导读:本文包含了福尔马林实验论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:福尔马林,受体,防腐剂,甲醛,小家鼠,环氧,神经肽。
福尔马林实验论文文献综述
李芸[1](2012)在《选择性下调前扣带皮层神经元NR2B基因的表达治疗福尔马林诱导的痛恶性情绪体验的实验研究》一文中研究指出研究背景众所周知,晚期癌痛患者所遭受的恶性情绪体验,如焦虑、恐惧、孤独、甚至厌世等给病人造成的身心伤害远比疼痛本身更为严重,但近四十年来,由于缺乏适当的动物模型和相应的技术手段,对疼痛情感特性机制和治疗的研究明显滞后。临床上常使用的药物治疗、阻滞治疗等方法,大多针对急性疼痛或其他类型的疼痛感觉的缓解,对慢性疼痛尤其癌性疼痛伴随的不良情绪体验的作用十分有限,因此寻找一种安全有效、作用持久,既能缓解疼痛感觉,又能控制疼痛伴随的不良情绪的镇痛方法,已成为疼痛研究的重要方向。动物及人类的脑成像、电生理学和行为学等证据表明伤害性刺激或预警信号均可激活前扣带皮层(ACC)。损伤ACC特别是它的吻侧部,可以破坏痛相关厌恶情绪的形成。大量研究表明,兴奋性氨基酸尤其是谷氨酸在ACC兴奋性突触传递中具有关键作用。过去的工作研究表明ACC内注射NMDA受体谷氨酸位点拮抗剂APV可以阻断福尔马林条件位置回避(F-CPA)的形成(一种反映痛相关厌恶情绪的行为模型),提示ACC内NMDA受体的激活在痛相关的情绪形成过程中发挥重要的作用。功能性NMDA受体是由一个必需的NR1亚基和一个或多个NR2A-D亚基构成的异聚体,它的功能受多种因素调节,其中NRl为必需功能亚基,NR2属于调节亚基,考虑到NR2亚基在前脑的分布主要以NR2A和NR2B两个亚基为主,结合进一步研究,NR2B亚基在疼痛的产生和中枢痛觉过敏的形成中发挥着主导作用,特异性抑制或阻断NR2B功能的病理性上调可以达到良好的疼痛治疗效果,被认为是很有希望的新型镇痛方法。但目前已有的NR2B受体拮抗剂或阻断剂如CP101606,RO256981等,由于其心脏毒性至今不能用于临床,因此把NMDA受体NR2B亚基作为靶点,寻找新的技术对于疼痛伴随的不良情绪的治疗成为一个新领域。SiRNA技术的高效、特异、稳定、周期短及操作简单等优势是传统的基因阻断技术如基因敲除及DNA陷阱、反义技术、核酶等所无法比拟的,它已经成为敲除特定基因在哺乳动物细胞系中表达的强大而有效的工具。另外慢病毒载体因其对分裂缓慢或分类终末期的细胞的高效转染能力已经作为一种常用的基因转移工具被广泛应用于基因治疗和其他研究领域。本研究拟把NMDA受体NR2B亚基作为靶点,利用慢病毒载体可以高效转染神经元的能力,将可以干扰靶点基因表达的SiRNA转染进ACC神经元,沉默NR2B基因的表达,旨在控制NMDA受体NR2B亚基相关的疼痛伴随的不良情绪。研究方法与结果1、NR2B/RNAi重组慢病毒对ACC神经元NR2B基因表达的沉默效应方法:提取新生大鼠ACC神经元进行原代培养,用免疫荧光法对培养的神经元进行纯度鉴定,用MTT法对神经元进行活性的检测,把纯度和活性合格的神经元用于后续实验。将神经元分为叁组:CONTROL组、NC-GFP-LV组和NR2B-RNAi-LV组,将构建好的NR2B-RNAi重组慢病毒转染NR2B-RNAi-LV组,空病毒(具有无义干扰序列的重组慢病毒)载体转染NC-GFP-LV组,等体积的生理盐水转染CONTROL组。叁天后在荧光显微镜下观察转染效率,然后提取RNA和蛋白,用RT-PCR和Western Blot法检测NR2B的表达情况。