禽白血病病毒A亚群分离株感染性克隆的构建

禽白血病病毒A亚群分离株感染性克隆的构建

论文摘要

为探究A亚群禽白血病病毒(ALV-A)的致病机理,对本实验室分离到的一株命名为HB2015012的ALV-A进行感染性克隆构建。采用PCR方法将基因组分为重叠的3段分别扩增该分离株的cDNA,经酶切按顺序连接至pTOPO-Blunt Simpie构建重组质粒TOPO-012-ABC,进而转染易感的DF-1细胞,进行病毒的拯救。经禽白血病抗原检测试剂盒检测,PCR及间接免疫荧光(IFA)鉴定,均表明拯救出了具有感染性的重组A亚群禽白血病病毒(rALV-A),命名为rHB2015012。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 病毒来源
  •   1.2 主要试剂
  •   1.3 引物设计
  •   1.4 全基因克隆
  •     1.4.1 反应体系
  •     1.4.2 反应条件
  •   1.5 感染性克隆构建
  •   1.6 病毒拯救
  •   1.7 群特异性抗原P27 ELISA检测
  •   1.8 PCR鉴定
  •   1.9 间接免疫荧光试验 (IFA)
  • 2 结果
  •   2.1 全基因克隆
  •   2.2 感染性克隆构建
  •   2.3 群特异性抗原P27 ELISA检测
  •   2.4 PCR鉴定
  •   2.5 间接免疫荧光
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 陈雪阳,梁雄燕,方春,顾玉芳,杨玉莹

    关键词: 感染性克隆,病毒拯救

    来源: 畜牧与兽医 2019年08期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 长江大学动物科学学院

    基金: 国家自然科学基金面上项目(31640081),兽医生物技术国家重点实验室2017年度开放基金(SKLVBF201708)

    分类号: S852.65

    页码: 79-82

    总页数: 4

    文件大小: 466K

    下载量: 145

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