导读:本文包含了伴胞晶体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:苏云金芽胞杆菌,微胶囊,Cry8Ca2晶体,Cry1Ac晶体
伴胞晶体论文文献综述
贺晓琳[1]（2016）在《苏云金芽胞杆菌伴胞晶体的微胶囊制备》一文中研究指出苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)能够产生具有杀虫活性的伴胞晶体,该类伴胞晶体对系列靶标昆虫幼虫具有特异性的杀虫活性,而对脊椎动物和植物无害,是一类环境友好型生物杀虫剂,在植物保护领域占有相当大的比重。然而,高温、干燥、紫外辐射等外界不良环境都有可能导致伴胞晶体的杀虫活性降低甚至失活,影响其商业应用。为了增强伴胞晶体对环境的抵抗力,延长杀虫持效期,多种Bt剂型相继发展。基于此,本研究进行了一种新的伴胞晶体微胶囊剂型的研究。分别以苏云金芽胞杆菌Cry8Ca2球形晶体和Cry1Ac菱形晶体为核心,以壳聚糖、海藻酸钠和羧甲基纤维素钠等生物聚合物材料为壁材,通过层层自组装技术成功制备新型晶体微胶囊。扫描电镜显示,Cry8Ca2晶体微胶囊尺寸约为0.6?0.8μm,Cry1Ac晶体微胶囊尺寸约为0.6?1.2μm,均适合喷洒与昆虫饲喂。Cry1Ac晶体微胶囊能够在与靶标昆虫中肠相似的pH 9.0以上的环境中大量释放晶体蛋白,而在水环境中保持对伴胞晶体的稳定包封,延长了杀虫持效期。Cry8Ca2晶体微胶囊能够在pH 10.2的碱性环境大量释放晶体蛋白,说明微胶囊的控释pH因其内部包裹的晶体种类不同而有所不同。杀虫活性测定表明,Cry1Ac晶体微胶囊剂型与Cry1Ac晶体芽胞混合物具有基本相同的杀虫活性,且应用的生物材料对幼虫无毒副作用。对环境的抵抗力研究表明,晶体微胶囊能够抵抗高温、紫外和干燥环境,提高囊内伴胞晶体杀虫活性的稳定性。本研究中直接以伴胞晶体为核心制备的微胶囊在一定程度上降低了微胶囊的制作成本,同时使用的壁材均为价格低廉的具有生物相容性和生物可降解性的生物聚合物材料。这是一种保护Bt晶体蛋白的新方法,为提高Bt的应用稳定性提出新的解决策略,并奠定了良好的实验基础。(本文来源于《北京理工大学》期刊2016-01-05）
孔芳,高勇,朱霁晖,薛正莲,杨超英[2]（2014）在《苏云金芽孢杆菌伴胞晶体产生菌BZ-1的分离筛选及鉴定》一文中研究指出目的从被污染的蝴蝶兰初代培养基中分离筛选苏云金芽孢杆菌伴胞晶体产生菌,并进行鉴定。方法分离自被污染的蝴蝶兰初代培养基的苏云金芽孢杆菌经富集后,筛选伴胞晶体产生菌BZ-1,显微镜观察进行鉴定;采用PCR法分析菌株BZ-1的16S rDNA和脂肽抗生素合成相关基因,SDS-PAGE分析菌株的伴胞晶体;制备菌株发酵粗提液,提取活性物质,分别置于不同温度(50、60、80、100℃)30 min、用不同的蛋白酶(蛋白酶K、胰蛋白酶)于37℃处理30 min,以枯草芽孢杆菌作为指示菌检测菌株的抑菌活性;并检测菌株对小菜蛾的毒力。结果菌株BZ-1能产生芽孢,并在芽孢旁形成多个无规则伴胞晶体;该菌株的16S rDNA扩增产物测序结果经与GenBank中登录的16S rDNA核苷酸序列进行BLAST比对,与B.anthracis str.Ames(NR_074453)、B.cereus(NR_074540)和B.thuringiensis Bt407(NR_102506)菌株相似度达99%,表明菌株BZ-1属于芽孢杆菌属,结合扫描电镜观察结果,可初步确定该菌株为苏云金芽孢杆菌;该菌株可扩增出脂肽抗生素合成相关基因sfp、mycB、ituA、fenB;该菌株从培养2 d芽孢形成后开始分泌相对分子质量约130 000的晶体蛋白,4 d时蛋白表达量增加,6 d后蛋白表达量基本达到稳定;该菌株具有一定的热稳定性,对蛋白酶K具有一定的耐受性;该菌株于30℃培养6 d,对小菜蛾表现出较高的毒力。