结果:在荧光显微镜下随机拍取的荧光图片显示,重组慢病毒载体对原代培养的ACC神经元有很好的转然效率(达98%),而CON组没有荧光表达。RT-PCR结果显示,NC-GFP-LV组NR2B基因mRNA表达与CON组细胞比较无显着差异,NR2B-RNAi-LV组NR2B基因mRNA表达较阴性对照组和空白组均明显下降。WB结果显示,β-actin内参照的表达均在同一水平的情况下,NR2B-RNAi-LV组细胞NR2B蛋白的表达明显低于NC-GFP-LV组和CON组,而NC-GFP-LV组和CON组NR2B蛋白的表达无明显差异。2、ACC区注射NR2B/RNAi重组慢病毒对福尔马林诱导的痛情绪体验的治疗效应方法:选取正常雄性SD大鼠,随机分为CON组、NC-GFP-LV组和NR2B-RNAi-LV组。在大鼠脑立体定位仪下分别向ACC注射生理盐水、空病毒和NR2B/RNAi重组慢病毒。7d后进行行为学检测(大鼠急性痛行为、福尔马林诱导的条件位置回避和电击诱导的条件位置回避),然后处死动物提取大鼠脑组织ACC组织块,做成冰冻切片在荧光显微镜下观察转染效率,提取mRNA和蛋白,用RT-PCR和Western Blot法检测NR2BmRNA和蛋白的表达情况。结果:行为学检测显示,NR2B/RNAi重组慢病毒注射7天后,大鼠福尔马林急性痛行为在叁组之间没有明显差异;F-CPA实验中,CON组和NC-GFP-LV组F-CPA模型成功建立,而NR2B-RNAi-LV组F-CPA模型不能成功建立;在S-CPA实验中,CON组、NC-GFP-LV组和NR2B-RNAi-LV组均可以成功建立S-CPA模型。随机拍取的荧光图片显示,NR2B-RNAi-LV组和NC-GFP-LV组有大量荧光表达,而CON组荧光表达不明显。RT-PCR结果显示,NC-GFP-LV组NR2B基因mRNA表达与CON组细胞比较无显着差异,NR2B-RNAi-LV组NR2B基因mRNA表达较而CON组和NC-GFP-LV组均明显下降。WB结果显示,β-actin内参照的表达均在同一水平,NR2B-RNAi-LV组细胞NR2B蛋白的表达明显低于NC-GFP-LV组和CON组,而NC-GFP-LV组和CON组NR2B蛋白的表达无明显差异。3统计学处理数据采用SPSS17.0统计软件包进行分析,实验结果的数据皆以X士S表示,福尔马林或电击处理前后大鼠在条件训练室的时间之间的比较采用配对t检验,不同处理组之间F-CPA或S-CPA得分的比较采用单因素方差分析;实时荧光定量PCR组内和组间比较,采用均数T检验。所有分析均取p<0.05作为差别有显着性的标准。研究总结本研究构建的NR2B/RNAi慢病毒载体体外感染ACC神经元,可有效沉默NR2B的表达;福尔马林炎性痛模型表明,rACC给予NR2B/RNAi慢病毒可有效抑制痛厌恶情绪反应,同时不影响认知功能。(本文来源于《山东大学》期刊2012-05-10)
乔向阳,张辉,党永辉[2](2011)在《探讨小鼠品系和性别对福尔马林实验的影响》一文中研究指出目的研究品系和性别等因素对小鼠福尔马林实验的影响。方法选取6-8周龄的昆明、BALB/c和C57BL/6小鼠各16只,雌雄各半,体质量20-25g。同品系的小鼠每4只一笼饲养。饲养条件:室温控制在(22±1)℃,湿度为50%~60%;日光灯采光,光暗周期为12/12(光照时间为7:00 a.m~19:00p.m.);动物自由获取水和食物。根据随机数字表对小鼠进行完全随机分组。实验动物由西安交通大学医学院动物中(本文来源于《中华医学会精神病学分会第九次全国学术会议论文集》期刊2011-11-23)
