导读:本文包含了组织工程骨论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:羟基,磷灰石,干细胞,组织,工程,蛋白,骨髓。
组织工程骨论文文献综述
王福科,张红,李彦林,刘流,何川[1]（2019）在《联合培养血管内皮细胞与脂肪干细胞构建组织工程骨异位成骨》一文中研究指出目的探讨将联合培养血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)和脂肪干细胞(adiposederived stem cells,ADSCs)的培养体系作为种子细胞的组织工程骨异位成骨能力。方法采用纤维粘连蛋白复合部分脱蛋白骨(partially deproteinised bone,PDPB)制备部分脱蛋白生物骨(partially deproteinised biologic bone,PDPBB);分离培养18周龄SD大鼠ADSCs及足月妊娠SD大鼠脐血VECs。体外构建3种组织工程骨:PDPBB+VECs(A组)、PDPBB+ADSCs(B组)、PDPBB+联合培养细胞(VECs∶ADSCs为1∶1,C组),以单纯PDPBB为对照组(D组)。细胞移植后10 d行扫描电镜观察细胞在各组支架上的黏附情况。取18周龄SD大鼠48只,随机分为A、B、C、D 4组,每组12只。分别将A、B、C、D 4种支架材料植入相应组别的大鼠股部肌袋,术后2、4、8、12周处死动物行大体观察及HE染色和Masson染色组织学观察,并取Masson染色切片行骨胶原量定量检测。结果扫描电镜观察示,PDPB材料孔隙内部相互连通;纤维粘连蛋白修饰的PDPBB表面大量片状蛋白结晶松散附着于支架表面;复合细胞联合培养10 d后,C组大量细胞与PDPBB附着,细胞相互堆积形成细胞团,多角形细胞和梭形细胞混合分布,细胞沿骨小梁生长,形成细胞层。大体观察示术后2周各组肉芽组织开始长入材料孔隙。C组自4周后材料表面逐渐产生大量白色软骨样物质,表面高低不平。至12周时,A组材料表面血管量增多,材料呈实变;B组材料表面出现少许白色软骨样物质,但材料孔隙未见明显减小;D组材料孔隙大小未见明显减小。组织学观察可见术后2周,各组间骨胶原量比较差异无统计学意义(F=2.551,P=0.088);术后4、8、12周,C组骨胶原量显着高于其余3组,B组高于D组,差异均有统计学意义(P<0.05);A组与B、D组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论联合培养VECs与ADSCs作为种子细胞构建组织工程骨的异位成骨能力最强。(本文来源于《中国修复重建外科杂志》期刊2019年10期）
陈娇,舒莉萍,李轩泽,刘琴,吴颖[2]（2019）在《聚乳酸-羟基乙酸共聚物负载人骨髓间充质干细胞构建组织工程骨》一文中研究指出背景:聚乳酸-羟基乙酸共聚物是被批准用于实验及临床的少数生物材料之一,其具有良好的生物相容性和生物降解性及优异的机械性能,是一种良好的组织工程支架载体。目的:验证聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米叁维多孔支架材料与人骨髓间充质干细胞的体外生物相容性及体内异位成骨能力。方法:(1)运用静电纺丝技术将150 g/L的聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶液电纺成纳米纤维膜,将第3代人骨髓间充质干细胞(人骨髓标本获取已经获得贵州医科大学附属医院伦理委员会批准)种植于聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米纤维支架上,采用成骨诱导液培养7 d,DAPI荧光染色、吖啶橙荧光染色及扫描电镜观察细胞-支架复合物的生长情况;(2)将第3代人骨髓间充质干细胞种植于聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米纤维支架上,使用成骨诱导液诱导培养的作为实验组,不使用成骨诱导液诱导培养的作为对照组,两组培养14 d后分别植入裸鼠皮下,术后12周取出植入材料标本,行苏木精-伊红染色、茜素红染色、碱性磷酸酶染色和Ⅰ型胶原免疫组织化学染色观察植入物体内异位成骨情况。