反复冻融次数和不同保存温度对伪狂犬病毒的神经环路标记效果的影响

反复冻融次数和不同保存温度对伪狂犬病毒的神经环路标记效果的影响

论文摘要

伪狂犬病毒(pseudorabies virus, PRV)是常用于神经环路示踪研究的嗜神经病毒工具之一,然而目前缺乏PRV的保存条件对其感染滴度以及在体神经环路示踪效果影响的研究.首先,将2 h内在-80℃及室温下同一批次的PRV分别进行1~4次冻融,利用噬斑法在BHK-21细胞上检测其滴度,研究结果显示1~3次冻融对PRV的滴度改变无显著影响,而第4次冻融使PRV病毒的滴度显著下降.其次,从-80℃冰箱中取出同一批次的两份PRV,将其冻融1次,分别在-80℃和-20℃保存两周后,利用噬斑法在BHK-21细胞上检测其滴度;同时,将两份PRV利用在体立体定位分别注射于小鼠齿状回(dentate gyrus, DG)区,取相同的感染时间点,对DG输入环路标记效果进行分析,研究得出不同温度下长期保存对PRV的滴度及标记效果有较大影响.该研究结果对于PRV病毒的保存及其在神经环路标记中的应用具有一定的参考意义.

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 试验用动物
  •     1.1.2 细胞与病毒
  •     1.1.3 试剂和溶液
  •     1.1.4 仪器设备
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 探究PRV冻融次数病毒的制备
  •     1.2.2 探究保存温度病毒的制备
  •     1.2.3 噬斑实验
  •     1.2.4 动物手术操作及样品制备
  •       1) 病毒痕量注射:
  •       2) 小鼠脑片制备:
  •       3) 成像及数据分析:
  • 2 结果
  •   2.1 一定时间内不同冻融次数对PRV病毒滴度的影响
  •   2.2 不同保存温度对同一批PRV病毒滴度的影响
  •   2.3 不同保存温度对同一批PRV病毒标记神经网络效果的影响
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张紫薇,夏金金,刘静,曾俊杰,朱续涛,贾凡,张志建,曾燕

    关键词: 伪狂犬病毒,病毒滴度,反复冻融,保存温度

    来源: 华中师范大学学报(自然科学版) 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技,医药卫生科技

    专业: 生物学,畜牧与动物医学,神经病学

    单位: 华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院病理科,武汉科技大学医学院脑与认知功能研究所,中国科学院武汉物理与数学研究所脑科学中心

    基金: 国家自然科学基金项目(81571095)

    分类号: S852.655;R741.02

    DOI: 10.19603/j.cnki.1000-1190.2019.06.020

    页码: 949-955

    总页数: 7

    文件大小: 1233K

    下载量: 64

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