导读:本文包含了牛结核论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:结核病,结核,变态反应,干扰素,分枝,杆菌,蛋白。
牛结核论文文献综述
杨艳丽,张齐,张星星,许龙,黄新[1]（2019）在《抗牛结核分枝杆菌VHH抗体T7噬菌体库的构建与筛选》一文中研究指出为获得抗牛结核分枝杆菌的VHH纳米抗体,本研究利用牛结核分枝杆菌Ag85B蛋白免疫双峰驼,免疫效价达到1∶8 000后采外周血分离淋巴细胞,提取RNA反转录成cDNA,利用巢式PCR方法扩增出编码单域抗体VHH的400 bp基因片段。将目的片段用限制性内切酶EcoRⅠ和HindⅢ双酶切,与T7噬菌体载体臂T7Select 10-3RI Arms连接,再通过体外重新包装含目的片段的噬菌体。对建立的VHH噬菌体抗体库进行鉴定,原始文库库容为5.7×10~8 PFU,库阳性率为85.7%。通过4轮生物亲和淘选,筛选并表达出2株高特异性的VHH抗体,均对牛结核分枝杆菌Ag85B蛋白具有特异性。本研究为进一步探讨VHH抗体在牛结核病的诊断和治疗奠定了基础。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2019年10期）
杨显超[2]（2019）在《牛结核γ-干扰素ELISPOT检测方法建立》一文中研究指出研究通过制备牛外周血单核细胞,并对检测技术各因素优化和准确性进行验证,建立了牛结核γ-干扰素ELISPOT检测方法,同时形成该平台相应的操作规范。结果表明,在细胞数量为1.25×105个,牛单核细胞培养时间24 h,植物血凝素的浓度为200μg/mL的条件下,该牛结核γ-干扰素ELISPOT检测体系较为稳定,为后续研究者基于ELISPOT技术建立更多稳定的检测体系提供了重要理论依据。(本文来源于《畜牧兽医科学(电子版)》期刊2019年18期）
孙明军,王萍,张喜悦,孙翔翔,孙世雄[3]（2019）在《荧光原位杂交在布鲁氏菌和牛结核分枝杆菌检测中的应用》一文中研究指出荧光原位杂交技术可快速鉴定病原菌,较传统病原分离鉴定方法具有明显优势。针对我国动物布鲁氏菌病和牛结核病这两个重要的人兽共患病,目前还没有标准的荧光原位杂交检测方法可供参考。为建立布鲁氏菌和牛结核分枝杆菌荧光原位杂交检测方法,快速诊断动物布鲁氏菌病和牛结核病,利用布鲁氏菌探针Bru-996和结核分枝杆菌探针MTB770,通过优化杂交温度、杂交时间和样品处理等关键条件,确定最佳检测程序;根据已知背景的菌株和临床样品,对Bru-996和MTB770探针的特异性和敏感性进行评价,最终建立了荧光复位杂交诊断方法。结果显示:反应条件优化后,该方法可在4 h内完成布鲁氏菌检测;荧光标记Bru-996探针与布鲁氏菌待检菌株的杂交结果均为阳性,而与结核分枝杆菌、禽结核分枝杆菌和大肠杆菌杂交结果均为阴性,并从5个已知背景的组织病料中成功检出布鲁氏菌。牛结核分枝杆菌检测则需要6～8 h,杂交前必须对样品用二甲苯和溶菌酶进行处理;MTB770探针可特异性识别并能从牛肺部结节中检出牛结核分枝杆菌。结果表明,荧光原位杂交方法快速、简便,而且Bru-996和MTB770探针分别在布鲁氏菌和牛结核分枝杆菌检测上具有较高的特异性,可替代传统的病原分离鉴定,作为动物布鲁氏菌病和牛结核病的实验室确诊方法。(本文来源于《中国动物检疫》期刊2019年09期）
