基于HAND系统5种致腹泻大肠杆菌多重实时PCR初筛方法的建立

基于HAND系统5种致腹泻大肠杆菌多重实时PCR初筛方法的建立

论文摘要

以实验室17株种属关系较近的菌株进行特异性评价,通过溶解曲线Tm值对扩增产物进行分析表明,该方法具有高特异性,可同时检出5种致泻性大肠杆菌EAEC(aggR)、EHEC/EPEC (eae)、ETEC (LT)和EIEC(ipaH)的相关毒力基因。粪便模拟样本试验表明,其敏感性达10~4~10~6 CFU/mL。建立的多重实时PCR检测方法适用于5种致泻性大肠杆菌的初步筛选。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •     1.1.1 引物
  •     1.1.2 试剂
  •     1.1.3 仪器与设备
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 细菌培养
  •     1.2.2 DNA模板制备
  •     1.2.3 单重实时PCR的建立
  •     1.2.4 多重实时PCR建立
  •     1.2.5 多重PCR的特异性
  •     1.2.6 多重实时PCR的重复性、稳定性
  •     1.2.7 粪便模拟样本检测
  •   1.3 数据处理
  • 2 结果与分析
  •   2.1 加尾引物单重荧光PCR的建立
  •   2.2 多重实时PCR的建立
  •     2.2.1 普通引物
  •     2.2.2 加尾引物
  •   2.3 多重实时PCR的特异性
  •   2.4 多重实时PCR的重复性、稳定性
  •   2.5 粪便模拟样本检测
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 钟宜科,王永霞,赵彤,贺晓明,郭建树,刘威,邹大阳

    关键词: 致泻性大肠杆菌,多重实时,一管化

    来源: 食品与机械 2019年10期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 河北工程大学生命科学与食品工程学院,中国人民解放军疾病预防控制中心

    基金: 国家科技重大专项(编号:2018ZX10713-003),河北省邯郸市科技攻关项目(编号:1722201063-3)

    分类号: TS207.4

    DOI: 10.13652/j.issn.1003-5788.2019.10.009

    页码: 46-51

    总页数: 6

    文件大小: 2024K

    下载量: 102

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