增殖活跃和代谢旺盛,因此该类细胞常用于修复受损的皮肤组织。当前国内外一些科研机构利用体外原代培养人皮肤成纤维细胞,将其作为靶细胞,修复老化或受损的皮肤组织。借助高通量数据分析技术,分析受到力学刺激后原代人皮肤成纤维细胞中基因的差异变化情况,从而了解皮肤在受到力学刺激后的反应机制。方法:(本文来源于《第十一届全国生物力学学术会议暨第十叁届全国生物流变学学术会议会议论文摘要汇编》期刊2015-10-10)
柳柏梅,邱海霞,茹孟洁,安美文,刘阳[4](2015)在《周期性机械拉伸对人真皮成纤维细胞增殖及胶原蛋白代谢的影响》一文中研究指出目的体外研究周期性机械应力刺激对成纤维细胞生物学行为的影响,进一步了解皮肤创面愈合的生物学机制。方法原代提取人真皮成纤维细胞(human skin fibroblasts,HFB)。采用FX-4000柔性基底应变加载系统对HFB施加周期性机械拉伸,流式细胞仪检测细胞周期,实时荧光定量PCR检测各组成纤维细胞内Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白mRNA的表达,ELISA方法检测各组上清液中Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白的浓度。结果与静态对照组比较,10%拉伸幅度加载培养24h后,细胞增殖明显;10%拉伸幅度作用24h,48h可以促进成纤维细胞Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白mRNA的表达;20%拉伸幅度作用24h,48h可以促进上清液中Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白的合成。结论力学刺激可以改变HFB的细胞周期,促进HFB的增殖;也能够影响细胞外基质中Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白的代谢,且与力学刺激的幅度和时间有关。(本文来源于《中国皮肤性病学杂志》期刊2015年09期)
邱海霞[5](2014)在《周期性机械拉伸对人真皮成纤维细胞增殖及胶原蛋白代谢的影响》一文中研究指出皮肤创面愈合是一个复杂而有序的动态生物学过程,依赖于成纤维细胞与细胞外基质间的相互影响、相互作用。正常生理状态下,人真皮成纤维细胞处于皮肤张力作用下,成纤维细胞的增殖、分化、胶原蛋白代谢及基因表达等生物学过程都与其所处的力学环境有关。了解与调控张力作用下成纤维细胞的生物学行为是促进伤口愈合、提高愈合质量、预防瘢痕异常增生等皮肤疾病及慢性难愈性创面的基础与关键。体外研究周期性机械应力刺激对成纤维细胞生物学行为的影响,有助于进一步了解皮肤创面愈合的生物学机制,为皮肤疾病的治疗方法及评估提供重要参考。本实验通过FX-4000柔性基底应变加载系统对人真皮成纤维细胞进行力学环境培养,研究力学刺激对成纤维细胞增殖及胶原蛋白基质代谢的影响,主要研究内容及结论如下:1.采用胶原酶消化法原代提取与培养人真皮成纤维细胞,以3×104/ml密度接种于裱衬Ⅰ型胶原蛋白的柔性细胞6孔培养板,采用FX-4000柔性基底应变加载系统对人真皮成纤维细胞施加频率为0.1Hz、拉伸幅度分别为10%和20%的周期性机械拉伸,并于拉伸后24h和48h提取细胞mRNA、收集细胞及细胞培养液上清,以无压力培养为静态对照。2.采用流式细胞仪检测细胞周期,分析S期占整个细胞周期的百分比,S期代表细胞增殖特性,S期所占百分比越高,表明细胞增殖越旺盛。实验结果表明:与静态对照组比较,10%拉伸幅度作用24h后,S期占细胞周期的比例显着增高,随着时间的推移,48h,S期占细胞周期的比例降低。成纤维细胞能够对0.1Hz、拉伸幅度10%、拉伸24h的力学刺激作出反应,改变细胞周期,促进成纤维细胞增殖,拉伸48h后反而下降。3.周期性机械拉伸后,提取细胞内总RNA,收集细胞培养液上清,采用实时荧光定量PCR方法研究各组成纤维细胞内Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA的表达;ELISA方法检测各组上清液中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的浓度。实验结果表明:10%拉伸幅度作用24h、48h及20%拉伸幅度作用24h均可以促进成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白mRNA的表达;10%拉伸幅度作用24h、48h均可以促进Ⅲ型胶原蛋白mRNA的表达;10%拉伸幅度作用48h及20%拉伸幅度作用24h、48h均可以促进细胞培养液上清中Ⅰ型胶原蛋白的合成;10%拉伸幅度作用24h及20%拉伸幅度作用24h、48h均可以促进细胞培养液上清中Ⅲ型胶原蛋白的合成。力学刺激能够影响细胞外基质Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的代谢,且与力学刺激的幅度和时间有关。(本文来源于《太原理工大学》期刊2014-05-01)
