发状念珠藻NfwspA3基因的克隆及其耐旱能力分析

发状念珠藻NfwspA3基因的克隆及其耐旱能力分析

论文摘要

水分胁迫蛋白(WSP,Water stress protein,)在植物耐干旱过程中起着重要作用。发状念珠藻具有极强的耐旱、耐盐和抗辐射等能力。本研究以发状念珠藻基因组DNA为模板,利用PCR技术克隆到一个发状念珠藻水分胁迫蛋白基因的开放阅读框(ORF)序列,命名为NfwspA3,其序列全长1017 bp。生物信息学预测表明,该基因可编码338个氨基酸残基,预测等电点为4.85,分子量为37.48 kD,为亲水性稳定蛋白,分布在细胞质中。构建了NfwspA3基因的重组表达菌株pET32aNfwspA3,以聚乙二醇-6000(PEG-6000)对其模拟干旱胁迫,发现重组菌株最高可忍耐60%浓度的PEG-6000,表现出较强的耐旱性,且具有较高的半乳糖苷酶活性。研究结果为探知发状念珠藻WSP蛋白逆境响应机制及其遗传改良提供了理论依据和基因元件。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 试验材料
  •   1.2 发状念珠藻基因组DNA提取
  •   1.3 NfwspA3基因的分离
  •   1.4 生物信息学分析
  •   1.5 pGEM-T-NfwspA3克隆载体的构建
  •   1.6 pET32a-NfwspA3表达载体的构建
  •   1.7 IPTG诱导表达及蛋白质提取检测
  •   1.8 p ET32a-Nfwsp A3重组表达菌株耐旱能力测定
  •   1.9 重组表达菌株β-半乳糖苷酶活性检测
  • 2 结果与分析
  •   2.1 NfwspA3基因开放阅读框 (ORF) 克隆
  •   2.2 NfwspA3基因编码蛋白的生物信息学分析
  •     2.2.1 NfwspA3基因编码蛋白的理化性质及结构预测
  •     2.2.2 NfwspA3基因编码蛋白的同源多序列比对
  •   2.3 融合表达载体pET32a-NfwspA3的鉴定
  •   2.4 重组质粒pET32a-NfwspA3的原核诱导表达
  •   2.5 pET32a-NfwspA3重组菌株耐旱性分析
  •   2.6 酶活性分析
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 范红丽,冯翠娥,吴佳月,周丽,郑蕊,苏建宇,岳思君

    关键词: 发状念珠藻,水分胁迫蛋白,基因克隆

    来源: 植物遗传资源学报 2019年02期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 宁夏大学生命科学学院/西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室

    基金: 国家自然科学基金(31360025,31560418,31360361)~~

    分类号: Q943.2;Q945.78

    DOI: 10.13430/j.cnki.jpgr.20180508002

    页码: 451-458

    总页数: 8

    文件大小: 1288K

    下载量: 162

    相关论文文献

    • [1].鹅HIF-1α基因克隆与组织表达分析[J]. 仲恺农业工程学院学报 2020(02)
    • [2].RACE技术在动物基因克隆中的应用[J]. 上海畜牧兽医通讯 2009(04)
    • [3].基因克隆及组装技术的研究进展[J]. 中国生物工程杂志 2020(Z1)
    • [4].水稻耐盐性遗传与基因克隆研究进展[J]. 长江大学学报(自科版) 2014(35)
    • [5].高等植物基因克隆的策略[J]. 浙江农业学报 2013(04)
    • [6].甘蔗基因克隆研究进展[J]. 生物技术通报 2012(08)
    • [7].苦荞糖基转移酶的鉴定与基因克隆[J]. 农业与技术 2016(21)
    • [8].抑制性消减杂交技术及其在水生动物基因克隆中的应用[J]. 黑龙江畜牧兽医 2010(23)
    • [9].我国丁型肝炎病毒全基因克隆及序列分析[J]. 微生物与感染 2015(06)
    • [10].曼氏迭宫绦虫果糖-1,6-二磷酸酶的生物信息学分析、基因克隆及蛋白表达[J]. 中国病原生物学杂志 2020(07)
    • [11].基因克隆和功能验证研究[J]. 新乡学院学报(自然科学版) 2013(04)
    • [12].阻塞性睡眠呼吸暂停综合征相关基因的研究进展[J]. 世界最新医学信息文摘 2018(A5)
    • [13].主要农作物驯化研究进展与展望[J]. 植物遗传资源学报 2019(06)
    • [14].鹅掌楸LcUGE基因的克隆和组织表达分析[J]. 热带亚热带植物学报 2018(06)
    • [15].泥蚶(Tegillarca granosa)精氨酸激酶的基因克隆与表达[J]. 海洋与湖沼 2011(01)
    • [16].纤维素酶及相关基因克隆的研究进展[J]. 湖南农业科学 2009(12)
    • [17].玉米抗病相关基因ZmEDS1的克隆及表达分析[J]. 玉米科学 2018(06)
    • [18].水稻产量性状定位与基因克隆研究进展[J]. 安徽农业科学 2012(14)
    • [19].超深渊钩虾Eurythenes gryllus i型溶菌酶的基因克隆与表达[J]. 应用海洋学学报 2020(01)
    • [20].千里光苯丙氨酸解氨酶基因克隆与系统进化分析[J]. 遵义医科大学学报 2020(03)
    • [21].制定我国《基因安全法》的重点与难点[J]. 社会科学文摘 2018(12)
    • [22].嗜热真菌β-葡萄糖苷酶基因克隆表达与调控的研究进展[J]. 纤维素科学与技术 2017(02)
    • [23].牦牛KLF3基因克隆及组织表达分析[J]. 生物技术通报 2017(08)
    • [24].阿魏酸酯酶基因克隆表达调控及其应用进展[J]. 生物技术通报 2009(12)
    • [25].拟南芥中一个锌指蛋白AT 5 g 47610的基因克隆及表达分析[J]. 种子 2019(04)
    • [26].凝胶内长片段基因克隆的实验方法研究[J]. 中国分子心脏病学杂志 2018(03)
    • [27].棉铃虫V-ATP酶G亚基基因克隆及相对表达量分析[J]. 植物保护学报 2020(01)
    • [28].地熊蜂非视觉相关beta-arrestin基因的克隆与表达谱分析[J]. 山西农业大学学报(自然科学版) 2019(05)
    • [29].菠萝泛菌β-1,4-内切葡聚糖酶基因克隆、表达与酶活性分析[J]. 食品科学 2016(23)
    • [30].盐生植物耐盐相关基因克隆的研究进展[J]. 安徽农业科学 2009(22)

    标签:;  ;  ;  

    发状念珠藻NfwspA3基因的克隆及其耐旱能力分析
    下载Doc文档

    猜你喜欢