论文摘要
外泌体是指释放到细胞外微环境中的直径约50~130 nm的纳米级的膜性囊泡。嗅黏膜间充质干细胞(olfactory mucosa mesenchymal stem cells,OM-MSCs)作为一类新发现的间充质干细胞,在许多疾病中均具有治疗作用,且其内在机制与其旁分泌的外泌体密切相关,但OM-MSCs外泌体的分离、鉴定及生物学特性的研究尚未见报道。本研究采用超速离心法提取OM-MSCs培养液中的外泌体,应用流式细胞术及免疫荧光进行细胞鉴定后,分别用透射电子显微镜、纳米粒径分析及Western印迹对外泌体形态、颗粒大小和表面的特异性分子标志进行分析鉴定。采用CCK8增殖实验,Western印迹和划痕实验,分析其对人脑微血管内皮细胞增殖和迁移的影响。电镜、Western印迹和纳米粒径分析的结果显示:OM-MSCs来源外泌体形态多为圆形,直径约为40~150 nm;表达外泌体标记物CD63,CD81; CCK-8法检测显示:不同浓度的OM-MSCs源外泌体可提高人脑微血管内皮细胞的增殖活性,且其增殖促进作用具有浓度依赖性(P<0. 05)。Western印迹检测结果显示:相比空白对照组,OM-MSCs源外泌体可显著提高内皮细胞的增殖细胞核抗原蛋白质水平表达(P<0. 01),细胞划痕实验结果显示,OM-MSCs源外泌体可增强内皮细胞的迁移能力,且高于对照组(P<0. 01)。本研究表明:通过超速离心法可以分离纯化获得OM-MSCs源外泌体,且该外泌体具有促进人脑微血管内皮细胞迁移和增殖的作用。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 葛丽特,寻成峰,卓毅,胡莉,龙浪,段答,陈平,卢明
关键词: 间充质干细胞,嗅黏膜,外泌体,增殖,迁移
来源: 中国生物化学与分子生物学报 2019年10期
年度: 2019
分类: 基础科学,医药卫生科技
专业: 生物学,基础医学
单位: 湖南师范大学生命科学学院动物多肽药物创制国家地方联合工程实验室,湖南师范大学第二附属医院神经修复学湖南省重点实验室
基金: 国家自然科学基金项目(No.81371358),湖南省高校科研项目(16B159),湖南省研究生科研创新项目(No.CX2018B309,CX2018B240,CX20190409)~~
分类号: R329.2
DOI: 10.13865/j.cnki.cjbmb.2019.10.12
页码: 1128-1134
总页数: 7
文件大小: 396K
下载量: 311
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