动物实验获得贵州医科大学实验动物伦理委员会批准,批准号:NO1759999。结果与结论:(1)DAPI荧光染色与吖啶橙荧光染色显示细胞黏附于聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米纤维支架上,生长良好;(2)扫描电镜显示,成骨诱导培养的人骨髓间充质干细胞在聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米纤维支架上生长良好,细胞产生丰富的细胞外基质并覆盖于纳米纤维支架表面;(3)植入12周后,两组茜素红染色、碱性磷酸酶染色和Ⅰ型胶原染色呈阳性,其中实验组各染色阳性表达强于对照组;苏木精-伊红染色显示实验组有较多成骨细胞和典型的骨陷窝,对照组仅有少量骨组织形成;(4)研究表明,聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米纤维膜具有良好的生物相容性及体内异位成骨能力,可作为骨组织工程支架材料。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2019年26期）
刁兆峰,李晓亮,艾力麦尔旦·艾尼瓦尔,林成,周梅[3]（2019）在《上颌窦提升中羟基磷灰石/β-磷酸叁钙/壳聚糖/甲基纤维素组织工程骨的成骨效应》一文中研究指出背景:前期实验构建了羟基磷灰石/β-磷酸叁钙/壳聚糖/甲基纤维素叁维复合支架材料,发现其具有良好的理化性能和生物相容性。目的:评估可注射性羟基磷灰石/β-磷酸叁钙/壳聚糖/甲基纤维素支架复合骨髓间充质干细胞用于兔上颌窦提升的成骨效果。方法:取24只新西兰大白兔(新疆医科大学动物实验中心提供),每只兔均制作4处上颌窦提升区域,其中3处分别植入可注射性羟基磷灰石/β-磷酸叁钙/壳聚糖/甲基纤维素支架与骨髓间充质干细胞复合物(实验组)、可注射性羟基磷灰石/β-磷酸叁钙/壳聚糖/甲基纤维素支架(对照组1)、羟基磷灰石/β-磷酸叁钙骨粉(对照组2),最后一处不植入任何材料,作为空白对照。术后4,8,12周,取上颌窦提升区域标本,分别进行锥形束CT扫描、苏木精-伊红染色与免疫组织学化染色观察。实验经新疆医科大学第一附属医院实验动物伦理委员会审议批准(批准编号IACUC20170706-02)。结果与结论:①锥形束CT显示,空白对照组始终无新骨生成,其余3组术后8周时可见新骨生成,且以实验组成骨效果最明显;术后12周时,实验组、对照组1、对照组2成骨效果进一步增强,3组间差异不明显;②苏木精-伊红染色显示,实验组术后8,12周的成骨效果优于对照组1、对照组2(P <0.05);③免疫组织化学染色显示,实验组术后8周的成骨指标骨形态发生蛋白2、血管内皮生长因子表达均强于对照组1、对照组2(P <0.05);术后12周时,3组间两指标表达差异不明显(P> 0.05);④结果表明,羟基磷灰石/β-磷酸叁钙/壳聚糖/甲基纤维素可注射组织工程骨可促进上颌窦提升区域的骨形成。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2019年22期）
缪吴军[4]（2019）在《新型个体化组织工程骨的构建及体内外成骨作用的实验研究》一文中研究指出研究目的:本课题旨在应用3D打印技术制备聚己内酯(PCL)支架,协同富血小板血浆(PRP)和骨形态发生蛋白2(BMP2)的促成骨作用,构建具有良好骨修复能力的个体化复合组织工程骨。研究方法:通过3D打印技术构建不同孔隙率的PCL支架并进行力学性能、孔隙率等相关检测。利用Landesberg二次离心法获取富血小板血浆(PRP),通过血小板计数、电镜观察、HE切片染色等方法表征。利用冷冻干燥法制备PCL/PRP复合支架、PCL/PRP/BMP2复合组织工程骨。采用全骨髓贴壁法获取、分离、培养新西兰大耳白兔骨髓间充质干细胞(BMSCs),定期观察其生长状态,通过成骨、成脂肪、成软骨细胞“叁系”分化及Western Blot、免疫荧光等检测方法进行鉴定。体外细胞水平观察PRP/BMP2协同促成骨分化能力,设立不同的分组:空白对照组、PRP组、PRP/BMP2组、成骨诱导液组,通过碱性磷酸酶染色、茜素红S染色法、PCR法检测成骨相关基因ALP、OCN的表达观察实验组促进成骨分化的能力。