GII.3型诺如病毒GZ31597株变异情况及与受体组织血型抗原结合模式分析

GII.3型诺如病毒GZ31597株变异情况及与受体组织血型抗原结合模式分析

论文摘要

诺如病毒(Noroviruses,NoVs)是引起非菌型胃肠炎暴发流行的主要病原体之一。为了解我国GII.3型NoVs毒株的变异以及受体结合模式,本研究对来自2015年一起中国广州NoVs胃肠炎暴发的GII.3型毒株GZ31597株进行聚合酶区和完整VP1区基因扩增、序列测定和序列分析,并表达VP1突出区蛋白(P蛋白),通过P蛋白与不同血型唾液样本的酶免疫分析法(EIA)测定实验确定其组织血型抗原(Histo-blood group antigens,HBGAs)结合模式。GZ31597株聚合酶和VP1基因系统进化分析表明,GZ31597株为GII.P12/GII.3-SubD基因型(聚合酶/衣壳区),该毒株较先前的GII.3毒株相比,在既是抗原表位又是HBGAs受体结合位点的氨基酸385残基发生了氨基酸转换。根据Western Blotting结果,证实P蛋白成功表达。唾液结合分析结果显示,该毒株P蛋白与A、B、AB、O型分泌型以及O型非分泌型唾液均可以结合,但结合值相对低。本研究表明该GII.P12/GII.3-SubD亚型的GII.3毒株在长期的流行过程中,通过氨基酸的转换,改变抗原性和受体结合活性,使GII.3型毒株在人群中继续流行。通过探索GII.3型NoVs在人群中长期广泛流行的原因,为GII.3型诺如病毒性胃肠炎的预防和控制提供重要依据。

论文目录

  • 材料与方法
  •   1 样本及试剂
  •   2 聚合酶区和完整VP1基因扩增
  •   3 系统进化分析
  •   4 VP1基因P区基因序列的扩增和纯化
  •   5 pGEX-4T1-P粒子质粒构建
  •   6 P蛋白的表达、纯化
  •   7 Western Blotting蛋白验证
  •   8 EIA法 (酶免疫分析法) 检测P粒子与HBGA受体的结合方式
  •     8.1 多抗血清稀释度的确定
  •     8.2 EIA法检测P粒子与HBGA受体的结合模式
  • 结果
  •   1 GII.3型流行毒株变异情况
  •     1.1 NoVs广州株31597株系统进化分析
  •     1.2GII.3型NoVs广州株31597氨基酸位点变异分析
  •   2原核表达载体pGEX-4T1-P的构建及P粒子制备
  •     2.1原核表达载体pGEX-4T1-P的构建
  •     2.2目的蛋白表达纯化及Western Blotting鉴定P蛋白
  •   3 GII.3型NoVs 31597株唾液结合模式
  • 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王婧,张会芳,靳淼,谢华萍,孔翔羽,冯微宏,李宇宁,胡贵方,何雅青,段招军

    关键词: 诺如病毒,基因型,进化,组织血型抗原,蛋白

    来源: 病毒学报 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,医药卫生科技

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 南方医科大学公共卫生学院流行病学系,兰州大学第一临床医学院,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室,广州市疾病预防控制中心,无锡市疾病预防控制中心,深圳市疾病预防控制中心微生物检验科

    基金: 无锡市科技发展资金(项目号:CSE31N1611),题目:人群易感性对诺如病毒株流行趋势的影响,卫计委面上项目(项目号:MS201617),题目:人群易感性对诺如病毒株流行趋势的影响,国家科技重大专项(项目号:2017ZX10104001-003),题目:基于全基因组的病毒网络化监测和溯源技术体系研究,中美新发和再发传染病合作项目(项目号:No.4),题目:中国诺如病毒实验室监测网络(CaliciNet China)的建立~~

    分类号: R373.2

    DOI: 10.13242/j.cnki.bingduxuebao.003493

    页码: 37-44

    总页数: 8

    文件大小: 1124K

    下载量: 157

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