导读:本文包含了多基因共转化论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:基因,遗传转化,籼稻,明恢86
多基因共转化论文文献综述
魏林艳,连玲,魏毅东,罗曦,何炜[1]（2019）在《籼稻明恢86多基因遗传转化体系的研究》一文中研究指出【目的】探索适合籼稻明恢86多基因遗传转化的条件,为创制含高产、抗逆、抗虫、抗病等基因的水稻新材料奠定基础。【方法】以籼稻明恢86为受体材料,将构建好的含作物高产基因RRM2、耐旱基因HS1、抗除草剂基因EPSPS、抗虫基因Bt、细胞凋亡抑制基因iap和促细胞再生基因p35等多基因载体(载体分别命名为P5和P8)进行遗传转化。在此基础上,分别对多基因遗传转化体系的受体材料、农杆菌浓度、侵染时间、共培养方式、G418筛选浓度和草甘膦筛选浓度等主要影响因素进行试验,探讨其适宜的转化条件。【结果】受体材料的筛选结果表明,幼胚的出愈率显着高于成熟胚,且其愈伤组织状态相对较好;各转化条件的筛选结果,农杆菌侵染浓度OD_(600)为0.4～0.6、侵染时间15～20 min、共培养2～3 d、培养基上添加无菌滤纸、G418筛选浓度150 mg·L~(-1)和草甘膦筛选浓度800 mg·L~(-1)是提高转化效率的优化条件; PCR分析结果,多基因载体P5中的GUS基因成功转入籼稻明恢86。【结论】通过对培养条件的优化,可使籼稻明恢86愈伤组织的诱导愈伤率和抗性愈伤率得到显着提高。(本文来源于《福建农业学报》期刊2019年06期）
黄佳俊,林俊芳,孙萍,梁景龙,叶志伟[2]（2018）在《多基因整合型载体转化酿酒酵母生物合成白藜芦醇》一文中研究指出目的:以整合型载体p RS303K为框架,以来源于拟南芥的4-香豆酰辅酶A连接酶基因(4cl)和巨峰葡萄的白藜芦醇合酶基因(rs)为目标基因,采用一步等温法构建了表达白藜芦醇的整合型酵母表达载体p RS303KT4C-TRC。方法:采用Li Ac/SS carrier DNA/PEG转化法把表达载体成功转化酿酒酵母工业型菌株EC1118,经筛选和PCR鉴定获得酵母工程菌株EC1118-303K-T4C-TRC。酵母工程菌株采用添加和不添加抗生素的发酵培养。结果:在培养基添加抗生素和不加抗生素的发酵液中白藜芦醇的含量分别为3.4110 mg/L和3.4710 mg/L,两者差异不显着。结论:两个关键酶基因成功整合到酵母的染色体基因组中并得到表达,工程菌株在传代中不受选择压力影响,稳定组合表达白藜芦醇。(本文来源于《中国食品学报》期刊2018年09期）
张甜丽[3]（2018）在《番茄碳同化相关基因共表达载体构建及遗传转化研究》一文中研究指出山西省是设施蔬菜生产大省,温室内CO_2亏缺是制约温室蔬菜提质增效的重要因素。为研究番茄响应低浓度CO_2基因的功能,以及探讨光合碳同化相关基因共表达对番茄应答低浓度CO_2的作用,本试验以番茄“合作908”为材料,克隆了番茄碳同化相关基因/cCA1、和FBA,通过构建βCA1+SBP+FBA多基因共表达载体,利用农杆菌介导法进行番茄遗传转化,最终获得βCA1、SBP和FBA叁个基因共同表达的番茄转基因植株。主要研究结果如下:(1)从番茄叶片中克隆了番茄碳同化相关的βCA1、SBP和FBA;(2)利用连接肽“2A”构建了含βCA1、SBP和FBA的多基因共表达载体;(3)对番茄再生体系进行了优化,筛选出褐化程度低的番茄再生体系:诱茅培养基:MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA+500 mg/L Cef+400 mg/mL PVP/40,生根培养基 MS+0.1 mg/L IAA+250 mg/L Cef;(4)利用农杆菌介导法进行番茄遗传转化,获得了高表达βCA1、SBP和FBA的番茄T1代转基因植株。(本文来源于《山西农业大学》期刊2018-06-01）
