果蔬和谷物制品中多菌灵的免疫检测

果蔬和谷物制品中多菌灵的免疫检测

论文摘要

基于多菌灵多克隆抗体,建立快速、高效、灵敏的直接竞争酶联免疫吸附测定(CD-ELISA)方法检测果蔬和谷物中的多菌灵残留,对反应条件进行优化,绘制CD-ELISA标准曲线.以橙子、橙汁、黄瓜、小麦和香菇为检测材料,经酸化乙腈(醋酸和乙腈体积比为1∶99)提取,提取液用PBSB缓冲液稀释20倍即可用于CD-ELISA方法检测.分别利用CD-ELISA法和高效液相色谱法对香菇和小麦进行检测,比较二者的检测结果.利用CD-ELISA法对橙子、橙汁、黄瓜、小麦和香菇的30个样品进行多菌灵残留检测.结果表明:优化反应条件并消除基质影响后,CD-ELISA校正曲线的检测限为(0.30±0.15)μg/L,灵敏度为(2.70±0.30)μg/L.采用有机试剂提取和PSA净化的简单前处理后,用CD-ELISA法检测5种果蔬和谷物样品中的多菌灵含量,其添加回收率为84.3%~112.7%,变异系数小于12.3%.CD-ELISA法对香菇和小麦的多菌灵检测结果与高效液相色谱法的检测结果呈线性正相关,相关系数为0.993 3.30个样品CD-ELISA检测结果显示,多菌灵检出率为30%,超标率为3.33%.这些结果表明,构建的CD-ELISA法具有较高的灵敏度、精密度及准确度,可以作为快速检测食品中多菌灵残留的方法.

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 仪器和试剂
  •   1.2 多菌灵CD-ELISA方法的建立
  •     1.2.1 酶标抗原稀释倍数的优化
  •     1.2.2 抗体包被量的优化
  •     1.2.3 缓冲液条件的优化
  •     1.2.4 多菌灵CD-ELISA方法的建立
  •   1.3 抗体特异性的评估
  •   1.4 消除基质影响
  •   1.5 CD-ELISA方法评估的样品准备
  •   1.6 样品前处理和高效液相色谱检测
  •     1.6.1 CD-ELISA检测的样品处理
  •     1.6.2 高效液相色谱检测的样品处理
  •     1.6.3 高效液相色谱的检测条件
  •   1.7 添加回收实验和实际样品检测
  • 2 结果与分析
  •   2.1 CD-ELISA法的建立
  •   2.2 抗体特异性的评价
  •   2.3 CD-ELISA的校正曲线及基质曲线
  •   2.4 CD-ELISA法各项指标的评估
  •     2.4.1 检测限和灵敏度
  •     2.4.2 添加回收实验
  •     2.4.3 高效液相色谱法与CD-ELISA法的对照
  •   2.5 实际样品检测结果
  • 3 结语
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 柳双,谢春花,王敏思,张志军,宋洋

    关键词: 酶联免疫吸附测定,多菌灵,免疫检测

    来源: 天津师范大学学报(自然科学版) 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 天津师范大学生命科学学院,天津师范大学天津市动植物抗性重点实验室,国家农产品保鲜工程技术研究中心(天津)天津市农产品采后生理与贮藏保鲜重点实验室

    基金: 国家自然科学青年基金资助项目(31301487),天津市科技计划资助项目(13JCQNJC14800,17ZXBFNC00060)

    分类号: TS207.3

    DOI: 10.19638/j.issn1671-1114.20190607

    页码: 35-40+61

    总页数: 7

    文件大小: 281K

    下载量: 109

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