产气荚膜梭菌α毒素C末端的二拷贝串联表达与免疫原性分析

论文摘要

本研究旨在获得产气荚膜梭菌α毒素（CPA）C末端（第247-370位氨基酸,CPAC）二拷贝串联融合蛋白,并评价其免疫原性。对已知的A型产气荚膜梭菌CPAC编码基因进行优化设计,将其以同向串连的方式串联成二拷贝基因(GCPAC2),经人工合成获得基因片段GCPAC2。将GCPAC2克隆至原核表达载体pET-30a （+）中进行表达与纯化,获得重组蛋白rCPAC2。利用Western Blot方法检测rCPAC2与A型产气荚膜梭菌毒素抗血清的反应性。随后,用rCPAC2免疫家兔,并检测一免及二免后兔血清的中和抗体效价。在二免21 d后,经耳缘静脉注射1个家兔MLD的A型产气荚膜梭菌毒素,检测rCPAC2对家兔的免疫保护效果。结果表明,rCPAC2主要以包涵体的形式表达且能与A型产气荚膜梭菌毒素抗血清反应。每毫升的一免和二免抗血清分别可中和30个和80个小鼠MLD的A型产气荚膜梭菌毒素。1个兔MLD的A型产气荚膜梭菌毒素攻毒后,对照组4/4死亡,免疫组得到了100%（4/4）的保护。以上结果说明,rCPAC2具有良好的免疫原性,从而为A型产气荚膜梭菌病基因工程疫苗的研制提供了重要的实验数据。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 杜吉革,王磊,薛麒,朱真,李启红,印春生,姚文生,康凯,陈小云

关键词: 产气荚膜梭菌毒素,末端,串联表达,抗原性

来源: 中国兽医杂志 2019年01期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 中国兽医药品监察所

基金: 科技部十三五“牛羊重要疫病免疫防控新技术研究”重点专项子课题(2017WFD0500903)

分类号: S852.61

页码: 7-10

总页数: 4

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