辽宁地区柞园土壤微生物种群变化及木霉菌种类鉴定分析

辽宁地区柞园土壤微生物种群变化及木霉菌种类鉴定分析

论文摘要

辽宁省丰富的柞林资源为柞蚕放养提供了充足的饲料资源,但柞蚕放养过程中不合理地和过度利用柞树资源,对柞园生态环境造成一定影响,因此科学合理地建设与利用柞园是学者们不断探讨的话题。柞园生态环境的好坏可以从柞园植被覆盖度、柞园担蚕量、土壤肥力和土壤微生物种群丰富度来反应,但目前还缺乏对柞园土壤微生物种群变化的研究。因此,本研究中选取生态建设较好的柞园和周围林地土壤,分析土壤中微生物种群的变化,作为柞园生态建设提供土壤微生物指标,为柞园生态建设和合理利用柞园放养柞蚕提供数据支持。木霉菌是一种广泛存在于土壤中的真菌,在柞园柞树根部也有分布,对辽宁省不同地区柞园根际木霉菌种类和分布情况进行了研究,探究不同地区柞园中木霉菌的种类和多样性,为获得适应不同地区生境条件的优良木霉菌和柞树病害生物防治提供了可参考的数据。柞园与周边林地土壤理化性质分析表明,柞园与林地土壤在含水量、pH值和有效钾含量上存在着显著性差异(p<0.05),而有机质含量、有效磷含量和有效氮含量基本没有差异。Illumina MiSeq高通量测序法对柞园与林地土壤微生物多样性进行了分析,发现细菌属总OTU数较真菌高,其中真菌OUT数在两地间存在显著差异;土壤细菌与真菌群落α多样性分析表明两地土壤微生物多样性与丰富度无显著性差异;在微生物种类与组成上存在差异;Beta多样性分析发现两地样本有明显分离说明柞园与附近林地之间细菌群落结构相似度较低,差异较大。就真菌群落而言柞园与林地两组样本之间并未明显分离,群落组成相似度较高,其组间差异并不明显且柞园的组内差异较林地高。优势物种互作Spearman关联网络分析表明,大部分土壤细菌间均是合作关系,参与着土壤物质交流与能量转换,而土壤中的真菌均是合作关系,尤其是木霉属(Trichoderma),与很多属之间均是相互协作关系。通过对辽宁省9个县柞园内柞树根部木霉菌的分离与鉴定,共获得265株木霉菌,形态学与分子生物学鉴定方法相结合共鉴定出12种木霉菌,并对木霉菌在PDA培养基上产孢区的形状、颜色、色素的有无及分生孢子梗的分枝方式等进行了描述。不同地区木霉菌分离率显著不同,木霉菌多样性指数分析表明,生态建设好的大连庄河市、丹东凤城市、本溪市本溪县和沈阳东陵区的多样性指数较大,木霉菌多样性较丰富。木霉菌与镰刀菌对峙培养结果表明,不同木霉菌对镰刀菌的作用方式不同,如TFC2-1-6(绿木霉)能够覆盖到镰刀菌上,而TFC 2-2-1(深绿木霉)不能覆盖到镰刀菌上。柞园木霉菌对镰刀菌的抑制率存在显著性差异,TSY 2-2-2(钩状木霉)抑制作用最好,抑制率为70.54%,其次为TFS 2-2-3(拟康宁木霉)、TSY 2-1-4(绿木霉)等,分别为64.42%、63.25%。同一种木霉菌生存在不同区域,其抑制效果也有差别,其中沈阳地区和凤城地区分离的木霉菌对镰刀菌的抑制率高的菌株较多,岫岩地区分离的木霉菌对镰刀菌的抑制率低的菌株较多。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第一章 文献综述
  •   1.1 柞园的生态建设
  •   1.2 土壤微生物多样性的研究方法与意义
  •     1.2.1 土壤微生物多样性的研究方法
  •     1.2.2 土壤微生物研究意义
  •   1.3 木霉菌种群分布与利用
  •     1.3.1 木霉菌的分布
  •     1.3.2 木霉菌的应用
  •     1.3.3 木霉菌的生防机制
  •   1.4 本课题的研究意义与内容
  •     1.4.1 研究意义
  •     1.4.2 研究内容
  • 第二章 柞园土壤微生物多样性研究
  •   2.1 材料与方法
  •     2.1.1 取样地点
  •     2.1.2 土壤理化分析
  •     2.1.3 样品检测
  •     2.1.4 柞园与林地土样高通量测序
  •   2.2 结果与分析
  •     2.2.1 土壤理化性质
  •     2.2.2 基因测序信息
  •     2.2.3 OTU分析
  •     2.2.4 Alpha多样性分析
  •     2.2.5 两地土壤细菌与真菌群落组成分析
  •     2.2.6 柞园与林地土壤的Beta多样性分析
  •     2.2.7 优势物种互作Spearman关联网络分析
  •     2.2.8 菌群代谢功能预测
  •   2.3 讨论
  •   2.4 结论
  • 第三章 辽宁地区柞园木霉菌种类分离鉴定及种群多样性的研究
  •   3.1 材料与方法
  •     3.1.1 样品采集与菌株分离
  •   3.2 菌株鉴定
  •     3.2.1 木霉菌菌株的形态观察
  •     3.2.2 木霉菌的分子鉴定
  •   3.3 各地区不同木霉菌种类的调查分析
  •     3.3.1 不同木霉菌在不同地区分分离率与分离频率
  •     3.3.2 不同地区木霉多样性指数的计算
  •   3.4 结果与分析
  •     3.4.1 辽宁地区柞园木霉菌分离及鉴定
  •     3.4.2 不同地区木霉菌分离率与分布频率
  •     3.4.3 不同地区木霉多样性指数
  •   3.5 讨论
  •   3.6 结论
  • 第四章 木霉菌对镰刀菌的抑制作用
  •   4.1 材料与方法
  •     4.1.1 供试材料
  •     4.1.2 试验方法
  •   4.2 结果与分析
  •     4.2.1 柞园不同木霉菌对镰刀菌作用方式的差异
  •     4.2.2 不同地区柞园木霉菌对镰刀菌抑制效果
  •     4.2.3 不同地区柞园木霉菌对镰刀菌抑制效果的差异
  •   4.3 结论与讨论
  •     4.3.1 讨论
  •     4.3.2 结论
  • 第五章 结论
  •   5.1 柞园和林地土壤理化性质和微生物多样性差异
  •   5.2 辽宁省不同地区柞园木霉菌种类及种群多样性存在差异
  •   5.3 不同地区不同木霉菌对镰刀菌的作用方式与抗性存在差异
  • 参考文献
  • 致谢
  • 攻读学位期间发表学术论文
  • 文章来源

    类型: 硕士论文

    作者: 范星菊

    导师: 刘限

    关键词: 柞园,木霉菌,土壤理化性质,土壤微生物多样性

    来源: 沈阳农业大学

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 自然地理学和测绘学,农业基础科学,林业,蚕蜂与野生动物保护

    单位: 沈阳农业大学

    分类号: S889.3;S714

    DOI: 10.27327/d.cnki.gshnu.2019.000192

    总页数: 68

    文件大小: 2943K

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