免疫学测定论文_娄鉴芳,储楚,王敏,唐未名

导读:本文包含了免疫学测定论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:免疫学,免疫,单克隆抗体,活性,蛋白,支原体,心肌炎。

免疫学测定论文文献综述

娄鉴芳,储楚,王敏,唐未名[1](2019)在《酶联免疫测定法免疫学检验实习带教体会》一文中研究指出酶联免疫吸附试验(ELISA)是临床免疫常用的检测方法,其快速、敏感、简便,对医院的仪器设备要求不高,在各级医院均可开展。在该院实习的学生毕业后面向全国各地各种等级的医院的工作,因此ELISA是每一位检验学生必须掌握的实验方法之一。但是笔者发现由于各种原因,导致学生对这部分内容接触和操作较少,因此,对这部分内容无法熟练掌握,针对此现象,笔者通过加强ELISA的基本知识学习、临床病例实验结果的综合分析和质量控制培训3个方面进行带教,让学生理论结合实际操作,为临床提供有扎实理论基础、规范的操作技能,以及有独立思考和解决临床问题能力的高级检验人才。(本文来源于《检验医学与临床》期刊2019年15期)

刘金[2](2016)在《牛初乳免疫球蛋白IgG的免疫学测定方法研究》一文中研究指出乳牛分娩7d内乳汁称为牛初乳,作为一种功能性食品,其富含免疫因子及生长因子等生理功能性物质和多种营养物质都远远高于常乳,其中免疫球蛋白(IgG)是最重要的免疫成分,是由于IgG具有抗体活性且与抗体结构相似,能与抗原发生特异性结合,能够显着增加T淋巴细胞的增殖活性、巨噬细胞的吞噬能力,从而减少病原对机体伤害,提高机体的免疫力,故IgG含量成为衡量牛初乳的重要指标之一。本研究首先复苏小鼠抗牛免疫球蛋白IgG杂交瘤细胞,然后采用小鼠体内诱生法进行大量制备,对采集的腹水首先选用辛酸—硫酸铵法粗提纯,然后再进行亲和层析法纯化。经测定,所分泌的单克隆抗体亚类为IgG1,浓度为46.85 mg/mL,效价为5.12×106;经辛酸-硫酸铵法纯化后浓度为10.88 mg/mL,效价为2.56×106;进一步经亲和层析纯化法纯度较高,浓度为2.21 mg/mL,效价为2.56×106,亲和力常数为8.92×108,属高亲和力抗体。用纯化后的单克隆抗体建立双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)来检测牛IgG,该方法的线性回归方程为y=0.4703 lgx一0.1582(R2=0.9926),最低检测限为7.06ng/mL,批内变异系数为4.52%,批间变异系数为4.94%,加标回收率平均值为95.87%,精密度、准确度、稳定性较好。采用此方法分别检测10份牛初乳样品,IgG含量在为50.29-79.68 mg/mL,平均值为65.40 mg/mL.磁珠双抗夹心ELISA法的线性回归方程为y=0.3822 lgx-0.0648(R2=0.9736),最低检测限能达到7.67 ng/mL,批内变异系数为8.89%,批间内变异系数为9.81%,加标回收率平均值为103.66%。采用此方法分别检测10份牛初乳样品,IgG含量在为58.64-82.66 mg/mL,平均值为69.66 mg/mL。磁珠双抗夹心ELISA法检测更快速,但准确度比双抗夹心ELISA法低,适合快速检测,而双抗体夹心ELISA法适用于精确检测。(本文来源于《沈阳农业大学》期刊2016-06-01)

尤金炜,刘彪,张旭亮,马畅,董敏[3](2015)在《绿色荧光裸鼠部分免疫学指标的测定及分析》一文中研究指出目的检测绿色荧光蛋白(Green Fluorescence Protein,简称GFP)转基因裸鼠的部分免疫学指标,分析GFP转基因裸鼠与其他小鼠在免疫学方面的优缺点,为将来的研究提供基础参考值。方法 1实验选用6~8周GFP转基因裸鼠、BALB/c裸鼠和BALB/c小鼠,活体称体质量,剖取脾脏称其质量,之后进行脾淋巴细胞增殖能力的测定。2取外周血,测定部分血常规指标及免疫球蛋白指标。结果 1 GFP转基因裸鼠脾脏质量、脾脏系数以及T、B淋巴细胞增殖反应与BALB/c裸鼠相近,但与BALB/c小鼠差异显着。2 GFP转基因裸鼠、BALB/c裸鼠两种裸鼠品系外周血白细胞水平、淋巴细胞以比例及免疫球蛋白IgG、IgM都远低于BALB/c小鼠,差异显着。结论从脏器系数、白细胞水平,免疫球蛋白水平等角度发现,GFP转基因裸鼠和BALB/c裸鼠的免疫系统水平较BALB/c小鼠相弱,其中GFP转基因裸鼠的免疫系统水平最为低下。(本文来源于《实验动物科学》期刊2015年05期)

