宿主miRNA-2127靶向p53促进禽流感病毒H9N2亚型体外复制的分子机制

宿主miRNA-2127靶向p53促进禽流感病毒H9N2亚型体外复制的分子机制

论文摘要

为研究鸡体内miRNA-2127对低致病性禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)H9N2复制的影响,本研究将化学合成的gga-miR-2127模拟物和抑制剂分别转染DF-1细胞,接种H9N2亚型病毒,检测细胞中病毒含量变化,发现gga-miR-2127能够显著促进病毒的复制。为探索其中的分子机制,用生物信息学软件预测gga-miR-2127的调控位点位于p53基因mRNA的3′UTR区,并用双荧光素酶报告系统对其靶向关系进行了验证。荧光定量RT-PCR法和Western blot试验表明,gga-miR-2127过表达时p53的mRNA水平不变而p53蛋白表达水平降低,细胞天然免疫机能下降。据此推测gga-miR-2127促进H9N2复制的分子作用机理是在p53基因的mRNA转录后,通过gga-miR-2127与其mRNA的3′UTR区结合,抑制p53蛋白的翻译从而抑制抗病毒作用和细胞的天然免疫机能。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 毒株和试剂
  •   1.2 gga-miR-2127对H9N2病毒复制的影响试验
  •   1.3 gga-miR-2127调控H9N2病毒复制的分子机制分析
  •     1.3.1 gga-miR-2127靶基因预测与验证
  •     1.3.2 gga-miR-2127分别对p53在基因水平和蛋白水平上表达的影响检测
  •     1.3.3 gga-miR-2127对多种细胞因子、炎性因子及抗病毒天然免疫基因表达的影响检测
  • 2 结果与分析
  •   2.1 gga-miR-2127对H9N2病毒复制的影响
  •   2.2 gga-miR-2127靶基因的生物信息预测及靶向功能验证
  •   2.3 H9N2感染对p53活性的影响
  •   2.4 gga-miR-2127对多种细胞因子的影响
  • 3 讨论与结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张玉霞,袁小远,杨金兴,孟凯

    关键词: 亚型禽流感病毒,分子机制

    来源: 山东农业科学 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 山东省农业科学院家禽研究所

    基金: 山东省自然科学基金项目(ZR2017BC039),山东省重点研发计划项目(2018GSF121012),山东省重点实验室专项建设计划项目(SDKL201810),山东省农业科学院家禽研究所学科团队建设项目(CXGC2018E11)

    分类号: S852.65

    DOI: 10.14083/j.issn.1001-4942.2019.12.019

    页码: 91-95

    总页数: 5

    文件大小: 504K

    下载量: 84

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