结论从被污染的蝴蝶兰初代培养基中分离筛选的苏云金芽孢杆菌伴胞晶体产生菌BZ-1所产的抗菌物质主要抑制革兰阳性细菌,具有较高的毒力,可作为原始菌株发酵进行田间生物防治,也可为构建杀虫基因工程菌以及培育抗虫转基因植物提供高毒力的候选基因,具有较好的应用前景。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2014年09期）
石磊[3]（2012）在《苏云金芽孢杆菌的伴胞晶体形成过程分析》一文中研究指出通过对苏云金芽孢杆菌的伴胞晶体的染色形成过程的观察,分析其形成的影响因子,掌握伴胞晶体形成和积累的因素。(本文来源于《陕西农业科学》期刊2012年04期）
叶晓波[4]（2011）在《钙粘蛋白CDH-8是伴胞晶体Cry5Ba在秀丽小杆线虫中的潜在受体》一文中研究指出根结线虫(Root-Knot Nematode, RKN)已经成为植物的一类重要病原物,根结线虫病害已经造成了巨大的农业经济损失。苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)伴随芽胞形产成会生对昆虫具有特异毒性的杀虫晶体蛋白(Insecticidal Crystal Proteins, ICPs),其中晶体蛋白Cry5Ba对南方根结线虫具有很高的杀虫活性。目前,关于苏云金芽胞杆菌晶体蛋白对昆虫的毒杀机制研究的较多并且非常透彻,但是对于其杀线虫机制的研究较少,具体的毒杀机制也不是很透彻。由于根结线虫是植物专性寄生线虫,二龄后的生活周期都在植物的根内部,且生活周期长,不利于研究工作的展开。秀丽小杆线虫(Caenorhabditis elegans)是生物学研究的理想材料,且具有结构简单、生长周期短、饲养简单、繁殖快等众多优点,且已经完成了全基因组测序,目前已经成为一种理想的模式生物。因此,本研究中以秀丽小杆线虫为材料研究Cry5Ba杀线虫机制的研究,这可以为Bt对根结线虫的生物防治提供重要的理论指导,因此我们展开了如下的研究：1.根据已报道的以穿孔机制杀虫的Bt晶体蛋白Cry1,Cry3等具有5个保守区,能形成3个结构域,通过序列比对发现Cry5Ba也具有4个保守区,且已预测出其空间结构具3个经典结构域；在本室的其他研究中发现Cry5Ba在秀丽小杆线虫体内形成寡聚体；秀丽小杆线虫存在着一个庞大的钙粘蛋白超家族(Cadherin Superfamily),包含13种不同的钙粘蛋白,本研究通过信息学比较和分析,发现秀丽小杆线虫中的钙粘蛋白CDH-8, CDH-7与昆虫中的钙粘蛋白受体进化地位最近,而且具有一定的序列相似性,且cdh-8和cdh-7是线虫所特有的。综上所述,推测CDH-8和CDH-7可能是Cry5Ba在C.elegans中的受体。2.Cry5Ba对C. elegans cdh-8突变体RB815 LCso的生物测定实验结果表明RB815对Cry5Ba产生了非常明显的抗性。3.关于昆虫钙粘蛋白毒素结合区的报道主要集中在CR7-MPED,通过比对发现CDH-8的CR7-MPED与昆虫的昆虫钙粘蛋白毒素结合区具有较高的同源性。因此选择对CDH-8的CR7-MPED区域进行分段克隆,设计叁对特异性引物进行CDH-8的CR7-MPED分段克隆,得到了以下3个片段的编码序列：CR7、CR9-CR10和CR10-MPED,通过表达纯化得到相应多肽。4.