布日额,陈金龙,叶俊,吴金花,锡林高娃[4]（2019）在《牛结核分枝杆菌早期标识性分泌性蛋白MPB70、MPB83基因的串联表达及其抗原性鉴定》一文中研究指出为获得一种具有抗原性的牛结核分枝杆菌(MB)感染早期标识物MPB70、MPB83分泌性蛋白的串联抗原蛋白,本研究利用DNAStar生物信息软件对MB感染早期标识性分泌性蛋白MPB70、MPB83抗原结构区域进行预测后设计合成相应引物,并在两个片段之间引入16位柔性多肽,通过重迭延伸PCR技术获得MBP70与MBP83基因的抗原优势区核苷酸串联片段,将其连接至原核表达载体pGEX-6p-1中经诱导、表达,结果显示构建的重组表达载体获得高效表达,目的抗原蛋白的分子质量约58 ku,纯化后重组蛋白的纯度>90%,经免疫BALB/c小鼠4次后,抗体效价达到1∶51 200。本实验获得了具有明显抗原活性的MB感染早期分泌性蛋白串联抗原MPB70+MPB83,为后续进一步研发MB早期感染标识物快速检测试剂盒奠定了基础。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2019年06期）
杨莉,刘心,彭清洁,李庆妮,陈颖钰[5]（2019）在《牛结核γ-干扰素检测法和比较皮内变态反应在牛临床检测中应用》一文中研究指出我国已启动牛结核病净化计划和评估论证工作。有效诊断是有效实施牛结核病"检疫-扑杀"控制策略的前提。牛结核γ-干扰素检测法是国际公认的确诊方法。本研究进行不同方法的临床比对试验,旨在指导临床有效选择和应用牛结核检测的不同方法。使用牛结核菌素比较皮内变态反应(CCT)与牛结核γ-干扰素检测法对某奶牛场200头奶牛实施平行检测,γ-干扰素检测法同时采用了国产试剂盒(KIT1)与进口试剂盒(KIT2)。结果显示:CCT与KIT2具有中等一致性(Kappa值为0.5),但特异性较差(66.4%),阳性预测值低(54.0%),易出现假阳性结果导致大量的错杀。γ-干扰素检测试剂盒KIT1与KIT2具有较好的一致性(Kappa值为0.9),总符合率95.0%,表明二者均能有效检测牛结核,且国产试剂盒能显着降低检测成本。在控制成本的前提下,建议用皮试先初筛,γ-干扰素检测法确诊阳性牛。(本文来源于《中国奶牛》期刊2019年05期）
袁溶英[6]（2019）在《靖边县牛结核情况调查及防控》一文中研究指出牛结核是由牛分支杆菌和结核病分支杆菌引发的一种慢性消耗性人兽共患病,被我国列为二类动物疫病,其临床上看不到典型症状和病变。在我国牛结核检出阳性率最高可达60%以上,这不仅对畜牧业造成巨大的经济损失,还威胁着人类的健康。靖边县是个农业大县,养牛产业已成为靖边县经济发展的重要支柱,为保障畜牧业发展和人民的健康,本文利用PPD皮内变态反应法对靖边县6个乡镇牛结核情况进行监测,并通过现场调查、查阅相关资料等为靖边县制定牛结核防控方案,获得如下结果:(1)2015年-2017年牛结核个体阳性率分别为0.41%、0.55%、0.57%,个体阳性率呈现逐渐上升的趋势。6个乡镇2015年的牛结核阳性率从0.25%-1.30%不等,2016年牛结核阳性率0.38%-1.70%不等,2017年牛结核阳性率从0.42%-1.28%不等,相同地区不同年份的牛结核个体阳性率不同,同一年份不同地区牛结核个体阳性率也各不相同。(2)养殖规模达200头以上的牛结核病阳性率为0.33%,100~200头的阳性率为0.56%,10~100头的阳性率为0.63%,10头以下的阳性率为1.19%,牛结核个体阳性率随养殖规模的增大而逐渐降低(3)0~1岁的牛结核病阳性率为0.30%,1~3岁的阳性率为0.54%,3~6岁的阳性率为0.66%,6岁以上的阳性率为0.95%,牛结核个体阳性率随畜龄的增大而逐渐增高。(4)实施防控措施一年后,对靖边县6个乡镇进行全群检测,实施防控措施的3个乡镇平均阳性率下降了83.72%,未实施防控措施的3个乡镇平均阳性率下降了1.78%,防控达到了一定的效果。综上所述,靖边县牛结核阳性率随着年份、规模形式、年龄的不同而变化着,为靖边县牛结合制定的防控措施也达到了一定的效果,这为靖边县今后牛结核病的防控提供了有效参考。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2019-05-01）
