导读:本文包含了融和基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,基因,休克,家蚕,流行病学,肺炎,分子。
融和基因论文文献综述
郭爱芹[1]（2009）在《家蚕杆状病毒多角体基因与外源目的基因融和表达的研究》一文中研究指出多角体蛋白是昆虫杆状病毒极晚期大量表达产生的、一种用于包裹和保护病毒粒子的蛋白质。在感染细胞中多角体蛋白的含量可高达细胞总蛋白的20-50%,目前昆虫杆状病毒表达系统中,通常外源基因在多角体启动子驱动下进行表达,但外源基因的表达水平远远达不到野生型病毒多角体蛋白的水平。本研究分别克隆家蚕BmNPV多角体(polh)蛋白的不同基因片段,构建了一系列带有多角体启动子和不同长度BmNPV polh基因片段的新型供体质粒,并以绿色荧光蛋白EGFP作为报告基因,通过两者不同组合的融合构建了多种重组BmNPV病毒。通过感染家蚕培养细胞BmN,观察BmNPV polh蛋白的不同基因片段是否可以在感染细胞中形成多角体,并分析融合表达策略是否可以提高外源蛋白的表达水平。研究结果如下：1、在家蚕培养细胞BmN中表达不同长度的BmNPV polh基因,发现在感染细胞中不能形成多角体。这一结果与已经报道的AcMNPV 19-110 aa序列可以在被感染细胞内组装形成多角体的结论不一致,分析AcMNPV和BmNPV polh基因19-110 aa序列发现26 aa位点(AcMNPV为丙氨酸,BmNPV为半胱氨酸)和49 aa位点(AcMNPV为脯氨酸,BmNPV为亮氨酸)的差异可能对多角体的形成具有很大影响。2、利用构建的新型供体质粒,通过Bac-to-Bac表达系统构建了多种融合报告基因EGFP的重组病毒,以单独表达EGFP的病毒作为对照,通过感染家蚕培养细胞BmN发现多角体蛋白融合表达策略可以显着提高外源蛋白的表达水平。对比各种融合蛋白和EGFP对照蛋白的荧光强度,结果显示表达融合蛋白的细胞中发出荧光的细胞所占比例和绿色荧光强度都明显高于对照。SDS-PAGE和Western Blot分析表明,各种融合蛋白表达量为EGFP对照的3-5倍,分子量与预测大小一致。采用RT-PCR对mRNA水平进行对比,结果表明,各种融合蛋白中EGFP相关的mRNA水平明显高于对照EGFP的mRNA水平2-3倍,由此说明融合蛋白中启动子后多角体基因片段的插入对多角体启动子的转录水平起正调控作用。这一融合表达策略显着提高了外源蛋白的表达水平。本研究结果对于提高家蚕杆状病毒表达系统的工作效率、提升家蚕作为生物反应器的产业化应用具有很好的参考价值和指导意义。(本文来源于《浙江大学》期刊2009-06-01）
邱亚峰,葛菲菲,曹瑞兵,周斌,马志永[2]（2009）在《含MDV gB CTL表位与鸡HSP108融和蛋白基因的构建及原核表达》一文中研究指出【目的】为新型马立克氏病(MD)疫苗的开发奠定基础。【方法】以SPF鸡肝脏中提取RNA为模板,利用RT-PCR反应扩增鸡HSP108基因;利用PCR方法扩增MDV gB CTL表位基因,并将MDV gB CTL表位基因与鸡HSP108融合在一起,构建融合蛋白基因rgBHSP108,将该融合蛋白基因克隆入原核表达载体pET-28a中,构建重组表达载体pET-gBHSP108,将该重组载体转化E.coliBL21(DE3),并用IPTG诱导融合蛋白rgBHSP108的表达,对rgBHSP108进行SDS-PAGE电泳、可溶性分析、蛋白纯化及Western-blot分析。【结果】扩增到鸡2.4kb的HSP108基因和330bp的MDV gB CTL表位基因;克隆的鸡HSP108基因序列与GenBank上发表的鸡输卵管HSP108(NM204289)和来源于肝脏HSP108(AF387865)核苷酸的同源性分别为99.7%和99.0%。rgBHSP108融合蛋白基因构建成功;融合蛋白rgBHSP108以包涵体的形式获得高效表达并纯化。Western-blot分析表明,针对MDV gB CTL表位的多抗可以与融合蛋白发生特异性反应。【结论】成功构建了鸡HSP108融合蛋白基因,利用原核表达系统成功表达rgBHSP108。(本文来源于《西北农林科技大学学报(自然科学版)》期刊2009年05期）