通过Ligand blot实验,发现CR7、CR9-CR10和CR10-MPED均能与Cry5Ba结合。5.通过竞争性结合实验,发现只有CR9-CR10能与Cry5Ba专一性结合,进一步说明CDH-8可能是Cry5Ba的受体。这些研究为研究苏云金芽胞杆菌晶体蛋白杀线虫机制提供了重要的实验材料。若实验最终证实CDH-8是Cry5Ba在线虫体内的受体,将进一步丰富苏云金芽胞杆菌晶体蛋白杀线虫机制的研究,也将为植物寄生线虫的生物防治提供理论基础。(本文来源于《华中农业大学》期刊2011-06-01）
刘刚[5]（2009）在《湖南师大“苏云金芽胞杆菌杀虫伴胞晶体蛋白质组学研究”取得重要成果》一文中研究指出近期,湖南师范大学丁学知教授主持的2006年湖南省自然科学基金重点项目"苏云金芽胞杆菌杀虫伴胞晶体蛋白质组学研究"顺利通过了验收并被评为优秀项目。苏云金芽胞杆菌(Bt)是一种对多种农业害虫具有毒杀作用的微生物杀虫剂,具有杀虫高效、对人类和其它生物安全的特点,其杀虫活性成份主要是伴胞晶体蛋白。利(本文来源于《农药市场信息》期刊2009年12期）
吴峰[6]（2009）在《苏云金芽胞杆菌4.0718菌株伴胞晶体中20kb DNA基因文库的构建和同源性分析》一文中研究指出苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)在芽胞形成过程中能产生对目标害虫具有特异性毒杀作用的伴胞晶体。研究表明伴胞晶体中存在与原毒素相互作用的20kb DNA片段,该片段对晶体的形成及杀虫晶体蛋白在敏感害虫体内的激活过程具有重要的作用。但是,与毒素蛋白结合的20kb DNA的序列信息仍未得到阐明。本论文旨在利用基因文库的技术手段,挖掘20kb DNA更多的序列信息,进一步对Bt野生菌株晶体中DNA的序列与来源进行研究,为探讨晶体中原毒素与20 kb DNA的结合机制以及20kb DNA的功能提供基础。在本研究中,以本室选育的Bt野生菌株4.0718为材料,提取与晶体蛋白Cry1Ac相结合的20kb DNA,以其Sau3AI部分酶切片段为供体、pbluescriptⅡ(SK+)为载体构建基因文库。基因文库建立后,通过检验文库的随机性、插入片段的平均长度、载体自连率等对文库质量进行鉴定。根据部分阳性转化子的测序结果,运用NCBI的BLASTn工具,通过网络数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/)进行比对,根据NCBI输出的比对结果分析Bt基因组和20kb DNA之间的同源性。比对结果发现20kb DNA中存在来源于Bt染色体的基因,如16S rRNA基因、23S rRNA基因、编码RNA聚合酶亚单位的基因ropB,编码金属氨肽酶的基因pepQ编码细菌毒力因子硫酸透明质酸酶的基因sulP,以及编码与转座相关的解离酶基因tnpR。同源性分析结果证明,Bt染色体上的基因参与20kb DNA的序列构成,即20kb DNA来源于宿主菌的染色体。研究结果证实了20kb DNA来源于Bt染色体,并新发现了来自染色体的基因。本研究为进一步阐明Bt伴胞晶体中20kb DNA分子的来源、结构、功能及其与原毒素的相互作用机制奠定了重要基础。(本文来源于《湖南师范大学》期刊2009-05-01）