姜秀云,董阳,包艳红,张建宁,方诗文[7]（2019）在《牛结核杆菌MPB70-ESAT-6融合蛋白的原核表达及抗原反应性分析》一文中研究指出为增强单个蛋白的抗原性,利用(Gly4Ser)3柔性连接肽将牛结核杆菌MPB70和ESAT-6融合。采用重迭延伸PCR技术将牛结核杆菌mpb70与esat-6基因连接,获得融合基因mpb70-esat-6,连接至T-Vector pMD19中,获得克隆质粒pMD-70-esat-6。经Bam HⅠ、EcoRⅠ酶切、纯化,并与p ET28a(+)载体连接,构建了pET-70-esat-6重组表达质粒。SDS-PAGE发现,在27.2 ku处表达了融合蛋白MPB70-ESAT-6,Western blotting证实,MPB70-ESAT-6与牛结核阳性血清反应性良好。MPB70-ESAT-6融合蛋白的研究为牛结核病诊断抗原及相关疫苗研究奠定了基础。(本文来源于《中国兽药杂志》期刊2019年03期）
谷晨晨[8]（2018）在《鹿源牛结核分枝杆菌ESAT-6、Ag85b蛋白的表达与纯化及抗原特异性研究》一文中研究指出结核病是在全球范围内广泛传播的一种慢性、消耗性人畜共患传染病。鹿结核病主要由牛型结核分枝杆菌和人型结核分枝杆菌引起,不仅给养鹿业造成严重损失,同时也是人结核病的主要传染源。目前皮内结核菌素(PPD)试验是诊断动物结核病的主要方法。但是鹿在接种卡介苗(BCG)后,PPD试验反应的特异性受到严重干扰,无法将BCG接种鹿与野毒株感染鹿区分开来。迄今为止,尚无有效的方法确诊野毒感染鹿结核病。研究表明,ESAT-6是结核病强毒株特有的特异性抗原,可用作自然感染鹿结核病的诊断抗原。Ag85是结核分枝杆菌最主要的分泌蛋白,有较好的抗原性。因此,本研究旨在通过表达纯化出ESAT-6和Ag85b,制备成能有效鉴别野毒感染与疫苗接种鹿的抗原,进而建立起快速检测鹿结核病的早期诊断方法。利用由结核病鹿肺组织中分离鉴定出的牛结核分枝杆菌染色体为模板,分别克隆出ESAT-6和Ag85b基因,将两种基因分别连接到pNC-HisE载体,构建出ESAT6-pNC-HisE和Ag85b-pNC-HisE表达载体。表达载体转化到枯草芽孢杆菌感受态细胞,通过新霉素抗性平板筛选,以及PCR和限制性内切酶酶切鉴定,成功研制出表达ESAT-6和Ag85b的枯草芽孢杆菌工程菌株。将枯草芽孢杆菌工程菌株接种于新霉素抗性培养基中,应用枯草杆菌表达系统,分泌性表达目标蛋白,分别利用ESAT-6和Ag85b单抗,采用Western Blot方法检测,证明成功表达出ESAT-6和Ag85b。取枯草芽孢杆菌工程菌培养物上清,经超滤粗分离后,应用AKTA蛋白纯化系统,利用镍琼脂糖凝胶FF柱,对上清中带有His标签的目标蛋白进行分离纯化。纯化产物通过SDS-PAGE分析和Western Blot鉴定,表明已分别纯化出ESAT-6和Ag85b。应用斑点杂交方法,利用鹿结核病、鹿副结核病、鹿坏死杆菌病、鹿布氏杆菌病、鹿大肠杆菌病、鹿魏氏梭菌病的阳性血清,对纯化出的ESAT-6和Ag85b的抗原特异性进行评价,实验结果表明,ESAT-6和Ag85b均有较好的鹿结核病特异性,可作为鹿结核病的诊断抗原开发利用。本项研究成功研制出能够表达ESAT-6和Ag85b的枯草芽孢杆菌工程菌株,表达并纯化出了有较好特异性的ESAT-6和Ag85b,为区分卡介苗免疫和自然感染鹿结核病及鹿结核病早期诊断方法的建立提供技术支持。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2018-06-01）