张非飞,颜艳,吕永钢,钟莉,宋关斌[6](2012)在《周期性机械拉伸对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响》一文中研究指出目的探讨周期性机械拉伸对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLSs)增殖能力的影响。方法实验组细胞在周期性机械拉伸频率为1.0 Hz、拉伸幅度为3%、6%和9%的条件下,分别对RA-FLSs加载2、6和12 h。对照组细胞在保持与实验组培养条件一致的情况下不进行拉伸刺激。机械拉伸后,用流式细胞术和MTS检测细胞的增殖和活性。RT-PCR检测加载后细胞周期调控因子(CyclinD1、CyclinE1、CDK2、P27)在基因水平上的表达变化。结果 6%和9%的拉伸刺激持续作用6、12 h使RA-FLSs增殖和活性显着降低(P<0.05),同时CDK2和CyclinE1的mRNA表达降低,P27 mRNA的表达增高(P<0.05),周期性机械拉伸对CyclinD1表达的影响相对较小。结论周期性机械拉伸对RA-FLSs增殖能力的影响与拉伸强度以及持续的时间有关,6%和9%的机械拉伸刺激可以抑制RA-FLSs的增殖,而这种增殖抑制作用可能是通过调控CyclinE1,CDK2和P27的表达来实现的。本研究对于探讨力学刺激在类风湿性关节炎的发病机制以及临床防治中的作用具有一定意义。(本文来源于《医用生物力学》期刊2012年06期)
王晓君,陈维毅,李晓娜,冯鹏飞,高志鹏[7](2012)在《周期性机械拉伸对兔角膜成纤维细胞MMP-2/TIMP-2及TGF-β1表达的影响》一文中研究指出研究了周期性机械拉伸对角膜成纤维细胞外基质中金属蛋白酶-2(Matrix metalloprotei-nase-2,MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制剂-2(Tissue inhibitors of metalloproteinase-2,TIMP-2)及转化生长因子-β1(Transforming growth factorβ1,TGF-β1)表达的影响。对正常兔角膜成纤维细胞进行幅度分别为5%、10%及15%的周期性机械拉伸,并分别于拉伸后6h、24h取细胞培养液,采用ELISA方法检测MMP-2、TIMP-2及TGF-β1的含量。当拉伸幅度为5%时,6h、24h后,MMP-2、TIMP-2及TGF-β1的含量与静态对照组相比均无统计学差异;当拉伸幅度为10%时,6h后MMP-2、TIMP-2及TGF-β1的含量与静态对照组相比无统计学差异,24h后MMP-2的含量显着升高(p<0.05);当拉伸幅度为15%时,6h后MMP-2、TIMP-2及TGF-β1的含量与静态对照组相比仍无统计学差异,拉伸24h后MMP-2、TGF-β1含量显着升高,TIMP-2含量显着降低(p<0.05)。结果表明,在体外以一定的幅度周期性拉伸角膜成纤维细胞一定时间后,细胞分泌的MMP-2、TIMP-2及TGF-β1发生显着改变,叁者相互作用,共同调节角膜成纤维细胞的生物学行为。(本文来源于《太原理工大学学报》期刊2012年06期)
袁琳,宋关斌[8](2012)在《周期性机械拉伸加载通过激活FAK/ERK/c-fos信号途径促进骨髓间充质干细胞增殖》一文中研究指出背景和目的:骨髓间充质干细胞(Bone marrow-derived mesenchymal stem cell,MSCs)是一种具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞,已成为临床细胞治疗、组织工程研究的热点。我们前期的实验工作发现在频率为1 Hz、10%形变量、周期性机械拉伸加载15 min且继续培养6 h的条件下,大鼠MSCs(rMSCs)的增殖率显着高于静态培养对照组。然而该过程所涉及的力信号转导分子尚不清楚。基于此,本文主要考察了机械拉伸加载诱导rMSCs增殖的力信号转导途径。材料和方法:以体重150 g左右的SD大鼠为实验材料,采用密度梯度离心结合差异贴壁法分离培(本文来源于《第十届全国生物力学学术会议暨第十二届全国生物流变学学术会议论文摘要汇编》期刊2012-10-11)