体外水平观察组织工程骨的促成骨分化及BMSCs的增殖能力,设立分组:单纯PCL支架(普通培养基组)、PCL/PRP复合支架、PCL/PRP/BMP2复合组织工程骨组、单纯PCL支架(成骨诱导液组),对各组碱性磷酸酶(ALP)活性进行测定,通过MTT法观察在单纯PCL支架(普通培养基组)、PCL/PRP复合支架、PCL/PRP/BMP2复合组织工程骨中BMSCs的增殖情况。建立新西兰大白兔桡骨中段长15mm的骨缺损模型,共48只,分4组(每组6×2只)。设立分组:空白对照组、单纯PCL支架组、PCL/PRP复合支架组和PCL/PRP/BMP2复合组织工程骨组。分别在第4周和第12周获取组织标本进行大体观察和X线片观察骨缺损修复情况,并用Lane-sandHu X线评分法对12周的X线结果进行评分;组织切片行苏木精伊红(HE)和Masson叁色染色进一步观察复合组织工程骨在组织学水平的骨修复效果。研究结果:通过3D打印技术可获取合适孔隙率及力学性能的PCL支架;通过Landesberg二次离心法可获取理想的富血小板血浆;通过冷冻干燥法可制备PCL/PRP/BMP2复合组织工程骨。全骨髓贴壁法获得的兔BMSCs在镜下呈梭形且贴壁生长的细胞,培养过程中状态稳定;该细胞系在体外诱导条件下可向成骨、成脂肪及成软骨细胞分化,具备多功能干细胞的特点;表面标记物检测发现此细胞系表达CD29、CD44,不表达CD34、CD14。体外细胞水平观察各组促成骨分化的实验发现PRP/BMP2组碱性磷酸酶染色和茜素红S染色的程度最高;且成骨相关基因OCN和ALP的mRNA表达水平明显高于空白对照组、PRP组及成骨诱导液组;PCL/PRP/BMP2复合组织工程骨组碱性磷酸酶蛋白(ALP)的活性定量明显高于空白对照组、PRP组及成骨诱导液组;在PCL/PRP复合支架中培养的BMSCs隔日MTT法所测的OD高于其他组。动物实验的大体观察及X线检查结果显示4周及12周时PCL/PRP/BMP2组中骨缺损区域新生骨明显优于PCL组、PCL/PRP组;12周时PCL/PRP/BMP2组的Lane-sandHu X线评分显着高于其余各组;HE染色及Masson染色结果进一步显示4周及12周时PCL/PRP/BMP2组新生骨组织明显多于PCL组、PCL/PRP组;而空白对照组两侧断端骨性闭合,骨缺损区少量骨组织生长,无法实现自我修复。研究结论:应用3D打印技术结合富血小板血浆和骨形态发生蛋白2可实现个体化复合组织工程骨的构建,此复合组织工程骨具有良好的骨修复能力,有望成为个性化修复临床骨缺损的方法之一。(本文来源于《中国人民解放军海军军医大学》期刊2019-05-16）
赵小琦[5]（2019）在《3D打印马鹿角粉组织工程骨支架的体外及体内实验研究》一文中研究指出目的:构建一种新型支架材料(马鹿角粉/PVA支架),通过检测其理化、生物性能、体内急性毒性实验及构建异位成骨模型,评价并探讨其作为骨组织工程支架的可行性。方法:利用3D打印技术,制备出马鹿角粉/PVA支架,进行孔隙率、孔径、吸水率、压缩力学性能、细胞毒性的检测、体内急性毒性检测及回植大鼠肾被膜后大体观察、HE染色、RT-PCR。结果:(1)孔隙率及孔径:马鹿角粉/PVA支架与纳米级羟基磷灰石/聚乙烯醇(n-HA/PVA)支架作对比,两组支架孔隙率比较无差别,马鹿角粉/PVA支架孔径大于n-HA/PVA支架(P=0.004);(2)吸水率:在不同时间点上,n-HA/PVA支架的吸水率大于马鹿角粉/PVA支架,但马鹿角粉/PVA支架持续吸水的时间较长;(3)压缩力学性能:两组支架的抗压缩性能无差别(P=0.243),马鹿角粉/PVA支架韧性较n-HA/PVA支架好;(4)细胞毒性检测:马鹿角粉/PVA支架细胞相容性比n-HA/PVA支架好;(5)急性全身毒性检测:材料浸提液腹腔注射后,72h观察期间内各组大鼠均存活良好,各组大鼠体质量变化无差别(P>0.05);(6)回植后相关检测:回植动物时材料分为3组:实验组1-BMSCs细胞膜复合马鹿角粉/PVA支架组;实验组2-单纯马鹿角粉/PVA支架组。对照组-空支架组。HE染色可见,1月末,细胞膜-支架组及单纯支架组支架周围及孔隙内充满结缔组织和血管,有较多的炎症细胞分布,两组间无明显区别,2月末两实验组炎症细胞减少,细胞膜-支架组中结缔组织周围出现淡蓝色类软骨样物质,对照组两时间段均为大量脂肪组织和少量结缔组织及血管;RT-PCR结果分析得,随着时间的延长RUNX2的表达呈上升趋势,而COL-1,IL-1,RANKL的表达则呈下降趋势,各组基因表达与对照组均存在差别(P<0.01)。结论:马鹿角粉/PVA支架具有良好的机械力学性能、细胞及体内实验均显示具有良好的生物相容性,在体内模拟环境下BMSCs细胞膜复合马鹿角粉/PVA支架组在成骨方面显示较好的优势,可作为异种骨支架材料研究的新方向。(本文来源于《新疆医科大学》期刊2019-03-01）