赵燕娟,王刚,索朗斯珠[9]（2018）在《藏区牛结核分枝杆菌病流行病学调查与分析》一文中研究指出为了解牛结核病在各藏区牛群中感染和流行情况,于2016~2017年期间分别从甘肃省、青海省、西藏自治区、四川省等4个省藏区随机采集牛血清1252头份,采用ELISA法进行抗体检测。结果显示:四大藏区中只有四川省的藏区血清抗体为阳性,抗体阳性率为4.8%,其他叁个藏区的牛血清抗体均为阴性,阳性率为0,四大藏区牛结核病总抗体阳性率达0.8%。统计数据表明四大藏区牛群中结核病的免疫效果很差,提示四大藏区应该注意加强疫苗的免疫接种工作。(本文来源于《高原农业》期刊2018年02期）
孙涛[10]（2017）在《天津市牛结核分枝杆菌γ-干扰素检测与皮内变态反应比对试验》一文中研究指出皮内变态反应是我国标准规定的牛结核病检测方法,而γ-干扰素检检测试验是Ol E规定的国际贸易指定使用的检测方法,为了验证此方法在实际工作中的检测效果,我市分别对静海区、武清区皮内变态反应试验阳性牛和宝坻区待检牛进行了检测比对试验。1牛结核分枝杆菌皮内变态反应试验1.1试验材料(1)实验动物来自宝坻、静海、武清叁个地区的239头牛。其中静海区的1个农场23头牛和武清区的2个农场(本文来源于《畜牧兽医科技信息》期刊2017年12期）
牛结核论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
研究通过制备牛外周血单核细胞,并对检测技术各因素优化和准确性进行验证,建立了牛结核γ-干扰素ELISPOT检测方法,同时形成该平台相应的操作规范。结果表明,在细胞数量为1.25×105个,牛单核细胞培养时间24 h,植物血凝素的浓度为200μg/mL的条件下,该牛结核γ-干扰素ELISPOT检测体系较为稳定,为后续研究者基于ELISPOT技术建立更多稳定的检测体系提供了重要理论依据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
牛结核论文参考文献
[1].杨艳丽,张齐,张星星,许龙,黄新.抗牛结核分枝杆菌VHH抗体T7噬菌体库的构建与筛选[J].中国兽医学报.2019
[2].杨显超.牛结核γ-干扰素ELISPOT检测方法建立[J].畜牧兽医科学(电子版).2019
[3].孙明军,王萍,张喜悦,孙翔翔,孙世雄.荧光原位杂交在布鲁氏菌和牛结核分枝杆菌检测中的应用[J].中国动物检疫.2019
[4].布日额,陈金龙,叶俊,吴金花,锡林高娃.牛结核分枝杆菌早期标识性分泌性蛋白MPB70、MPB83基因的串联表达及其抗原性鉴定[J].中国预防兽医学报.2019
[5].杨莉,刘心,彭清洁,李庆妮,陈颖钰.牛结核γ-干扰素检测法和比较皮内变态反应在牛临床检测中应用[J].中国奶牛.2019
[6].袁溶英.靖边县牛结核情况调查及防控[D].西北农林科技大学.2019
[7].姜秀云,董阳,包艳红,张建宁,方诗文.牛结核杆菌MPB70-ESAT-6融合蛋白的原核表达及抗原反应性分析[J].中国兽药杂志.2019
[8].谷晨晨.鹿源牛结核分枝杆菌ESAT-6、Ag85b蛋白的表达与纯化及抗原特异性研究[D].中国农业科学院.2018
[9].赵燕娟,王刚,索朗斯珠.藏区牛结核分枝杆菌病流行病学调查与分析[J].高原农业.2018
[10].孙涛.天津市牛结核分枝杆菌γ-干扰素检测与皮内变态反应比对试验[J].畜牧兽医科技信息.2017
论文知识图