张建楠[3](2011)在《神经肽S在小鼠福尔马林实验中的镇痛活性研究》一文中研究指出神经肽S (neuropeptide S, NPS)是最近发现的生物活性肽,具有调节睡眠与觉醒、情绪、运动、摄食、学习和记忆、药物成瘾等方面的作用。NPS的受体(NPSR)分布于痛觉下行抑制系统相关的脑区,例如中脑导水管周围灰质(periaqueductal gray, PAG),这提示着NPS在痛觉调节方面的作用。在我们的实验中,使用小鼠福尔马林实验首次评价了NPS对炎症痛的调节作用。NPS (0.1-100 pmol, i.c.v.)能够剂量依赖的削弱小鼠脚掌注射福尔马林引起的两相痛觉行为。侧脑室共同注射NPS (10 pmol)和NPSR的肽类拮抗剂[D-Val5]NPS (1000和10000 pmo1),能够拮抗NPS在该模型中的镇痛作用,而单独给予相同剂量的[D-Val5]NPS则既不引起镇痛反应也不引起痛敏反应。在相同的实验条件下,腹腔注射纳络酮(10mg/kg体重)并不影响NPS(10 pmol, i.c.v.)产生的镇痛作用,但却削弱了吗啡(1000 pmol,i.c.v.)引起的镇痛作用。结果还显示,在脚掌注射了福尔马林的小鼠中,与生理盐水组(i.c.v.)相比,NPS (10 pmol, i.c.v.)几乎增加了PAG中被检测的所有亚区的c-fos蛋白的表达量。这些结果表明,NPS对炎症痛的抑制作用,是通过NPS受体而不是阿片受体所介导的,可能涉及到PAG的激活,这提示着NPS系统可能是发展新的镇痛药的潜在靶点。(本文来源于《兰州大学》期刊2011-05-01)
奇铁男[4](2007)在《福尔马林固定、石蜡包埋组织中提取DNA的实验研究》一文中研究指出目的探讨福尔马林固定、石蜡包埋组织中提取DNA的最佳方法。方法①根据石蜡切片厚度(2.5μm、5.0μm、10.0μm)、组织切片脱蜡时间(切片脱蜡2次,时间分别为2小时、2小时和2小时、12小时)、消化液中蛋白酶K浓度(125μg /ml、250μg /ml、500μg /ml、1000μg /ml)、组织消化时间(4小时、8小时、12小时、24小时)等参数的不同,排列组合出96种不同条件,分别用于提取DNA。②石蜡组织连续切片,切片在二甲苯恒温水浴中振荡脱蜡后无水乙醇漂洗,真空干燥,加入细胞裂解液(自制),恒温水浴中振荡消化组织,苯酚/氯仿/异戊醇反复抽提,醋酸钠沉淀DNA,离心去上清,保存DNA备用。③不同方法提取的DNA量的检验:稀释200倍的DNA溶液用分光光度计在260nm和280nm分别读出光密度值,即OD260值和OD280值,DNA含量为:OD260值×10(μg/μl)。④不同方法提取的DNA质的检验:所有标本的OD260/OD280值均应该在1.6-1.8范围内,说明DNA中无蛋白、RNA和苯酚污染。PCR反应扩增所提取的DNA中RET基因第11外显子,10μl PCR产物经2.0 %的琼脂糖凝胶电泳,初步判断提取的DNA是否可以用于PCR反应;从琼脂糖凝胶中纯化目的基因DNA后再次以分光光度计测量纯化后的DNA含量,比较提取的DNA经PCR扩增后目的基因的产量;纯化后的PCR产物经荧光标记后自动测序仪测定目的基因碱基序列,观察提取的DNA是否可以用于直接序列测定。结果所有标本提取的DNA之OD260/OD280值均在1.6-1.8范围内。各种石蜡切片厚度均可以提取一定数量的DNA,叁组石蜡切片厚度之间比较无明显差异。