曲格列汀诱导高糖条件下肾系膜细胞表达HO-1

曲格列汀诱导高糖条件下肾系膜细胞表达HO-1

论文摘要

目的:观察曲格列汀在高糖条件下对人肾系膜细胞(HRMCs)表达血红素氧合酶1(HO-1)的影响,并初步探讨其分子机制。方法:在正常浓度(5 mmol/L)葡萄糖及高糖(25 mmol/L)条件下培养HRMCs,分别加入1、5和10μmol/L曲格列汀作用8~24 h。随后用RT-qPCR以及Western blot分别检测HO-1的mRNA和蛋白表达,比色法测定HO-1酶活性。此外,采用荧光探针检测细胞内活性氧簇(ROS)的变化,Western blot检测Akt磷酸化水平和核转录因子E2相关因子2(Nrf2)的表达水平。结果:高糖条件下HRMCs中HO-1的表达以及酶活性水平轻微增高,而经1、5和10μmol/L曲格列汀作用后,HO-1的mRNA、蛋白表达以及酶活性显著增高(P<0.05);同时,曲格列汀也能增加高糖条件下HRMCs的ROS水平并诱导Akt磷酸化,采用ROS清除剂NAC以及PI3K/Akt抑制剂LY294002处理后,HO-1的表达水平明显降低;此外,曲格列汀也可增强HRMCs核内转录因子Nrf2的表达,且NAC和LY294002能抑制曲格列汀诱导的Nrf2的表达。而沉默Nrf2后,曲格列汀诱导的HO-1表达减少。结论:曲格列汀可能能通过ROS和PI3K/Akt途径激活Nrf2而增加高糖条件下HRMCs表达HO-1。

论文目录

  • 材 料 和 方 法
  •   1 主要实验材料
  •   2 方法
  •     2.1 细胞培养与分组
  •     2.2 RT-qPCR检测HO-1 mRNA的表达
  •     2.3 Western blot分析蛋白表达
  •     2.4 HO-1活性的测定
  •     2.5 ROS生成的测定
  •     2.6 RNA干扰实验
  •   3 统计学处理
  • 结 果
  •   1 不同浓度曲格列汀对HO-1表达及酶活性的影响
  •   2 曲格列汀诱导HO-1表达与细胞内ROS有关
  •   3 曲格列汀通过PI3K/Akt通路诱导HO-1表达
  •   4 曲格列汀经ROS和PI3K/Akt激活核转录因子Nrf2
  •   5 敲减Nrf2表达后曲格列汀丧失诱导HO-1表达的效应
  • 讨 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 伍先明,李爱琼,周丽丽,彭小珊,李坚

    关键词: 曲格列汀,氧化应激,人肾系膜细胞,信号通路

    来源: 中国病理生理杂志 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 内分泌腺及全身性疾病,泌尿科学

    单位: 郴州市第一人民医院老年病科,郴州市第一人民医院儿童医院,重庆青年职业技术学院,湘南学院基础医学院

    基金: 湖南省教育厅科学研究项目(No.17C1475)

    分类号: R587.2;R692.9

    页码: 2163-2168

    总页数: 6

    文件大小: 1682K

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