邱亚峰,葛菲菲,曹瑞兵,周斌,马志永[3]（2008）在《含MDV gB CTL表位与鸡HSP108融和蛋白基因的合成及原核表达》一文中研究指出为了进行新型MD疫苗的开发,开展了融合蛋白基因合成的工作。利用RT-PCR从鸡肝脏中,扩增出约2.4ku的鸡HSP108基因,测序比较发现该基因的序列与GenB ank上发表的序列的同源性约为99%。在体外,将MDV gB CTL表位与鸡HSP108融合在一起,构建融合蛋白基因gBHSP108,将该融合蛋白基因克隆入原核表达载体pET-28a中,构建重组表达载体pET-gBHSP108,将该重组载体转化E.coli BL21,经1.0mmol/LIPTG诱导,SDS-PAGE分析发现,外源基因以包涵体的形式获得高效表达。将包涵体溶解于8mol/L的尿素中,利用His·Bind试剂盒获得纯化的蛋白。Western blot分析表明,针对MDV gB CTL表位的多抗可以与融合蛋白发生特异性的反应,说明该融合蛋白获得了成功表达。本研究为下一步探讨该融合蛋白的免疫学作用以及该融合蛋白基因的真核表达奠定基础。(本文来源于《中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会论文集》期刊2008-07-01）
Mattia,Cecchinato,Elena,Catelli,Caterina,Lupini,Enrico,Ricchizzi,Luigi,Sperati,Ruffoni[4]（2007）在《意大利禽肺炎病毒分离株的融和(F)蛋白和附着(G)蛋白基因序列分析》一文中研究指出在意大利禽肺疫病毒(AMPV)感染的报道从1987年第一次报道到现在一直都有。B 型病毒在不同的地域都有发现,但最近 A 型病毒也被捡出。为了确定意大利 AMPV 株的同源性和异源性,对选择基因的(本文来源于《第15届世界禽病大会、中国畜牧兽医学会2007年学术年会论文集》期刊2007-09-01）
融和基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
【目的】为新型马立克氏病(MD)疫苗的开发奠定基础。【方法】以SPF鸡肝脏中提取RNA为模板,利用RT-PCR反应扩增鸡HSP108基因;利用PCR方法扩增MDV gB CTL表位基因,并将MDV gB CTL表位基因与鸡HSP108融合在一起,构建融合蛋白基因rgBHSP108,将该融合蛋白基因克隆入原核表达载体pET-28a中,构建重组表达载体pET-gBHSP108,将该重组载体转化E.coliBL21(DE3),并用IPTG诱导融合蛋白rgBHSP108的表达,对rgBHSP108进行SDS-PAGE电泳、可溶性分析、蛋白纯化及Western-blot分析。【结果】扩增到鸡2.4kb的HSP108基因和330bp的MDV gB CTL表位基因;克隆的鸡HSP108基因序列与GenBank上发表的鸡输卵管HSP108(NM204289)和来源于肝脏HSP108(AF387865)核苷酸的同源性分别为99.7%和99.0%。rgBHSP108融合蛋白基因构建成功;融合蛋白rgBHSP108以包涵体的形式获得高效表达并纯化。Western-blot分析表明,针对MDV gB CTL表位的多抗可以与融合蛋白发生特异性反应。【结论】成功构建了鸡HSP108融合蛋白基因,利用原核表达系统成功表达rgBHSP108。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
融和基因论文参考文献
[1].郭爱芹.家蚕杆状病毒多角体基因与外源目的基因融和表达的研究[D].浙江大学.2009
[2].邱亚峰,葛菲菲,曹瑞兵,周斌,马志永.含MDVgBCTL表位与鸡HSP108融和蛋白基因的构建及原核表达[J].西北农林科技大学学报(自然科学版).2009
[3].邱亚峰,葛菲菲,曹瑞兵,周斌,马志永.含MDVgBCTL表位与鸡HSP108融和蛋白基因的合成及原核表达[C].中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会论文集.2008
[4].Mattia,Cecchinato,Elena,Catelli,Caterina,Lupini,Enrico,Ricchizzi,Luigi,Sperati,Ruffoni.意大利禽肺炎病毒分离株的融和(F)蛋白和附着(G)蛋白基因序列分析[C].第15届世界禽病大会、中国畜牧兽医学会2007年学术年会论文集.2007
论文知识图
