溶菌酶释放蛋白基因论文_汪涛,汤自豪,周小鸥,余辉,周英棠

导读:本文包含了溶菌酶释放蛋白基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,溶菌酶,猪链球菌,基因,论文,腺病毒,MRP。

溶菌酶释放蛋白基因论文文献综述

汪涛,汤自豪,周小鸥,余辉,周英棠^[1]（2013）在《含猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白基因片段的重组腺病毒构建与鉴定》一文中研究指出目的构建猪链球菌2型(SS2)溶菌酶释放蛋白(MRP)基因片段的重组腺病毒并对其进行鉴定。方法根据MRP的基因序列,设计合成1对引物,以SS2型基因组为模板,扩增MRP基因片段(467-1351)序列。将PCR产物通过pMD18-T载体克隆后,再连接至腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV中构建重组穿梭质粒pShuttle-CMV-MRP,再经PmeⅠ酶切,然后转化至含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183-AD-1感受态细胞中,经同源重组获得重组腺病毒质粒pAdeno-CMV-MRP。PacⅠ酶切线性化该重组腺病毒质粒,再转染AD-293细胞进行病毒包装,最后对细胞包装的病毒液进行PCR和Western blot法鉴定。结果重组腺病毒质粒pAdeno-CMV-MRP转染AD-293细胞8 d后出现明显的细胞病变,在培养细胞的上清病毒液中也检测到了MRP基因片段及其表达的蛋白。结论成功构建了SS2型MRP基因片段的重组腺病毒(rAdeno-MRP)。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2013年04期）

王海丽,王长军,陆承平,潘秀珍,唐家琪^[2]（2006）在《猪链球菌2型人源分离株截短的溶菌酶释放蛋白基因的克隆及原核表达》一文中研究指出目的:克隆及表达猪链球菌2型(S.suis2)人源分离株Habb截短溶菌酶释放蛋白(MRP)基因。方法:根据S.suis2mrp基因的序列设计引物,克隆和分析江苏海安患者分离株Habb截短mrp基因(tmrp),构建原核表达质粒pGEX4T-2-mrp。在大肠杆菌中诱导带有谷胱甘肽转移酶(GST)标签的融合蛋白tMRP-GST表达;经亲和层析法纯化后,用凝血酶酶切去除重组蛋白中的GST,制备纯化的截短MRP(tMRP)抗原。用Westernblot检测重组抗原的活性。结果:序列分析表明,获得的tmrp基因长957bp;原核表达的融合蛋白tMRP-GST的相对分子质量(Mr)约61000;凝血酶处理的tMRP抗原的Mr约为35000。Westernblot分析显示,MRP-GST、tMRP蛋白均可与MRP多克隆抗血清发生特异性反应。结论:成功地克隆人源分离株Habb截短的mrp基因,并在原核系统实现高效表达,制备的纯化抗原tMRP具有良好的抗原性,为开展相关免疫学研究奠定了基础。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2006年02期）

欧瑜,陆承平^[3]（2002）在《猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白基因片段的克隆与表达》一文中研究指出根据猪链球菌2型（Streptococcus suis type 2）溶菌酶释放蛋白（muramidase-released protein,MRP）基因序列,设计和合成一对引物,以猪链球菌2型江苏分离株HA9801的基因组DNA为模板,通过PCR技术,扩增mrp基因304～1168bp序列,并按正确的阅读框架定向克隆到表达载体pGEX-6P-1中谷胱甘肽转移酶（GST）基因的下游;将重组质粒转化入大肠杆菌BL21株,经IPTG诱导,可表达分子量约为57kD的融合蛋白。用MRP抗血清进行的免疫转印分析表明,表达的融合蛋白可被MRP抗血清识别,该融合蛋白具有MRP的抗原表位,为进一步研究MRP的结构和功能奠定了基础。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2002年01期）

溶菌酶释放蛋白基因论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

目的:克隆及表达猪链球菌2型(S.suis2)人源分离株Habb截短溶菌酶释放蛋白(MRP)基因。方法:根据S.suis2mrp基因的序列设计引物,克隆和分析江苏海安患者分离株Habb截短mrp基因(tmrp),构建原核表达质粒pGEX4T-2-mrp。在大肠杆菌中诱导带有谷胱甘肽转移酶(GST)标签的融合蛋白tMRP-GST表达;经亲和层析法纯化后,用凝血酶酶切去除重组蛋白中的GST,制备纯化的截短MRP(tMRP)抗原。用Westernblot检测重组抗原的活性。结果:序列分析表明,获得的tmrp基因长957bp;原核表达的融合蛋白tMRP-GST的相对分子质量(Mr)约61000;凝血酶处理的tMRP抗原的Mr约为35000。Westernblot分析显示,MRP-GST、tMRP蛋白均可与MRP多克隆抗血清发生特异性反应。结论:成功地克隆人源分离株Habb截短的mrp基因,并在原核系统实现高效表达,制备的纯化抗原tMRP具有良好的抗原性,为开展相关免疫学研究奠定了基础。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。