丁刘闯[6]（2019）在《3D打印丝素蛋白/聚乙烯醇/纳米羟基磷灰石组织工程骨支架的实验研究》一文中研究指出目的:构建3D打印丝素蛋白(silk fibroin,SF)/聚乙烯醇(Polyvinyl alcohol,PVA)/纳米羟基磷灰石(Nano-hydroxyapatite,n-HA)支架,检测其理化性能、体内急性毒性及构建异位成骨模型,探讨其作为骨组织工程支架的可行性及其对成骨和降解的影响。方法:利用3D打印技术,制备出3D打印SF/PVA/n-HA复合支架及3D打印PVA/n-HA复合支架,进行孔隙率、压缩力学性能、生物相容性的检测、体内急性毒性检测及回植大鼠肾被膜后大体观察、HE染色、RT-PC,回植动物时材料分为3组:实验组1:3D打印SF/PVA/HA复合支架;实验组2:3D打印PVA/HA复合支架。对照组-空支架组。结果:(1)扫描电镜观察:3D打印SF/PVA/n-HA复合支架结构规则,网状结构清晰,交通支连续,层层之间搭接良好,支架空隙均一。相同倍数下,3D打印PVA/n-HA复合支架网状结构连续性较差。(2)压缩力学性能:相同应力情况下(10 MPa),3D打印SF/PVA/n-HA复合支架的应变大于3D打印PVA/n-HA复合支架(P<0.05)。(3)孔隙率:3D打印SF/PVA/n-HA复合支架的孔隙率(59.87±1.33%)大于3D打印PVA/n-HA复合支架(46.26±1.21%)(P<0.05)。(4)细胞毒性检测:不同时间点(1天,3天,5天)两组支架的细胞增殖率无明显差别(P>0.05)。(5)急性细胞毒性试验:材料浸提液腹腔注射后,72h观察期间内各组大鼠均存活良好,各组大鼠体质量变化无差别(P>0.05);(6)HE染色:2月末时,实验组1中可见支架实体材料中有组织长入。RT-PCR:检测基因包括Runx-2、Col、Rankl、IL-1。对以上4个基因实验组1与实验组2在1月末和2月末时都有高表达,与对照组相比具有统计学意义(P<0.05);除了2月末实验组1与实验组2在Runx-2及Col的表达没有差别(P>0.05),其他各组基因各个时间点上实验组1的表达均高于实验组2(P<0.05)。结论:3D打印SF/PVA/n-HA支架具有良好的生物相容性、压缩力学性能及孔隙率;3D打印SF/PVA/n-HA支架能够促进成骨相关基因(Runx-2,Col)及破骨相关基因(Rankl,IL-1)的表达,联系2月末时实验组1的HE染色测定,我们推断加入丝素的3D打印SF/PVA/n-HA支架能够加速降解。(本文来源于《新疆医科大学》期刊2019-03-01）
刁兆峰[7]（2019）在《HA/β-TCP/CS/MC可注射组织工程骨用于兔上颌窦提升的实验研究》一文中研究指出目的:评估前期实验构建的可注射性羟基磷灰石/β-磷酸叁钙/壳聚糖/甲基纤维素(HA/β-TCP/CS/MC,HTCM)组织工程支架材料复合骨髓间充质干细胞(BMSCs)用于兔上颌窦提升的成骨效果。方法:选取24只新西兰大白兔,形成4处上颌窦提升模型。实验组注入HTCM+BMSCs组织工程骨;对照组1注入单纯HTCM支架材料;对照组2植入OSTEON?II骨粉;对照组3设置为空白对照组。术后8、12周,分别对标本进行CBCT扫描、HE染色及免疫组织化学染色观察分析。结果:CBCT结果显示:8周时实验组(HTCM+BMSCs组)成骨效果明显优于对照组1(HTCM组)及对照组2(骨粉组)。12周时实验组(HTCM+BMSCs组)优于其他两组但差异减小,空白对照组两个时间点均无明显成骨影像;HE染色结果显:8周时实验组(HTCM+BMSCs组)成骨较其它两组效果明显,12周时实验组(HTCM+BMSCs组)成骨优于其他两组,差异减小;成骨面积测量:经测量实验组(HTCM+BMSCs组)各时间段优于其余两组,差异有统计学意义(P<0.05);免疫组化结果:实验组(HTCM+BMSCs组)BMP-2及VEGF表达于8周时呈强阳性且优于其余两组,12周时叁组结果呈阳性表达无明显差异。结论:羟基磷灰石/β-磷酸叁钙/壳聚糖/甲基纤维素(HTCM)可注射组织工程骨具有良好的生物相容性和注射性,经上颌窦提升植入后具有良好的骨增量效果。(本文来源于《新疆医科大学》期刊2019-03-01）