王静[4]（2018）在《农杆菌介导的苜蓿耐盐SOS多基因遗传转化研究》一文中研究指出苜蓿(Medicago sativa L.)是全世界分布最广的一种多年生豆科牧草,也是我国畜牧业生产中的重要饲草饲料,具有产量高,营养价值丰富,氨基酸组成均衡,畜禽均喜食等特性。随着生态文明建设和现代草畜产业发展,迫切需求节水抗旱和耐盐苜蓿新品种。利用分子育种手段是加快培育苜蓿耐盐新品种的有效途径。SOS(Salt Overly Sensitive,SOS)家族基因具有调控离子平衡作用,已在拟南芥、水稻、烟草和草坪草等植物中验证具有提高耐盐性功能,但目前应用该家族基因进行苜蓿耐盐性改良报道较少。本研究基于苜蓿高频再生体系的建立,优化了农杆菌介导的SOS家族多基因(SOS2和SOS3)遗传转化体系,获得了耐盐转基因株系,并在室内和田间进行了耐盐性鉴定和评价。主要结果如下:1.通过愈伤组织和子叶节离体培养,构建了高频的愈伤组织再生体系和子叶节再生体系。以“杰克林”、“阿尔冈金”、“金皇后1”、“金皇后2”、“皇后2000”、“柏拉图”、“叁得利”、“甘农3号”、“敖汉”和“陇东”10个苜蓿品种为研究对象,对其愈伤组织诱导分化,不定芽诱导伸长和生根等影响因素进行了系统研究,研究表明“杰克林”下胚轴愈伤组织诱导率高达100%,分化率高达69.75%;“金皇后2”子叶节不定芽诱导率达76%,分化率达71%;生根率高达96%。2.探讨了影响农杆菌介导的苜蓿胚性愈伤组织遗传转化的因素,优化了苜蓿多基因遗传转化体系。在农杆菌介导苜蓿多基因遗传转化中,100 μmol·L-1的乙酰丁香酮可使转化率提高2-3倍;最佳菌液侵染OD600值在0.6;最适侵染时间为20 min;头孢霉素作为最佳除菌剂其最适浓度为500 mg.L-1;筛选剂Glu最适选择压为5.0 mg.L-1;后期培养可适当降低除菌剂和筛选剂的浓度。3.对获得的12株除草剂抗性植株进行PCR、Southern杂交及RT-PCR分子检测,阳性植株5株,证明外源多基因已经整合到苜蓿的基因组之中,且SOS3基因和Bar基因已经在转录水平上表达。对获得的转基因株系T2-1采用嫩枝扦插技术进行盆栽无性扩繁,获得了 60株转基因T2-1株系群体材料。4.对获得的转基因株系T2-1进行了室内盆栽耐盐性鉴定,证明转基因株系较野生型具有明显的耐盐性。采用0、100、200和300 mMNaCl胁迫处理8d后,转基因株系T2-1的表型、株高、叶绿素、叶面积、鲜草产量、茎粗和分枝数等农艺性状均优于野生型对照;叶片K+、Ca2+和Pro含量及SOD、POD和CAT酶活性增加并高于野生型对照,Na+积累量、MDA含量和相对电导率均低于野生型对照。结果表明,转基因T2-1株系的抗氧化保护酶活性增加,清除了活性氧伤害;渗透调节物质积累增加,提高了渗透调节能力;膜脂过氧化程度较低,维持了膜结构稳定,这可能是由于SOS途径基因的表达调控将Na+排出胞外,选择性吸收更多的K+,维持细胞内Na+和K+的动态平衡,减轻Na+毒害,从而提高转基因苜蓿的耐盐性。5.对获得的转基因株系T2-1进行了田间耐盐性鉴定,证明转基因株系较野生型具有较高的耐盐性。转基因株系T2-1和野生型苜蓿的生长均受到不同程度的抑制,T2-1株系的株高、叶面积、产量、叶绿素含量、净光合速率等指标均优于野生型,蒸腾速率低于野生型;T2-1株系的抗氧化酶活性,脯氨酸、可溶性蛋白和可溶性糖,K+、Ca2+含量及K+/Na+比均高于野生型对照,丙二醛含量、相对电导率低于野生型对照。结果表明SOS途径基因的表达,提高了转基因苜蓿的光合性能,增加了产量,同时提高了抗氧化保护酶活性,维持膜结构稳定性,提高Na+/K+泵的活性,减缓或避免盐害,从而提高了 T2-1株系的耐盐性。(本文来源于《宁夏大学》期刊2018-05-01）
