嗜热脂肪土芽孢杆菌GL-1 Hsp33基因的克隆及结构分析

嗜热脂肪土芽孢杆菌GL-1 Hsp33基因的克隆及结构分析

论文摘要

以嗜热脂肪土芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)GL-1为研究对象,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增获得该菌株的热休克蛋白33(Hsp 33)基因,通过ExPASy、SOPMA、Pymol等在线软件对其进行生物信息学分析。同时,考察热胁迫处理对嗜热脂肪土芽孢杆菌GL-1生长的影响,并利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)研究菌株在热胁迫中Hsp33基因的表达情况。结果表明,通过PCR扩增得到碱基长度为876 bp的Hsp33基因,该基因与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)1vzy的Hsp33基因序列相似性达到99%,其表达的蛋白质结构与Bacillus subtilis 1vzy的Hsp33蛋白具有相似的核心结构域,二者除C-末端稍有不同外,具有相同的β-折叠和α-螺旋,无卷曲螺旋。热胁迫对嗜热脂肪土芽孢杆菌GL-1生长具有影响,当菌株受到热胁迫时,Hsp33基因表达量增加,说明在受到热胁迫时,Hsp33蛋白作出了应激反应。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •     1.1.1 菌株
  •     1.1.2 培养基
  •     1.1.3 试剂
  •   1.2 仪器与设备
  •   1.3 方法
  •     1.3.1 菌株的活化
  •     1.3.2 菌株DNA的提取及PCR扩增
  •     1.3.3 Hsp33蛋白的结构分析
  •     1.3.4 菌株的热激处理
  •     1.3.5 Hsp33基因表达的检测
  • 2 结果与分析
  •   2.1 Hsp33基因的克隆
  •   2.2 Hsp33蛋白结构分析
  •   2.3 热胁迫对嗜热脂肪土芽孢杆菌GL-1生长的影响
  •   2.4 热胁迫条件下Hsp33基因的表达
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 高丽梅,高金秀,梁蔓蔓,刘妍,姚淑敏

    关键词: 嗜热脂肪土芽孢杆菌,热休克蛋白,克隆,热激,结构分析

    来源: 中国酿造 2019年11期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 曲阜师范大学生命科学学院

    基金: 国家青年基金项目(31700433),国家级创新训练项目(201710446076)

    分类号: Q78

    页码: 155-159

    总页数: 5

    文件大小: 1891K

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