海洋来源褐藻胶裂解酶及其基因B1SM的克隆和表达

论文摘要

从海洋来源的假交替单胞菌（Pseudoalteromonas sp.） B1基因组中克隆1个褐藻胶裂解酶基因,并在大肠杆菌中实现异源表达,分离纯化重组酶并研究其酶学性质。通过Touch down PCR与热不对称交错PCR（thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR）从假交替单胞菌B1基因组中扩增到1个褐藻胶裂解酶基因（B1SM）,将目的基因插入到p GEX-4T-1载体,转化到宿主大肠杆菌（Escherichia coli,E. coli） BL21 （DE3）。结果显示,从菌株B1克隆得到褐藻胶裂解酶基因B1SM,序列长度为1 005 bp,编码334个氨基酸,理论等电点为8. 51,编码蛋白质的理论分子质量为37. 13 k Da。重组褐藻胶裂解酶B1SM的最适pH和温度分别为8. 0和25℃。该褐藻胶裂解酶在pH 7. 0～9. 0范围内,25℃下保温1 h,仍剩余60%以上活力,pH稳定性较好。在最适pH 8. 0和30℃下保温1 h重组酶仍剩余60%以上活力。该研究为褐藻胶裂解酶基因B1SM在E. coli BL21（DE3）中实现了异源表达,为褐藻胶裂解酶的制备和研究奠定基础。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 吴晨烁,李晓月,秦明珍,严芬

关键词: 褐藻胶裂解酶,假交替单胞菌,聚合酶链反应

来源: 食品与发酵工业 2019年03期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

专业: 生物学

单位: 福州大学生物科学与工程学院

基金: 福建省财政厅项目(闽财指(2015)1297号),福建省省财政厅项目(闽财指(2014)1262号),福州市市级科技计划项目(2017X0035),校科技发展基金(2014-XQ-20),校科技发展基金(2013-XQ-28)

分类号: Q78

DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.018288

页码: 77-82

总页数: 6

文件大小: 1642K

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标签：褐藻胶裂解酶论文;  假交替单胞菌论文;  聚合酶链反应论文;