周薇,吕永钢,Gurinder,K,Singha,颜艳,刘万钱[9](2011)在《周期性机械拉伸对类风湿关节炎和骨关节炎成纤维样滑膜细胞BMP-2表达的影响》一文中研究指出目的研究周期性拉伸对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)和骨关节炎(osteoarthritis,OA)成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)中骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)表达的影响,探讨力学刺激在不同病理过程中对滑膜组织的作用。方法在正常条件和炎症条件下使用Flex cell 4000周期性力学加载系统,分别对正常、RA、OA来源的人膝关节FLS施加连续2 h和6 h的6%、0.5 Hz的拉应力,比较测定BMP-2 mRNA表达的差异性。结果 2 h的机械拉伸对3种FLS中BMP-2 mRNA的水平均无显着性影响6,h的机械拉伸能够显着升高RA FLS中BMP-2 mRNA的水平。炎症因子(IL-1β)作用2 h对正常FLS无显着影响,作用6 h使其中BMP-2 mRNA的水平显着升高;IL-1β作用2 h和6 h均使RA FLS中BMP-2 mRNA的水平显着升高,但只有作用2 h才使OA FLS中BMP-2 mRNA的水平显着升高,作用6 h对OA FLS中BMP-2 mRNA的水平无显着影响;炎症因子和力学刺激共同作用2 h使正常和RA FLS中BMP-2 mRNA的水平显着升高,作用6 h使正常、RA、OAFLS中BMP-2 mRNA水平均显着升高。结论正常、RA、OA FLS中BMP-2 mRNA对于力学刺激和炎症因子的响应不同,结果提示在RA和OA发病机制中,炎症因子的影响可能比力学刺激更强;力学刺激和IL-1β共同作用6 h后对OA FLS中BMP-2 mRNA产生协同效应,提示两者联合作用对OA病情发展具有一定作用。(本文来源于《医用生物力学》期刊2011年02期)
周薇[10](2010)在《周期性机械拉伸对RA及OA成纤维样滑膜细胞BMP-2表达的影响》一文中研究指出类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA)与骨关节炎(osteoarthritis, OA)患者普遍受累于滑膜炎症。炎症因子和力学刺激是调节滑膜炎症,影响病情发展的两个重要因素。一方面,B细胞、巨噬细胞分泌IL-1、肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-alpha, TNF-α)等炎症因子,促使前列腺素(PGE2)、内皮细胞粘附分子(hUVEC)、基质金属蛋白酶(MMPs)等细胞因子释放,引起滑膜增厚、充血、水肿及淋巴细胞和巨噬细胞浸润。另一方面,生理条件下的力学刺激使滑膜增生,细胞活化、增殖并加重慢性炎症。骨形态发生蛋白(Bone morphogenetic proteins 2, BMP-2)是属于转化生长因子-β(transforming growth factor-β, TGF-β)家族的一类多功能糖蛋白,与胚胎发生、神经修复、血管发生等生理功能密切相关。BMP-2具有异位成骨、调节细胞分化、迁移的作用,能够促进骨赘形成,调节成纤维细胞的增殖与凋亡,与关节滑膜的增生有重要的联系。本文采用生物力学、细胞生物学、分子生物学等技术方法研究人体膝关节成纤维样滑膜细胞对于周期性机械拉伸的响应,重点就力学信号-基因表达关系进行了初步探索。主要工作和结论如下:①采用组织块法培养来源于正常人、RA、OA患者的FLS,并通过聚合酶链式反应(PCR)和western blotting方法检测BMP-2基因和蛋白在叁者中的差异性表达。结果表明,BMP-2 mRNA在OA FLS中的表达量明显高于正常及RA FLS。蛋白水平的检测与此相近。提示OA与RA在发病机制上存在差异。②分别在正常条件和炎症因子条件下使用周期性力学加载装置对正常、RA、OA FLS施加机械拉伸应变,应变水平为6%,受载时间分别为2、6h,研究FLS对生理条件下的力学刺激在不同加载时间的生化响应以及BMP-2基因表达的影响。结果表明:1)6%、0.5HZ、2h的机械拉伸对叁种FLS中BMP-2 mRNA的水平无显着性影响;6%、0.5HZ、6h的机械拉伸使叁种FLS中BMP-2 mRNA的表达显着性升高。2)炎症因子IL-1β能够诱导BMP-2的大量表达,且在2-6h内呈时间依赖性增加。3)炎症因子条件下,6%、0.5HZ、2h和6%、0.5HZ、6h的机械拉伸使正常、RA FLS中IL-1β诱导的BMP-2 mRNA水平显着降低,而使OA组IL-1β诱导的BMP-2 mRNA水平显着升高。综上所述,本研究表明,体外实验证实BMP-2在正常人、RA、OA FLS中的表达量粗在差异;力学刺激和炎症因子均能够引起BMP-2基因表达量的增加;在炎症条件下,力学加载所引起的正常、OA、RA FLS中BMP-2基因的不同响应则预示着力学因素对于OA和RA病情的不同影响。(本文来源于《重庆大学》期刊2010-04-01)