燕朋程,王东[8]（2019）在《3D打印在组织工程骨预制及其骨缺损修复的作用探讨》一文中研究指出骨组织工程技术在近几年逐渐成熟开展起来,例如,骨组织工程支架可负载生物活性物质,诱导骨及血管形成,从而修复疾病导致的骨缺损。目前可应用在骨组织工程支架中的材料较多:聚合物材料、生物陶瓷、金属材料等。3D打印技术作为新型技术,可将数字信号转变为物理实体,有着高度柔性与快速性等特点,在骨支架制造中有不错的应用前景。为探讨3D打印在组织工程骨预制及其骨缺损修复中的作用,本文进行如下综述,望有助于相关工作开展。(本文来源于《临床医药文献电子杂志》期刊2019年12期）
朱聪,黄国锋,江惠祥,吴本文,林剑彪[9]（2018）在《间歇式轴向压应力对组织工程骨种子细胞的黏附增殖与成骨分化促进作用的研究》一文中研究指出目的探究间歇式轴向压应力对组织工程骨种子细胞黏附、增殖与成骨分化能力的影响。方法构建表达绿色荧光蛋白的兔骨髓间充质干细胞(rBMSCs)作为示踪种子细胞,运用旋转细胞培养仪将松质骨支架和种子细胞共培养7 d获得组织工程骨(TEB),实验组在第7～14天施加大小10 N、频率1 Hz、4 h/d的间歇式轴向压应力刺激,对照组常规培养,14 d后胰酶消化法获取两组种子细胞并比较其黏附、增殖和成骨分化能力。采用两组独立样本t检验进行统计学分析。结果 (1)流式细胞术显示rBMSCs被成功提取分离。(2)倒置荧光显微镜及扫描电镜显示TEB中种子细胞与支架相容性良好。(3)活体荧光成像系统及扫描电镜显示应力刺激组种子细胞的生长状况要优于非应力刺激组,前者平均荧光密度及细胞数/500倍视野均大于后者,差异均具有统计学意义(平均荧光密度:(3.75±0.34)×108 vs(2.91±0.22)×108,t=2.90,P=0.04;细胞数/500倍视野:30.50±4.43 vs 21.00±5.13,t=3.14,P=0.01)。(4)细胞黏附实验显示,应力刺激组种子细胞的75﹪细胞贴壁时间短于非应力刺激组,两组时间分别为(3.00±0.41) h、(13.33±1.70)h,差异具有统计学意义(t=8.20,P <0.01),前者的最终细胞贴壁率高于后者(99.97﹪±0.34﹪vs 85.83﹪±1.18﹪),差异具有统计学意义(t=11.31,P <0.01)。(5) CCK-8检测显示,在培养第48～96 h,应力刺激组种子细胞的增殖能力优于非应力刺激组,将两者的450 nm吸光度值在第48小时(0.49±0.02、0.40±0.02)、72 h(0.76±0.07、0.64±0.04)和96 h(1.58±0.07、1.34±0.13)分别进行比较,差异均具有统计学意义(t=5.15、2.57、2.86,P均<0.01)。(6)在成骨诱导14 d后,应力刺激组种子细胞的ALP和Ca结节染色阳性率要强于非应力刺激组:两组ALP染色阳性率分别为26.73﹪±4.56﹪、16.68﹪±3.89﹪,差异具有统计学意义(t=3.33,P=0.03);两组Ca结节染色阳性率分别为41.81﹪±3.56﹪、27.40﹪±2.35﹪,差异具有统计学意义(t=3.68,P=0.02)。结论间歇性轴向压应力可促进组织工程骨种子细胞的黏附、增殖与成骨分化。(本文来源于《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》期刊2018年06期）