余子全,王乾兰,刘斌,邹雪,喻子牛[7]（2007）在《苏云金芽胞杆菌伴胞晶体蛋白对植物寄生线虫生物测定方法的建立和高毒力菌株的筛选》一文中研究指出建立了一套苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)伴胞晶体蛋白对植物寄生线虫的生物测定方法。利用该方法筛选出了10株对植物寄生线虫有毒力的菌株。SDS-PAGE显示这些菌株的伴胞晶体蛋白组成具有特异性和多样性。选取其中的1株高毒力菌株YBT-021,测定了对几种植物寄生线虫的毒力,其半致死浓度(LC50)分别为:北方根结线虫(Meloidogyne hapla)35.62μg/mL,斯氏短体线虫(Pratylenchus scribneri)75.65μg/mL,苎麻(Boehmeria nivea)上的一矮化线虫群体(Tylenchorhynchus sp.)94.31μg/mL和腐烂茎线虫(Ditylenchus destructor)215.21μg/mL。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2007年05期）
余子全,白培胜,郭素霞,喻子牛,孙明[8]（2007）在《苏云金芽胞杆菌杀线虫伴胞晶体蛋白基因cry6Aa的克隆与表达》一文中研究指出通过对晶体蛋白N-末端氨基酸测序,设计简并探针,从对根结线虫高毒力苏云金芽胞杆菌YBT-1518菌株中克隆到1个含有杀线虫晶体蛋白基因的片段。序列测定表明该序列含有两个ORF(orf1和orf2),其中orf1与基因cry6Aa1同源性为98%,已在GenBank上登录(Acc.NO.AF499736),并被命名为cry6Aa2。将克隆的该片段克隆到穿梭载体pHT304上,并转化苏云金芽胞杆菌无晶体突变株BMB171,重组菌株可形成米粒状伴胞晶体。生物测定表明,表达的毒素蛋白对北方根结线虫的LC50为9.47μg/mL,毒力与出发菌株(10.74μg/mL)相当。(本文来源于《微生物学报》期刊2007年05期）
周邹,郭刚,阮丽芳,喻子牛,孙明[9]（2007）在《在许多苏云金芽胞杆菌中S-层蛋白可形成伴胞晶体》一文中研究指出S-层蛋白是形成细胞表面层 Surface-layer(简称 S-层)的组成成分,具有维持细胞形态,分子筛,以及在致病菌中作为一种毒力因子杀死免疫反应中的补体等功能。通过序列分析已经发表的 S-层蛋白基因,发现它们大多定位于染色体上,包含两个 S-层蛋白结构基因,成串排列,间距序列比较保守,大约在700bp 左右。S-层蛋白结构基因基因上游存在一个 csaAB 操纵子序列,于 S-层蛋白锚定于细胞表面起着重要作用。许多苏云金芽胞杆菌的细胞表面都具有 S-层结构。本研究筛选到一系列苏云金芽胞杆菌,在芽胞期也形成类似伴胞晶体的内涵体。通过蛋白质 N 末端测序,结果表明内涵体 N 末端氨基酸序列和 S-层蛋白表现出 90%-100%的相似性。设计了一系列引物,利用 PCR 的方法,克隆得到以上菌株的 S-层基因。并且同样包含两个 S-层蛋白结构基因,与蜡状芽胞杆菌群的 S-层蛋白基因相似性可达100%.表明在苏云金芽胞杆菌中,由 S-层形成伴胞晶体的现象不是偶然的。将处于上游位置的 S-层蛋白结构基因归为 Y 类,位于下游位置的 S-层蛋白结构基因归为 Z 类。分析结果显示 Y 类基因的序列更加趋于保守,在进化树上亲源关系较近;Z 类基因的序列在进化树上亲源关系较远。推测这两个 S-层蛋白结构基因在形成表面 S-层和内涵体的过程中可能分别扮演着不同的角色。(本文来源于《“环境与健康”学术研讨会论文摘要集》期刊2007-10-01）