但2.5μm组提取的DNA用于PCR扩增时效果远不如其它2组,即使PCR扩增后PCR产物电泳虽可见目的基因条带,条带也较淡,目的基因测序图混乱,难以读出碱基序列;2次脱蜡时间为2、2小时组脱蜡效果不如2次脱蜡时间为2、12小时组;随着蛋白酶K浓度的增加,提取的DNA数量也增加,最后行DNA测序时蛋白酶K浓度为500μg/ml和1000μg/ml组均可以得到满意的DNA测序图;组织消化8小时、12小时和24小时得到的DNA均适用于序列测定,但8小时组提取的DNA经PCR扩增后产物较12小时和24小时组少,12小时组与24小时组间比较无明显差别。目的基因DNA含量大于16ng/μl的标本测序时测序图较好,否则不适合于测序。结论从中性福尔马林固定-石蜡包埋组织中可以提取高质量DNA,在提取DNA过程中应注意剔除石蜡切片中坏死组织区域,高温降解核酸酶和蛋白酶K等步骤有利于下一步实验取得理想的结果。提取DNA的最佳条件是:石蜡切片厚度为10.0μm;脱蜡时间以2次脱蜡,时间分别为2、12小时,可以满足10.0μm厚切片的完全脱蜡;消化液中蛋白酶K浓度为500μg/ml,消化12小时组织可以完全被消化。(本文来源于《吉林大学》期刊2007-04-05)
徐英,库宝善,耿兴超,姚海燕,张永鹤[5](2005)在《河豚毒素与阿斯匹林联合应用对醋酸所致小鼠扭体反应和福尔马林致痛实验的影响(英文)》一文中研究指出目的探讨河豚毒素与阿斯匹林联合应用是否具有协同镇痛效应。方法采用醋酸扭体实验和福尔马林致痛实验,小鼠分别肌肉注射河豚毒素、阿斯匹林及两者的混合物(0.39μg·kg-1,0.79μg·kg-1加不同浓度的阿斯匹林),观察联合用药是否具有协同镇痛作用。结果在两种镇痛实验中,河豚毒素和阿斯匹林单独应用,均具有一定的镇痛效应。在醋酸扭体实验中,两药的ID50s分别为2.1μg·kg-1和64mg·kg-1;在福尔马林致痛实验中,两药能明显缩短皮下注射甲醛后第2时相小鼠舔脚时间,ID50s分别为2.3μg·kg-1和74.2mg·kg-1。河豚毒素与阿斯匹林联合应用具有协同镇痛作用:(1)与单独应用阿斯匹林相比,河豚毒素0.39μg·kg-1(150LD50)、0.79μg·kg-1(125LD50)与阿斯匹林联合应用,分别使阿斯匹林的镇痛ID50从64.0mg·kg-1下降到12.6mg·kg-1和5.8mg·kg-1(醋酸扭体实验);从74.2mg·kg-1下降到13.0mg·kg-1和7.4mg·kg-1(福尔马林致痛实验)。(2)协同效应图分析显示两者具有明显协同作用。结论河豚毒素与阿斯匹林联合应用具有协同镇痛效应,本研究对于开发新型镇痛药具有一定的指导意义。(本文来源于《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》期刊2005年03期)
李淑琴,李文斌,孙晓彩,李清君,陈晓玲[6](2004)在《MK-801抑制福尔马林实验引起的大鼠脊髓背角环氧合酶-2的表达》一文中研究指出应用免疫组织化学方法,观察鞘内注射N-methyl-D-aspartate(NMDA)受体拮抗剂MK-801对福尔马林实验引起的大鼠脊髓背角环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达的影响。结果表明:MK-801对福尔马林实验引起的第1相缩足反射仅有一定抑制作用,但对第2相缩足反射有显着的抑制作用,且呈剂量依赖性。与这种行为学的变化相对应,MK-801可显着抑制福尔马林实验引起的脊髓背角COX-2表达的增加,并且这种抑制作用与MK-801的剂量呈正相关。这些结果表明,在福尔马林实验中,NMDA受体的活动是引起脊髓背角COX-2表达增加的原因之一。(本文来源于《Proceedings of the 1st International Conference of Chinese Physiological Scientists-Physiological Sciences in the Postgenomic Era》期刊2004-07-01)