胡骁飞,魏凤仙,杨继飞,邓瑞广,张改平[4](2015)在《应用免疫学技术测定植酸酶活性的设想与展望》一文中研究指出植酸广泛存在于粮食、饲料中,与磷及其他养分结合形成不溶性的络合物,降低磷和其他养分利用率。植酸酶能够分解植酸及其盐类,释放出磷元素及其他养分,因而可以在饲料中添加植酸酶来减少磷酸氢钙用量。但如果饲料中降低了磷酸氢钙添加量,而忘记添加植酸酶会造成动物缺磷,导致饲料产品质量降低,动物生产性能及产品品质下降,因而,监控检测饲料中植酸酶活性对保证饲料产品质量至关重要。目前,植酸酶常用的检测方法不适合饲料生产及畜禽养殖企业现场实时检测。本文提出了用免疫学检测技术检测植酸酶活性的设想,并展望了免疫学技术在植酸酶活性检测中应用前景。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2015年10期)

陈兴慧,白娟,王先炜,李玉峰,姜平[5](2014)在《猪源脑心肌炎病毒单克隆抗体研制与免疫学特性测定》一文中研究指出利用纯化灭活的猪源脑心肌炎病毒(EMCV)免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤细胞技术,研制获得4株能稳定分泌抗EMCV抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1D1、2A2、2B6和4E2。经ELISA测定,细胞培养上清中抗体效价分别为1∶1 600,1∶6 400,1∶6 400和1∶3 200,小鼠腹水抗体效价分别为1∶1.63×106,1∶3.28×106,1∶1.13×106和1∶5.63×105。1D1和2A2单抗亚类为IgG1,2B6和4E2单抗亚类为IgG2b,轻链均为κ型。Western blot结果表明,1D1、2A2和4E2能特异性识别病毒的VP1蛋白,2B6能特异性识别病毒的VP2蛋白。间接免疫荧光试验证明,4株单抗具有良好的特异性,均能识别EMCV。本研究获得的4株特异性单抗,将为EMCV诊断方法的建立和病毒蛋白功能的研究奠定基础。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2014年02期)

李慧玲,邬剑,李克田,付晓蕊,黄春雨[6](2013)在《免疫血清的制备及效价测定在临床免疫学检验实验教学中的应用》一文中研究指出高效价、高特异度的免疫血清是免疫学实验室必不可少的生物制剂,是高等医学院校学生免疫学实验的重要内容[1]。而目前,在各大医学院校的医学实验课中学生更多应用的是市售的商品诊断试剂,虽然方便简单,但是学生对免疫血清的制备、效价的鉴定及制备的注意事项以及实验结果偏移与试剂的关系了解甚少,同时极大地增加了实验费用。故引导学生自己动(本文来源于《国际检验医学杂志》期刊2013年10期)

李朴,史静,成凤,梁勤东,匡文斌[7](2012)在《Y盒结合蛋白1单克隆抗体的研制、表位测定及其免疫学应用》一文中研究指出建立稳定分泌抗人Y盒结合蛋白1单克隆抗体(anti-YB-1 mAb)的杂交瘤细胞株,鉴定其表位与免疫学应用。将重组YB-1蛋白免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合。经ELISA法筛选鉴定、定株后采用腹水诱生法制备anti-YB-1 mAb;Protein G亲和层析法纯化mAb,ELISA法测定mAb效价、亚型及相对亲和力。采用抗原表位预测法鉴定anti-YB-1 mAb识别表位所在区域。Western blot和免疫组化鉴定mAb识别内源性YB-1的特异性。经筛选鉴定获得2株稳定分泌anti-YB-1 mAb的杂交瘤细胞(1-D9,3-E8);腹水抗体效价均≥1×10-6,亚型均为IgGl;1-D9和3-E8单抗识别表位分别位于(134-160aa)与(266-303aa)肽段。Western blot、免疫组化结果证实anti-YB-1 mAb能特异性识别内源性YB-1。该研究为YB-1免疫学定性、定量检测方法的建立、肿瘤靶向抗体治疗及进一步探讨YB-1的生物学功能奠定了基础。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2012年06期)

