熔解曲线分析论文-韦红,张阳,刘韦卓,王少华,李明虎

熔解曲线分析论文-韦红,张阳,刘韦卓,王少华,李明虎

导读:本文包含了熔解曲线分析论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:结核病,比例法药敏试验,Gene-Xpert,MTB,RiF,熔解曲线

熔解曲线分析论文文献综述

韦红,张阳,刘韦卓,王少华,李明虎[1](2019)在《Gene-Xpert MTB/RiF与熔解曲线法检测结核分枝杆菌利福平耐药分析》一文中研究指出目的评价Gene-Xpert MTB/RiF法与熔解曲线法检测结核分枝杆菌利福平耐药的不同应用价值。方法入选235例涂阳结核病患者痰标本分别做传统比例法药敏试验、Gene-Xpert MTB/RiF和熔解曲线法检测结核分枝杆菌的利福平耐药,以传统药敏试验作为金标准进行比较。结果 235例标本中比例法药敏试验利福平耐药12例(5.1%)、Gene-Xpert MTB/RiF利福平耐药例15例(6.4%)、熔解曲线法利福平耐药19例(8.1%),Gene-Xpert MTB/RiF和熔解曲线法敏感度分别为91.7%和100.0%;特异度分别为98.2%和96.7%。结论Gene-Xpert MTB/RiF和熔解曲线法两者均可应用于结核分枝杆菌利福平耐药性的快速检测,Gene-Xpert MTB/RiF法在我国开展结核菌耐多药筛查具更有较强的实用性,有更广的应用前景。(本文来源于《河南预防医学杂志》期刊2019年12期)

胡晓艳,吴宇亮,李科铮,钟宇萍,徐颂周[2](2019)在《基于探针熔解曲线分析技术的非缺失型地中海贫血基因检测方法的建立》一文中研究指出目的结合多重不对称PCR技术和荧光探针熔解曲线法,建立一种快速、准确、简便的非缺失型地中海贫血基因检测方法。方法设计针对9个常见非缺失型地中海贫血基因位点(α~(WS)α、α~(QS)α、α~(CS)α、β~(IVSⅡ654)、β~(CD-17)、β~(-28)、β~(CD41-42)、β~(CD-71-72)、β~(CD-26))的引物对、荧光探针以及对应等位基因的靶序列;使用熔解曲线法验证荧光探针与对应等位基因的靶序列的工作效果,确认不同基因型的熔解温度;使用30份已知基因型别的临床样本,提取全血样本的DNA并PCR扩增其9个等位基因目标片段,利用对应荧光探针的熔解温度变化区分不同位点的基因型;收集疑似地中海贫血病例的血液样本200例,按照双盲对照实验原则,分别用反向斑点杂交法试剂盒和多重不对称PCR探针熔解曲线法对这200例样本进行基因分型检测,比较两种方法的结果是否一致,并对两种方法的优缺点进行比较。结果多重不对称PCR探针熔解曲线法可以同时对9个非缺失型地中海贫血的基因位点进行检测,并通过对应荧光探针的熔解温度的变化区分不同位点的基因型,检测结果与反向斑点杂交法相比较有相同的准确度,且有操作简便、耗时短、成本低、污染风险低等优势。结论本研究建立了一种基于多重不对称PCR探针熔解曲线的基因分型方法,并成功用于9个非缺失型地中海贫血基因位点的诊断,该方法是一种简便、快速、低成本的检测方法,在地中海贫血筛查中有较好的应用前景。(本文来源于《广东医学》期刊2019年17期)

黄秋英,夏众敏,洪国粦,李庆阁[3](2019)在《基于多色探针熔解曲线分析技术的华法林个体化用药相关基因多态性快速检测方法》一文中研究指出华法林是一种广泛使用的抗凝剂,其治疗窗口较窄,患者达到抗凝所需剂量的变异性大.已有研究表明CYP2C9*3 (rs1057910)、CYP2C9IVS3-65G>C(rs9332127)、VKORC1 c.-1639G>A (rs9923231)和CYP4F2*3 (rs2108622)的单核苷酸多态性(SNPs)是影响中国人群华法林敏感性的主要遗传因素.该研究利用多色探针熔解曲线分析(MMCA)技术,建立可同时检测4个华法林敏感性基因多态性位点的单管PCR反应体系,可在2.5h内完成检测,每个反应能检测低至0.05ng的人基因组DNA.对218份厦门市随机人群的4类SNPs进行筛查及其中40份样本测序的结果表明,MMCA体系准确性高,厦门市人群的4类SNPs发生频率与此前报道的中国汉族人群的相近,其中rs1057910的等位基因A和C的频率分别为96.4%和3.6%,rs9332127的等位基因G和C的频率分别为96.4%和3.6%,rs9923231的等位基因G和A的频率分别为7.8%和92.2%,rs2108622的等位基因G和A的频率分别为75.7%和24.3%.上述基于MMCA技术的SNP分型体系具有快速、简便、准确、低成本等优点,适合在临床上推广用于指导华法林用药剂量.(本文来源于《厦门大学学报(自然科学版)》期刊2019年06期)