李淑琴,李文斌,孙晓彩,李清君,陈晓玲[7](2004)在《MK-801抑制福尔马林实验引起的大鼠脊髓背角环氧合酶-2的表达》一文中研究指出应用免疫组织化学方法,观察鞘内注射N-methyl-D-aspartate(NMDA)受体拮抗剂MK-801对福尔马林实验引起的大鼠脊髓背角环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达的影响。结果表明:MK-801对福尔马林实验引起的第1相缩足反射仅有一定抑制作用,但对第2相缩足反射有显着的抑制作用,且呈剂量依赖性。与这种行为学的变化相对应,MK-801可显着抑制福尔马林实验引起的脊髓背角COX-2表达的增加,并且这种抑制作用与MK-801的剂量呈正相关。这些结果表明,在福尔马林实验中,NMDA受体的活动是引起脊髓背角COX-2表达增加的原因之一。(本文来源于《生理学报》期刊2004年01期)
金宏波,杨永滨,杨雷,焦润生,吕春梅[8](2002)在《一氧化氮对福尔马林实验大鼠痛觉行为反应的作用》一文中研究指出目的 通过使用不同剂量一氧化氮合酶抑制剂L-NNA研究NO对福尔马林致痛模型大鼠痛觉行为反应的作用。方法 腹腔注射L-NNA_1小时后,进行大鼠福尔马林致痛实验,观察L—NNA的镇痛效应。结果 腹腔注射不同剂量的L-NNA(10mg/kg,20mg/kg,40mg/kg)产生明显的镇痛作用,并有剂量依赖关系。结论 研究结果表明,一氧化氮在伤害性痛觉调制中起重要作用,一氧化氮合酶抑制剂 L-NNA有明显的镇痛作用。(本文来源于《神经疾病与精神卫生》期刊2002年06期)
张黎声,王晓波,杨才弟[9](2002)在《不同浓度福尔马林溶液挥发状况的实验研究》一文中研究指出在气温17~18℃,湿度60.5%,样本液温16~17℃,气压1028~1029百帕的实验室条件下,配制1%、2%、3%、4%、5%的福尔马林液各100ml,分别放入直径为9cm的400ml烧杯中,将五个样本同时放在磁力搅拌器上,180转/分钟,3小时,采用乙酰丙酮光度法,723型可见分光光度计进行微量分析(每个样本采样3~4个,取其平均值),分别测量搅动前、后的液体容积和液体中甲醛的含量,计算差值。以上试验每周重复一次,(本文来源于《解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编》期刊2002-06-30)
张宇,聂红,王航[10](2000)在《C-fos基因的反义寡聚核苷酸在脊髓背角减弱痛行为反应和抑制fos蛋白及强啡肽A的表达 :大鼠福尔马林实验(英文)》一文中研究指出疼痛感受的生理学研究表明 ,伤害性信息上传时在脊髓水平受到脊髓自身和上位脑结构的调控。大量研究还表明 ,在伤害性信息传入背角时 ,会引起即早基因 (immediate earlygenes)的大量表达 ;c fos基因作为即早基因中的一种 ,所产生的fos蛋白在痛调制中起重要作用。强啡肽A (dynorphinA ,DynA)主要存在于背角中间神经元 ,且主要集中于背角浅层 ;在慢性炎症性疼痛时 ,脊髓中强啡肽的含量大量增加 ,说明强啡肽在脊髓水平的痛信息处理中起重要作用 ,可能与脊髓痛感受的可塑性变化有关。