许健,储岳峰,高鹏程,赵萍,贺英[8](2012)在《绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)丙酮酸脱氢酶E1-α亚单位基因(pdha)的克隆、表达及其免疫学活性测定》一文中研究指出丙酮酸脱氢酶α-亚单位(PDHA)在病原体丙酮酸脱氢酶的催化过程中发挥着重要作用。为表达绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)PDHA蛋白并测定其免疫学活性,应用PCR方法扩增出绵羊肺炎支原体pdha基因并对其序列进行分析,将pdha基因中色氨酸密码子TGA优化为TGG后进行全基因合成,插入到pET32-a(+)载体上,构建了pET32-a(+)-pdha重组质粒,将重组质粒转化到大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中诱导表达PDHA蛋白,并通过免疫印迹及小鼠(Mus musculus)免疫试验对其免疫学活性进行测定。结果pdha基因全长1125bp,编码375aa,(G+C)%为34.76%,第304~306位、379~381位、586~588位、592~594位、625~627位、811~813位、889~891位及964~966位TGA在支原体中编码色氨酸而不是作为终止密码子;基因序列比对及进化树分析显示,绵羊肺炎支原体pdha基因与10种支原体的pdha基因序列同源性为32.6%~85.3%,氨基酸序列同源性为39.3%~90.6%,基因序列和氨基酸序列均与猪肺炎支原体(M.hyopneumoniae)有同源性,分别为85.3%和90.6%;绵羊肺炎支原体pdha基因在33℃、IPTG0.25mmol/L诱导6h的表达条件下,表达量最高;重组的PDHA蛋白可与绵羊肺炎支原体高免血清具有免疫印迹条带,在免疫小鼠后血清抗体效价与对照组相比,均显着升高(P<0.05)。本实验首次成功克隆表达了绵羊肺炎支原体pdha基因,并证明其重组PDHA蛋白具有较好的免疫学活性。为绵羊支原体肺炎基因工程疫苗及诊断研究提供候选靶标。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2012年03期)

牛坚,张业伟,刘斌[9](2011)在《抗人AFP单链抗体的制备、鉴定及其免疫学活性的测定》一文中研究指出目的构建具有免疫学活性的抗人甲胎蛋白单链抗体ScFv(single chain fragment of variety region,ScFv),为进一步的研究奠定实验基础。方法采用RT-PCR技术,从分泌抗人AFP单克隆抗体的杂交瘤细胞中扩增mAb的VH、VL基因,并进一步将其组装成VH-Linker-VL型的ScFv片段。将ScFv片段亚克隆至原核分泌型表达载体pUC19,将pUC19-ScFv纯化质粒转染大肠杆菌BL21并用IPTG诱导表达ScFv蛋白。用SDS-PAGE方法检测ScFv的表达,采用ELISA检测ScFv的亲和活性。结果大肠杆菌BL21可被诱导表达ScFv蛋白。SDS-PAGE法证实ScFv蛋白在细胞包涵体有表达,大小约24 kD。ELISA检测表明,ScFv蛋白经能与重组人AFP纯化抗原结合,并具有抑制亲本单抗与其结合的能力。结论成功构建抗人AFP的ScFv表达载体,并能有效表达出具有免疫学活性的ScFv蛋白。(本文来源于《肝胆胰外科杂志》期刊2011年04期)

白芳,宋斌[10](2011)在《静脉采血不同方法对心肌损伤生化和免疫学指标测定的影响》一文中研究指出目的探讨不同静脉采血方法对心肌损伤生化和免疫学指标测定值的影响。方法选择50例急性心肌梗死行静脉溶栓治疗的患者,采用同源配对设计,对同一患者,分别采用常规方法采血和输液管处采血,获得不同采血方式的心肌酶谱资料。结果两种方法采血其所得值比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),两种方法采血所得值呈正相关(均P<0.01);分别以常规法所得值为应变量,以输液管法所得值为自变量进行回归分析,结果回归方程均有统计学意义(均P<0.01)。结论输液静脉处取血所得心肌损伤生化和免疫学指标与常规采血所得值差异有统计学意义;通过构建回归方程,可利用输液静脉处采血所得的心肌酶谱值对常规采血方法所得值进行估计。(本文来源于《护理学杂志》期刊2011年13期)