倪润芳,黄秋英,钱思雨,李腾文,苏国强[4](2019)在《锁核酸修饰探针熔解曲线分析在Kras基因突变检测中的应用》一文中研究指出以探针熔解曲线技术为平台,结合锁核酸(LNA)修饰探针建立熔解曲线分析(MCA)体系(MCA-LNA体系),实现一管同时检测Kras基因中7个热点突变;并通过对探针的改良达到富集突变型的效果,使其分析灵敏度得到明显提升,达0.05%~0.5%.利用MCA-LNA体系对72份临床结直肠癌标本进行Kras突变检测,共检出24份阳性标本,与普通探针MCA体系相比多检出5份突变阳性标本,经扩增阻碍突变系统(ARMS)验证为突变型.由上述结果可见MCA-LNA体系能提高检测限和阳性标本检出率,更有利于精准基因筛查和指导靶向治疗.(本文来源于《厦门大学学报(自然科学版)》期刊2019年06期)

孙曼娜,娄季武,赵颖,付有晴,刘彦慧[5](2019)在《荧光探针熔解曲线分析法快速检测SMN1基因纯合性缺失》一文中研究指出目的建立一种快速检测SMN1基因纯合缺失的荧光探针熔解曲线分析方法。方法收集正常成人的外周血标本94份,经MLPA检测过的已知SMN1和SMN2基因拷贝数的样本238例。采用荧光探针熔解曲线分析技术,分别对SMN1基因c.840C>T和c.835-45G>A进行基因分型,根据基因分型结果判断是否存在SMN1基因exon7纯合缺失。对SMN1基因和SMN2基因拷贝数比值为2∶2、2∶0和0∶2基因型样本进行10倍梯度稀释,评估检测体系的敏感性。选取SMN1基因和SMN2基因拷贝数比值为2∶2、2∶0和0∶2基因型样本各8例,不同时间检测3次,用于评估检测体系的重复性。结果该方法可以方便地检测SMN1基因exon7纯合缺失,灵敏度至少为0.05 ng基因组DNA。应用此方法检测94例正常成人样本,未发现SMN1基因exon7纯合缺失;对238例已知基因型样本进行检测,结果显示准确率为100%。结论荧光探针熔解曲线分析方法可以快速准确检测SMN1基因exon7纯合缺失,操作简单实用,适合大规模人群筛查和产前分子诊断。(本文来源于《广东医学》期刊2019年11期)

如克亚木阿不都沙拉木,常伟,阿布都沙拉木·托合提,关文龙[6](2019)在《熔解曲线法耐药酶检测技术的临床应用分析》一文中研究指出目的评价探针熔解曲线技术检测结核杆菌耐药效果。方法利用探针熔解曲线技术对200例涂阳肺结核患者的痰标本进行异烟肼,利福平,氟喹诺酮类和氨基糖甙类耐药检测,以传统罗氏药敏试验为金标准,对探针熔解曲线技术的检测效果进行评价。结果在200例菌株中,用探针熔解曲线进行异烟肼耐药检测,与罗氏药敏的符合率为85.50%,进行利福平耐药检测,符合率为88.50%,氟喹诺酮类耐药检测符合率为90.00%,氨基糖甙类耐药检测,符合率为88.50%。(本文来源于《中华医学会结核病学分会2019年全国结核病学术大会论文汇编》期刊2019-06-12)

姚欣,黎彧利,朱艮苗[7](2019)在《高分辨率熔解曲线对痰液中结核分枝杆菌耐药性分析》一文中研究指出目的利用高分辨率熔解曲线检测痰液中结核分枝杆菌的耐药性。方法取250例肺结核患者的痰样品进行涂片镜检和琼脂平板耐药性分析,通过实时PCR对耐药基因位点进行扩增。通过熔解曲线,将rpoB基因作为利福平抗性的生物标志物,将katG基因和inhA启动子区域作为异烟肼抗性的生物标志物。比较药敏试验的结果和熔解曲线分析的结果,以评估灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值的参数。结果高分辨率熔解曲线对利福平耐药的敏感性为90.3%,特异性为90.4%,阳性预测值为84.8%,阴性预测值为94.0%。对异烟肼的耐药率为90.2%,特异性为93.9%,阳性预测值为91.1%,阴性预测值为93.3%。多药耐药结核病的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为89.9%、90.6%、78.5%和95.9%。结论高分辨率熔解曲线分析可用于痰标本中多药耐药结核的快速诊断。(本文来源于《新疆医科大学学报》期刊2019年05期)