魏林艳[5]（2018）在《籼稻明恢86多基因遗传转化及再生体系的优化》一文中研究指出水稻是我国重要的粮食作物之一,其稳定确保国家粮食的安全生产。但是土壤的干旱、水稻病虫害、除草剂等因素都会严重制约水稻的产量,同时也不同程度的影响着水稻的品质。为此,构建出一个多基因植物表达载体,通过多基因载体的遗传转化,获得包含高产、抗逆、抗虫、抗病等特性的水稻新材料是确保国家粮食安全生产的一种有效途径。本研究以实验室已有的遗传转化体系为基础,进一步通过改善和优化培养条件,期望获得一种更为快速且高效的多基因遗传转化体系。研究以籼稻明恢86为受体材料,将事先构建好的含作物高产基因RRM2,耐旱基因HS1,抗除草剂基因EPSPS,抗虫基因BT,凋亡抑制基因IAP和P35等基因的多基因载体(载体分别命名为P5和P8),进行遗传转化。本研究主要结果如下:1、在相同的诱导培养条件下,通过对明恢86的幼胚和成熟胚进行诱导,结果表明:明恢86幼胚中诱导出的愈伤组织结构好,愈伤组织亮黄、硕大,生长旺盛,出愈率高。明恢86成熟胚中诱导出的愈伤组织质地、结构较小,愈伤组织生长较为缓慢,出愈率比较低。2、通过筛选剂草甘膦和筛选剂G418对愈伤组织进行不同的筛选浓度的梯度筛选,结果表明:明恢86愈伤组织在筛选培养过程中,对草甘膦和G418筛选浓度的敏感较弱,实验过程中需要添加高浓度的筛选剂,选择草甘磷筛选浓度为800mg/L较为合适;G418筛选浓度为150mg/L较为合适。3、农杆菌的菌液浓度、菌液侵染时间和共培养方式都是影响转化效果的主要因素。结果表明:菌液浓度太高、菌液侵染时间太长,共培养基上愈伤组织培养的时间太长,都会使农杆菌在侵染转化过的愈伤组织上大量繁殖,过度繁殖的农杆菌菌液会影响愈伤组织的正常生长,从而对愈伤组织造成毒害,降低转化效率。所以愈伤组织在侵染转化过程中,当OD值为600时,选择农杆菌侵染浓度为0.4-0.6,侵染时间控制在15-20min内,将侵染后的愈伤组织转接到共培养基上,放在26℃暗培养箱中培养2-3d。4、外源激素2,4-D是植物组织培养中最常用的生长调节激素。籼稻明恢86愈伤组织的形成和分化会受外源激素和内源激素的影响,但是如果要提高籼稻愈伤组织的生长状态,主要还是添加适量的外源激素2,4-D。研究结果表明,诱导明恢86愈伤组织的最佳2,4-D浓度是2 mg/L,这时诱导培养出的愈伤组织质量好,生长旺盛,有利于后续愈伤组织转化实验的使用。(本文来源于《福建农林大学》期刊2018-04-01）
任伟,王嘉莹,任华华,王英哲,王梦寒[6]（2017）在《PuCAT/Bar抗逆抗除草剂基因共转化紫花苜蓿的研究》一文中研究指出为了提高紫花苜蓿的抗盐碱能力,利用盐生植物碱茅的PuCAT基因成功构建了p3300-35S-PuCAT-NOS植物表达载体,以Bar基因为筛选标记基因,通过农杆菌介导转化公农5号紫花苜蓿子叶,并对其遗传转化体系进行了优化(预培养、菌液浓度、侵染时间、共培养、抗生素浓度),经草铵膦筛选获得72株抗性植株,用PCR检测和RT-PCR鉴定,最终获得30株RT-PCR阳性植株。结果表明,PuCAT基因已经整合在苜蓿基因组中,并且能够在RNA水平上表达。(本文来源于《华北农学报》期刊2017年S1期）