罗朝辉,夏立秋,丁学知,王海龙,曾智[10]（2007）在《苏云金芽孢杆菌伴胞晶体蛋白提取方法比较研究》一文中研究指出采用液体双相分层法和等电点沉淀法提取苏云金芽孢杆菌伴胞晶体蛋白.原子力显微镜观测,发现液体双相分层提取的晶体蛋白具有完整典型的晶体结构;等电点法提取的得率高,不能检测到完整的晶体结构.聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,等电点法提取的蛋白质含量是液体双相法提取的蛋白含量的1~2倍.将2种方法提取的晶体蛋白对初孵棉铃虫幼虫生物测定均表现杀虫生物活性,经统计分析,液体双相法提取的蛋白质生测毒力比等电点法的高1.5~3倍.(本文来源于《湖南师范大学自然科学学报》期刊2007年03期）
伴胞晶体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的从被污染的蝴蝶兰初代培养基中分离筛选苏云金芽孢杆菌伴胞晶体产生菌,并进行鉴定。方法分离自被污染的蝴蝶兰初代培养基的苏云金芽孢杆菌经富集后,筛选伴胞晶体产生菌BZ-1,显微镜观察进行鉴定;采用PCR法分析菌株BZ-1的16S rDNA和脂肽抗生素合成相关基因,SDS-PAGE分析菌株的伴胞晶体;制备菌株发酵粗提液,提取活性物质,分别置于不同温度(50、60、80、100℃)30 min、用不同的蛋白酶(蛋白酶K、胰蛋白酶)于37℃处理30 min,以枯草芽孢杆菌作为指示菌检测菌株的抑菌活性;并检测菌株对小菜蛾的毒力。结果菌株BZ-1能产生芽孢,并在芽孢旁形成多个无规则伴胞晶体;该菌株的16S rDNA扩增产物测序结果经与GenBank中登录的16S rDNA核苷酸序列进行BLAST比对,与B.anthracis str.Ames(NR_074453)、B.cereus(NR_074540)和B.thuringiensis Bt407(NR_102506)菌株相似度达99%,表明菌株BZ-1属于芽孢杆菌属,结合扫描电镜观察结果,可初步确定该菌株为苏云金芽孢杆菌;该菌株可扩增出脂肽抗生素合成相关基因sfp、mycB、ituA、fenB;该菌株从培养2 d芽孢形成后开始分泌相对分子质量约130 000的晶体蛋白,4 d时蛋白表达量增加,6 d后蛋白表达量基本达到稳定;该菌株具有一定的热稳定性,对蛋白酶K具有一定的耐受性;该菌株于30℃培养6 d,对小菜蛾表现出较高的毒力。结论从被污染的蝴蝶兰初代培养基中分离筛选的苏云金芽孢杆菌伴胞晶体产生菌BZ-1所产的抗菌物质主要抑制革兰阳性细菌,具有较高的毒力,可作为原始菌株发酵进行田间生物防治,也可为构建杀虫基因工程菌以及培育抗虫转基因植物提供高毒力的候选基因,具有较好的应用前景。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
伴胞晶体论文参考文献
[1].贺晓琳.苏云金芽胞杆菌伴胞晶体的微胶囊制备[D].北京理工大学.2016
[2].孔芳,高勇,朱霁晖,薛正莲,杨超英.苏云金芽孢杆菌伴胞晶体产生菌BZ-1的分离筛选及鉴定[J].中国生物制品学杂志.2014
[3].石磊.苏云金芽孢杆菌的伴胞晶体形成过程分析[J].陕西农业科学.2012
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[7].余子全,王乾兰,刘斌,邹雪,喻子牛.苏云金芽胞杆菌伴胞晶体蛋白对植物寄生线虫生物测定方法的建立和高毒力菌株的筛选[J].农业生物技术学报.2007
[8].余子全,白培胜,郭素霞,喻子牛,孙明.苏云金芽胞杆菌杀线虫伴胞晶体蛋白基因cry6Aa的克隆与表达[J].微生物学报.2007
[9].周邹,郭刚,阮丽芳,喻子牛,孙明.在许多苏云金芽胞杆菌中S-层蛋白可形成伴胞晶体[C].“环境与健康”学术研讨会论文摘要集.2007
[10].罗朝辉,夏立秋,丁学知,王海龙,曾智.苏云金芽孢杆菌伴胞晶体蛋白提取方法比较研究[J].湖南师范大学自然科学学报.2007