论文摘要
金钱鱼(Scatophagus argus)对水环境的盐度变化具有很强的适应能力。为了解该鱼的催乳素基因(SaPRL)在其渗透压调节过程中所起到的作用,本研究采用RACE技术,对SaPRL基因进行了全长cDNA序列的克隆及序列分析。结果表明,SaPRL的cDNA序列全长为1 550 bp,可编码212个氨基酸,具有与其他物种共同的保守区域Growth hormone like superfamily;在氨基酸序列上,它与黑棘鲷(Acanthopagrus schlegelii)的催乳素基因(PRL)相似性较高,达82%,而与人(Homo sapiens)的PRL的相似性仅为39%。用半定量法(sq-PCR)进行组织分布分析显示,在盐度为2.5%的海水中,金钱鱼SaPRL基因主要于脑和垂体中有高丰度表达。此外,SaPRL主要分布在金钱鱼脑组织的脑膜中。最后,本研究成功构建了SaPRL-pET28a(+)原核表达质粒,当在含该质粒的宿主菌中加入1 mmol/L的IPTG并以32℃诱导4h后,能获得大量融合蛋白的表达;该诱导条件下的蛋白主要以包涵体形式存在,且于4 mol/L尿素中的溶解度最大。上述研究结果,为探讨SaPRL基因在金钱鱼盐度适应过程中的作用机理提供了重要的基础资料。
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文章来源
类型: 期刊论文
作者: 梁雪梅,余琳,张俊彬
关键词: 金钱鱼,催乳素,基因克隆,序列分析,原核表达
来源: 基因组学与应用生物学 2019年11期
年度: 2019
分类: 基础科学,医药卫生科技,农业科技
专业: 水产和渔业
单位: 上海海洋大学水产与生命学院,深圳大学生命与海洋科学学院
基金: 中国国家科学技术部项目(项目编号:DF)资助
分类号: S917.4
DOI: 10.13417/j.gab.038.004875
页码: 4875-4884
总页数: 10
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