免疫学测定论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

乳牛分娩7d内乳汁称为牛初乳,作为一种功能性食品,其富含免疫因子及生长因子等生理功能性物质和多种营养物质都远远高于常乳,其中免疫球蛋白(IgG)是最重要的免疫成分,是由于IgG具有抗体活性且与抗体结构相似,能与抗原发生特异性结合,能够显着增加T淋巴细胞的增殖活性、巨噬细胞的吞噬能力,从而减少病原对机体伤害,提高机体的免疫力,故IgG含量成为衡量牛初乳的重要指标之一。本研究首先复苏小鼠抗牛免疫球蛋白IgG杂交瘤细胞,然后采用小鼠体内诱生法进行大量制备,对采集的腹水首先选用辛酸—硫酸铵法粗提纯,然后再进行亲和层析法纯化。经测定,所分泌的单克隆抗体亚类为IgG1,浓度为46.85 mg/mL,效价为5.12×106;经辛酸-硫酸铵法纯化后浓度为10.88 mg/mL,效价为2.56×106;进一步经亲和层析纯化法纯度较高,浓度为2.21 mg/mL,效价为2.56×106,亲和力常数为8.92×108,属高亲和力抗体。用纯化后的单克隆抗体建立双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)来检测牛IgG,该方法的线性回归方程为y=0.4703 lgx一0.1582(R2=0.9926),最低检测限为7.06ng/mL,批内变异系数为4.52%,批间变异系数为4.94%,加标回收率平均值为95.87%,精密度、准确度、稳定性较好。采用此方法分别检测10份牛初乳样品,IgG含量在为50.29-79.68 mg/mL,平均值为65.40 mg/mL.磁珠双抗夹心ELISA法的线性回归方程为y=0.3822 lgx-0.0648(R2=0.9736),最低检测限能达到7.67 ng/mL,批内变异系数为8.89%,批间内变异系数为9.81%,加标回收率平均值为103.66%。采用此方法分别检测10份牛初乳样品,IgG含量在为58.64-82.66 mg/mL,平均值为69.66 mg/mL。磁珠双抗夹心ELISA法检测更快速,但准确度比双抗夹心ELISA法低,适合快速检测,而双抗体夹心ELISA法适用于精确检测。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

免疫学测定论文参考文献

[1].娄鉴芳,储楚,王敏,唐未名.酶联免疫测定法免疫学检验实习带教体会[J].检验医学与临床.2019

[2].刘金.牛初乳免疫球蛋白IgG的免疫学测定方法研究[D].沈阳农业大学.2016

[3].尤金炜,刘彪,张旭亮,马畅,董敏.绿色荧光裸鼠部分免疫学指标的测定及分析[J].实验动物科学.2015

[4].胡骁飞,魏凤仙,杨继飞,邓瑞广,张改平.应用免疫学技术测定植酸酶活性的设想与展望[J].畜牧兽医学报.2015

[5].陈兴慧,白娟,王先炜,李玉峰,姜平.猪源脑心肌炎病毒单克隆抗体研制与免疫学特性测定[J].畜牧与兽医.2014

[6].李慧玲,邬剑,李克田,付晓蕊,黄春雨.免疫血清的制备及效价测定在临床免疫学检验实验教学中的应用[J].国际检验医学杂志.2013

[7].李朴,史静,成凤,梁勤东,匡文斌.Y盒结合蛋白1单克隆抗体的研制、表位测定及其免疫学应用[J].中国生物工程杂志.2012

[8].许健,储岳峰,高鹏程,赵萍,贺英.绵羊肺炎支原体(Mycoplasmaovipneumoniae)丙酮酸脱氢酶E1-α亚单位基因(pdha)的克隆、表达及其免疫学活性测定[J].农业生物技术学报.2012

[9].牛坚,张业伟,刘斌.抗人AFP单链抗体的制备、鉴定及其免疫学活性的测定[J].肝胆胰外科杂志.2011

[10].白芳,宋斌.静脉采血不同方法对心肌损伤生化和免疫学指标测定的影响[J].护理学杂志.2011

论文知识图

PRL酶促化学发光健全性实验结果血清半乳凝素-3浓度诊断甲状腺乳头状...4 不同稀释倍数的衣原体标准株细胞培养...两法测定结果比较南方水稻黑条矮缩病毒病症状A:植株矮...血清抗体D值变化曲线

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