周期性机械拉伸论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
目的提取鉴定兔纤维环源干细胞(Annulus Fibrosus-derived Stem Cells,AFSCs),探讨不同频率的周期性机械拉伸对兔纤维环源干细胞增殖的影响。方法这项研究的目的是以离体实验探讨不同频率的周期性机械拉伸对兔纤维环源干细胞的影响。分离6周龄左右新西兰大耳白兔的纤维环,酶消化法提取、培养并鉴定纤维环源干细胞,将细胞种植于纤连蛋白修饰的聚二甲硅氧烷拉伸皿内,按照以下不同频率的周期性机械拉伸条件来分组实验,实验组细胞周期性机械拉伸频率为0.1Hz、0.5Hz、1.0Hz、2.0Hz,拉伸幅度为5%,加载相同的拉伸时间4h。对照组纤维环源干细胞与实验组细胞保持培养条件一致的前提下不进行拉伸刺激。应用RT-PCR及Elisa检测加载不用频率的周期性循环拉伸应变后细胞合成与分解代谢基因(COL-1,COL-II,Aggrecan,MMP-3,MMP-13,Timp-1)及相关蛋白的表达变化;应用免疫荧光染色评估兔纤维环源干细胞在采用不同频率的周期性机械拉伸后形态学上的变化。结果成功提取并鉴定出兔纤维环源干细胞,具有良好的增值能力及干细胞表面标记物OCT-4,Nucelostemin(NS)及SSEA-4表达;具有成骨、成脂及成软骨的多向诱导分化能力。加载以不同频率周期性机械拉伸的兔纤维环源细胞在0.5Hz频率时合成代谢基因(aggrecan,type I collagen,and type II collagen)及相关蛋白明显表达,分解代谢基因(MMP-3,MMP-13,TIMP-1)及相关蛋白表达受限。在应用1.0Hz、2.0Hz高频率的周期性循环拉伸力学过度刺激时,兔纤维环源干细胞的分解代谢基因(MMP-3,MMP-13,TIMP-1)及相关蛋白则呈现高表达,尤其是2.0Hz频率拉伸时,合成代谢基因(aggrecan,type I collagen,and type II collagen)及相关蛋白则受到了明显的抑制。在应用了0.1Hz、0.5Hz、1.0Hz、2.0Hz频率的周期性机械拉伸刺激后细胞形态学上未见明显变化,在2.0Hz拉伸刺激的细胞骨架染色上可见细胞骨架轻微增大扩散。结论给予兔纤维环源干细胞适当频率的拉伸刺激能够促进兔纤维环源干细胞合成基因及相关蛋白的表达,抑制分解代谢基因及相关蛋白的表达。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
周期性机械拉伸论文参考文献
[1].何玉童,张马辉,宋晨,叶根澜,余磊.周期性机械拉伸促进C2C12细胞成肌过程中microRNA表达谱分析[J].中国组织工程研究.2017
[2].何继保.不同频率的周期性机械拉伸对兔纤维环源干细胞增值的影响[D].苏州大学.2017
[3].宋怿江,杨力.周期性机械拉伸对原代人皮肤成纤维细胞的影响[C].第十一届全国生物力学学术会议暨第十叁届全国生物流变学学术会议会议论文摘要汇编.2015
[4].柳柏梅,邱海霞,茹孟洁,安美文,刘阳.周期性机械拉伸对人真皮成纤维细胞增殖及胶原蛋白代谢的影响[J].中国皮肤性病学杂志.2015
[5].邱海霞.周期性机械拉伸对人真皮成纤维细胞增殖及胶原蛋白代谢的影响[D].太原理工大学.2014
[6].张非飞,颜艳,吕永钢,钟莉,宋关斌.周期性机械拉伸对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响[J].医用生物力学.2012
[7].王晓君,陈维毅,李晓娜,冯鹏飞,高志鹏.周期性机械拉伸对兔角膜成纤维细胞MMP-2/TIMP-2及TGF-β1表达的影响[J].太原理工大学学报.2012
[8].袁琳,宋关斌.周期性机械拉伸加载通过激活FAK/ERK/c-fos信号途径促进骨髓间充质干细胞增殖[C].第十届全国生物力学学术会议暨第十二届全国生物流变学学术会议论文摘要汇编.2012
[9].周薇,吕永钢,Gurinder,K,Singha,颜艳,刘万钱.周期性机械拉伸对类风湿关节炎和骨关节炎成纤维样滑膜细胞BMP-2表达的影响[J].医用生物力学.2011
[10].周薇.周期性机械拉伸对RA及OA成纤维样滑膜细胞BMP-2表达的影响[D].重庆大学.2010