姚振,沈博然,彭新湘[7]（2018）在《马铃薯多基因质体转化载体及其在光呼吸支路构建中的应用》一文中研究指出为了将大肠杆菌的乙醇酸代谢途径引入马铃薯叶绿体构建光呼吸代谢支路,同时规避目标蛋白不能通过叶绿体信号肽定位的风险,研究采用了Cre-Lox P多基因组装、融合蛋白表达、多顺反子表达等技术构建多基因质体转化载体,一次性将目标基因引入叶绿体基因组。研究成功构建了多基因质体转化载体,将编码壮观霉素抗性筛选标记氨基葡糖苷腺苷转移酶aad A、绿色荧光蛋白GFP、大肠杆菌乙醇酸脱氢酶(EcGLC)的3个亚基,乙醛酸聚醛酶(EcGCL)和羟基丙二酸半醛还原酶(Ec TSR)的7个基因添加到受体载体,最终的载体大小为18.1 kb。在构建的过程中,研究发现供体受体质粒的大小比例、Prrn启动子在细菌中的启动基因的表达等问题严重影响重组的效率。以上研究结果为光呼吸的代谢改造研究提供了一个新的思路,并解除了质体转化载体构建中基因数量的限制,对于叶绿体中复杂的代谢途径构建具有借鉴意义。(本文来源于《分子植物育种》期刊2018年12期）
朱丽,钱前[8]（2017）在《突破复杂性状多基因转化技术壁垒,首创胚乳花青素高积累的水稻新种质》一文中研究指出随着转基因技术的日趋成熟,利用生物工程手段加快改良作物农艺性状,已经越来越显示出其巨大的应用潜力。在改良多基因调控的复杂农艺性状方面,单基因转化收效甚微,而长期以来多基因转化不仅受限于技术因素,而且在协调表达调控、代谢及修饰等一系列相关基因方面更是难于突破。近期,我国科学家首次利用自创的多基因垛迭表达系统,成功在水稻(Oryza sativa)胚乳中合成了具有抗氧化活性的花青素,在复杂性状多基因转化领域取得了突破性进展。(本文来源于《植物学报》期刊2017年05期）
王静,麻冬梅,许兴[9]（2017）在《农杆菌介导的耐盐多基因转化紫花苜蓿及分子检测》一文中研究指出盐超敏感(salt overly sensitive,SOS)信号转导途径是一个控制离子平衡的信号通路,可以在细胞水平上排出Na~+控制离子平衡,从而提高植物的耐盐性。将多基因植物表达载体p SOS中包含的SOS1、SOS2和SOS3、SOS3类钙结合蛋白8/钙调磷酸酶B10(SOS3-like calcium binding protein 8/calcineurin Blike 10,SCa BP8/CBL10)及抗双丙氨膦(bialaphos resistance,Bar)基因多个耐盐基因转化苜蓿(Medicago sativa),对于增强苜蓿的耐盐性具有重要的现实意义。本研究采用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法,以"金皇后"苜蓿的子叶节为外植体进行遗传转化,除草剂草丁膦(glufosinate)最佳筛选浓度确定为0.6 mg/L,除菌剂头孢霉素(cefotazime)筛选浓度确定为300 mg/L,经除草剂筛选共获得了25株独立来源的转化植株。经PCR分子检测,有6株转基因植株具有PCR电泳扩增条带,阳性率为24%。随机将4株阳性植株进行Southern杂交,有3株出现杂交信号,拷贝数为1~2个。RT-PCR检测表明,与预期的条带大小相符合的Bar基因(463 bp)和SOS1基因(700 bp)在转基因植株中表达。结果表明,多个外源目的基因已经整合到苜蓿基因组中并且在转录水平上已表达。250 mmol/L NaCl胁迫处理后,转基因和野生型植株生长都受到了一定程度上的抑制,但转基因植株的株高均明显高于野生型,P1和P2株系叶面积均明显高于野生型对照,3个株系的鲜重均明显高于对照,P2和P4株系叶绿素含量明显高于野生型对照。说明SOS途径多基因的超表达提高了转基因苜蓿的耐盐性。本研究成功获得了转耐盐多基因苜蓿,为选育适合盐渍化土壤种植的耐盐苜蓿新品种,及苜蓿耐盐鉴定和耐盐机理等研究提供了理论依据。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2017年08期）