吕兰欣,颜晓庆,杨红宁,韩东,胡书群[10]（2018）在《压力刺激对组织工程骨替代物构建的促进作用研究》一文中研究指出目的:构建仿生叁维多孔支架-细胞复合物,探讨压力刺激对其成骨作用的影响。方法:用颗粒沥滤法制备聚乳酸-聚乙醇酸共聚物(PLGA)叁维多孔支架,与人骨髓间充质干细胞(hMSCs)和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)共培养,形成支架-细胞复合物,用PKH26染料对hMSCs进行细胞膜染色示踪,在第1、3、7天用激光共聚焦显微镜观察,在第3、5、7、9天用CCK-8试剂盒分别检测细胞增殖情况;培养10 d后将此复合物置于压力型生物反应器中进行压力刺激,检测其成骨及血管化情况;然后将压力刺激后的复合物植入鸡尿囊胚模型(CAM)中,7 d后取出,用micro-CT检测其成骨情况。结果:细胞示踪及CCK-8检测显示细胞增殖良好; micro-CT结果显示压力刺激后矿化显着增多,但总量较少; CD31免疫荧光染色结果显示压力刺激对血管生成作用不明显; CAM实验显示,压力刺激后的支架-细胞复合物对于体内骨生成有显着促进作用。结论:构建的支架-细胞复合物在压力刺激下可以快速骨化,是一种有应用潜力的组织工程骨替代物。(本文来源于《转化医学电子杂志》期刊2018年11期）
组织工程骨论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
背景:聚乳酸-羟基乙酸共聚物是被批准用于实验及临床的少数生物材料之一,其具有良好的生物相容性和生物降解性及优异的机械性能,是一种良好的组织工程支架载体。目的:验证聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米叁维多孔支架材料与人骨髓间充质干细胞的体外生物相容性及体内异位成骨能力。方法:(1)运用静电纺丝技术将150 g/L的聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶液电纺成纳米纤维膜,将第3代人骨髓间充质干细胞(人骨髓标本获取已经获得贵州医科大学附属医院伦理委员会批准)种植于聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米纤维支架上,采用成骨诱导液培养7 d,DAPI荧光染色、吖啶橙荧光染色及扫描电镜观察细胞-支架复合物的生长情况;(2)将第3代人骨髓间充质干细胞种植于聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米纤维支架上,使用成骨诱导液诱导培养的作为实验组,不使用成骨诱导液诱导培养的作为对照组,两组培养14 d后分别植入裸鼠皮下,术后12周取出植入材料标本,行苏木精-伊红染色、茜素红染色、碱性磷酸酶染色和Ⅰ型胶原免疫组织化学染色观察植入物体内异位成骨情况。动物实验获得贵州医科大学实验动物伦理委员会批准,批准号:NO1759999。结果与结论:(1)DAPI荧光染色与吖啶橙荧光染色显示细胞黏附于聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米纤维支架上,生长良好;(2)扫描电镜显示,成骨诱导培养的人骨髓间充质干细胞在聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米纤维支架上生长良好,细胞产生丰富的细胞外基质并覆盖于纳米纤维支架表面;(3)植入12周后,两组茜素红染色、碱性磷酸酶染色和Ⅰ型胶原染色呈阳性,其中实验组各染色阳性表达强于对照组;苏木精-伊红染色显示实验组有较多成骨细胞和典型的骨陷窝,对照组仅有少量骨组织形成;(4)研究表明,聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米纤维膜具有良好的生物相容性及体内异位成骨能力,可作为骨组织工程支架材料。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
组织工程骨论文参考文献
[1].王福科,张红,李彦林,刘流,何川.联合培养血管内皮细胞与脂肪干细胞构建组织工程骨异位成骨[J].中国修复重建外科杂志.2019
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[5].赵小琦.3D打印马鹿角粉组织工程骨支架的体外及体内实验研究[D].新疆医科大学.2019
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