本研究的目的是用反义寡聚核苷酸 (antisenseoligodeoxynucleotide ,AS ODN)技术 ,封闭背角中fos蛋白的表达生成 ,以观察Fos蛋白和慢痛反应的关系 ,并分析fos蛋白生成增加和DynA表达之间的关系 ,并进一步探讨强啡肽A在痛调制中的作用。实验在Wistar大鼠 (10 0~ 12 0 g)进行。作为预实验的空白对照组动物 (n =5 ) ,在一侧后肢脚掌皮下注射formalin (5 % ,5 0 μl)后 ,用计算动物舔咬注射侧后脚掌的累计时间的方法 ,证明大鼠的行为痛反应由两个时相组成 :注射formalin后随即出现一个持续约 6~ 9min的第一相 ;在 9~ 15min有一个间歇期 ,大约从第 15min起又出现一个持续约 2 0~ 40min的第二相 ;并且在formalin注射后 2h处死动?(本文来源于《山西医科大学学报》期刊2000年S1期)
福尔马林实验论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
目的研究品系和性别等因素对小鼠福尔马林实验的影响。方法选取6-8周龄的昆明、BALB/c和C57BL/6小鼠各16只,雌雄各半,体质量20-25g。同品系的小鼠每4只一笼饲养。饲养条件:室温控制在(22±1)℃,湿度为50%~60%;日光灯采光,光暗周期为12/12(光照时间为7:00 a.m~19:00p.m.);动物自由获取水和食物。根据随机数字表对小鼠进行完全随机分组。实验动物由西安交通大学医学院动物中
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
福尔马林实验论文参考文献
[1].李芸.选择性下调前扣带皮层神经元NR2B基因的表达治疗福尔马林诱导的痛恶性情绪体验的实验研究[D].山东大学.2012
[2].乔向阳,张辉,党永辉.探讨小鼠品系和性别对福尔马林实验的影响[C].中华医学会精神病学分会第九次全国学术会议论文集.2011
[3].张建楠.神经肽S在小鼠福尔马林实验中的镇痛活性研究[D].兰州大学.2011
[4].奇铁男.福尔马林固定、石蜡包埋组织中提取DNA的实验研究[D].吉林大学.2007
[5].徐英,库宝善,耿兴超,姚海燕,张永鹤.河豚毒素与阿斯匹林联合应用对醋酸所致小鼠扭体反应和福尔马林致痛实验的影响(英文)[J].JournalofChinesePharmaceuticalSciences.2005
[6].李淑琴,李文斌,孙晓彩,李清君,陈晓玲.MK-801抑制福尔马林实验引起的大鼠脊髓背角环氧合酶-2的表达[C].Proceedingsofthe1stInternationalConferenceofChinesePhysiologicalScientists-PhysiologicalSciencesinthePostgenomicEra.2004
[7].李淑琴,李文斌,孙晓彩,李清君,陈晓玲.MK-801抑制福尔马林实验引起的大鼠脊髓背角环氧合酶-2的表达[J].生理学报.2004
[8].金宏波,杨永滨,杨雷,焦润生,吕春梅.一氧化氮对福尔马林实验大鼠痛觉行为反应的作用[J].神经疾病与精神卫生.2002
[9].张黎声,王晓波,杨才弟.不同浓度福尔马林溶液挥发状况的实验研究[C].解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编.2002
[10].张宇,聂红,王航.C-fos基因的反义寡聚核苷酸在脊髓背角减弱痛行为反应和抑制fos蛋白及强啡肽A的表达:大鼠福尔马林实验(英文)[J].山西医科大学学报.2000