初易洋,田慧琴,许蕙金兰,朱本忠[10]（2016）在《植物多基因转化研究进展》一文中研究指出通过转基因技术改良植物品质近几年已成为热点研究问题,基因工程不断发展,单基因转化技术已不能满足人们对植物改良的需要。更多的研究者投身于参与某个代谢途径的多个基因在植物体中共同表达的研究,通过多基因调控来获得更好的植物性状。基因的协调表达有四种研究思路,在此基础上多基因转化方法可概述为传统转化法、改进后的共转化法,及新兴的基因融合方法,综合分析每种方法在植物代谢调控中的优缺点与应用,并探讨多基因整合的不稳定及相互作用问题。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2016年12期）
多基因共转化论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:以整合型载体p RS303K为框架,以来源于拟南芥的4-香豆酰辅酶A连接酶基因(4cl)和巨峰葡萄的白藜芦醇合酶基因(rs)为目标基因,采用一步等温法构建了表达白藜芦醇的整合型酵母表达载体p RS303KT4C-TRC。方法:采用Li Ac/SS carrier DNA/PEG转化法把表达载体成功转化酿酒酵母工业型菌株EC1118,经筛选和PCR鉴定获得酵母工程菌株EC1118-303K-T4C-TRC。酵母工程菌株采用添加和不添加抗生素的发酵培养。结果:在培养基添加抗生素和不加抗生素的发酵液中白藜芦醇的含量分别为3.4110 mg/L和3.4710 mg/L,两者差异不显着。结论:两个关键酶基因成功整合到酵母的染色体基因组中并得到表达,工程菌株在传代中不受选择压力影响,稳定组合表达白藜芦醇。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
多基因共转化论文参考文献
[1].魏林艳,连玲,魏毅东,罗曦,何炜.籼稻明恢86多基因遗传转化体系的研究[J].福建农业学报.2019
[2].黄佳俊,林俊芳,孙萍,梁景龙,叶志伟.多基因整合型载体转化酿酒酵母生物合成白藜芦醇[J].中国食品学报.2018
[3].张甜丽.番茄碳同化相关基因共表达载体构建及遗传转化研究[D].山西农业大学.2018
[4].王静.农杆菌介导的苜蓿耐盐SOS多基因遗传转化研究[D].宁夏大学.2018
[5].魏林艳.籼稻明恢86多基因遗传转化及再生体系的优化[D].福建农林大学.2018
[6].任伟,王嘉莹,任华华,王英哲,王梦寒.PuCAT/Bar抗逆抗除草剂基因共转化紫花苜蓿的研究[J].华北农学报.2017
[7].姚振,沈博然,彭新湘.马铃薯多基因质体转化载体及其在光呼吸支路构建中的应用[J].分子植物育种.2018
[8].朱丽,钱前.突破复杂性状多基因转化技术壁垒,首创胚乳花青素高积累的水稻新种质[J].植物学报.2017
[9].王静,麻冬梅,许兴.农杆菌介导的耐盐多基因转化紫花苜蓿及分子检测[J].农业生物技术学报.2017
[10].初易洋,田慧琴,许蕙金兰,朱本忠.植物多基因转化研究进展[J].中国生物工程杂志.2016