论文摘要
目的:比较同源肿瘤细胞来源的不同单克隆表型差异。方法:采用极限稀释法,在悬浮培养条件下获取HCT116结肠癌细胞系的单个细胞,对每孔含单个的细胞进行扩增培养,获得子代单克隆,并以同样方法继续挑取单克隆,连续获得子三代克隆。根据单克隆形态特点,选取第三代的三株代表性的单克隆,采用Western blot和免疫荧光法比较其SOX2、EpCAM和Vimentin蛋白表达差异。采用放疗观察三株单克隆的Vimentin蛋白的动态变化,研究其放疗干预的时间异质性,Transwell体外侵袭实验比较克隆侵袭力的差异。结果:三株由单细胞扩增培养的同源第三代子克隆依然存在明显生物学差异。形态有明显区别的球形与不规则的克隆形态。不规则形态克隆更表现为SOX2低表达及Vimentin的高表达。并且在单个细胞水平上,同个单克隆群体内也存在个体细胞间蛋白的表达差异(Vimentin; EpCAM)。通过观察放疗前后Vimentin蛋白在不同时间点上的荧光强度,发现肿瘤单克隆细胞存在时间异质性。Transwell体外侵袭实验也显示三个同源克隆间存在明显的差异性。结论:同源的、连续单细胞扩增获得的第三代单克隆依然存在明显生物学差异,提示肿瘤内部异质性是其固有特征,并且在治疗干预下,也会引起肿瘤时间异质性的产生。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 罗云桃,王一玮,贺思佳,赵明慧,赵煜翠,黄倩
关键词: 肿瘤异质性,单克隆,同源
来源: 现代生物医学进展 2019年23期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技
专业: 肿瘤学
单位: 上海交通大学第一人民医院肿瘤中心分子诊断科,上海交通大学医学院
基金: 国家自然科学基金项目（NSFC81572951,NSFC81120108017）
分类号: R73-3
DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2019.23.001
页码: 4401-4406
总页数: 6
文件大小: 2083K
下载量: 39
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