马诗玥,廖林,何本进,林发全[8](2018)在《应用高分辨熔解曲线分析法检测遗传性球形红细胞增多症患者SLC4A1基因突变》一文中研究指出目的:探讨高分辨熔解(HRM)曲线分析法检测遗传性球形红细胞增多症(HS)患者SLC4A1基因D38A和K56E突变位点的可行性及其意义。方法:抽取23例HS患者外周血样本进行常规检测,提取基因组DNA,针对SLC4A1基因突变位点D38A和K56E设计引物,应用HRM法对所有样本进行突变分析,并通过DNA测序技术对HRM结果进行验证。结果:23例HS患者中,HRM法共检测出杂合突变型基因6例,其中包括D38A突变3例,K56E突变3例。DNA测序结果与HRM法检测结果一致。结论:应用HRM法能准确检测SLC4A1基因D38A和K56E突变位点,具有高效、快速、可靠等优点,不仅可用于临床辅助诊断,还有望成为确定HS患者基因突变谱的新方法。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2018年06期)

王霓,周世航,邵林楠,于卫建,张开立[9](2018)在《熔解曲线分析法用于RHD 1227G>A基因分型的实验研究》一文中研究指出目的建立用于RHD 1227G>A基因分型的熔解曲线分析法。方法设计合成RHD 1227G>A等位基因特异性引物和公共引物,并在2条等位基因特异性引物5'端加上不同长度的GC序列。在实时PCR反应后,进行熔解曲线分析,依据PCR产物熔解温度的差异,对RHD 1227G>A基因分型。将建立的熔解曲线分析法与常规的PCR-SSP法比较。对于2种方法检测结果不符的标本,进行RHD基因第9外显子测序,确定该标本为RHD1227G>A基因型。结果应用熔解曲(本文来源于《中国输血协会第九届输血大会论文专辑》期刊2018-11-01)

王霓,周世航,邵林楠,于卫建,张开立[10](2018)在《熔解曲线分析法用于RHD 1227G>A基因分型的实验研究》一文中研究指出目的建立用于RHD 1227G>A基因分型的熔解曲线分析法。方法设计合成RHD 1227G>A等位基因特异性引物和公共引物,并在2条等位基因特异性引物5'端加上不同长度的GC序列。在实时PCR反应后,进行熔解曲线分析,依据PCR产物熔解温度的差异,对RHD 1227G>A基因分型。将建立的熔解曲线分析法与常规的PCRSSP法比较。对于2种方法检测结果不符的标本,进行RHD基因第9外显子测序,确定该标本为RHD 1227G>A基因型。结果应用熔解曲线分析法对84例标本进行基因分型,其中RHD 1227A+/G-32例,1227A-/G+22例,1227A+/G+6例,1227A-/G-24例。发现2例标本熔解曲线法检测的基因型为1227A+/G-,而PCR-SSP法检测结果为1227A+/G+。经基因测序证实这2例标本结果是1227A+/G-。结论用于RHD 1227G>A基因分型的熔解曲线法具有操作简单、快速、准确等优点,优于常规的PCR-SSP法。(本文来源于《中国输血杂志》期刊2018年09期)

熔解曲线分析论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的结合多重不对称PCR技术和荧光探针熔解曲线法,建立一种快速、准确、简便的非缺失型地中海贫血基因检测方法。方法设计针对9个常见非缺失型地中海贫血基因位点(α~(WS)α、α~(QS)α、α~(CS)α、β~(IVSⅡ654)、β~(CD-17)、β~(-28)、β~(CD41-42)、β~(CD-71-72)、β~(CD-26))的引物对、荧光探针以及对应等位基因的靶序列;使用熔解曲线法验证荧光探针与对应等位基因的靶序列的工作效果,确认不同基因型的熔解温度;使用30份已知基因型别的临床样本,提取全血样本的DNA并PCR扩增其9个等位基因目标片段,利用对应荧光探针的熔解温度变化区分不同位点的基因型;收集疑似地中海贫血病例的血液样本200例,按照双盲对照实验原则,分别用反向斑点杂交法试剂盒和多重不对称PCR探针熔解曲线法对这200例样本进行基因分型检测,比较两种方法的结果是否一致,并对两种方法的优缺点进行比较。结果多重不对称PCR探针熔解曲线法可以同时对9个非缺失型地中海贫血的基因位点进行检测,并通过对应荧光探针的熔解温度的变化区分不同位点的基因型,检测结果与反向斑点杂交法相比较有相同的准确度,且有操作简便、耗时短、成本低、污染风险低等优势。结论本研究建立了一种基于多重不对称PCR探针熔解曲线的基因分型方法,并成功用于9个非缺失型地中海贫血基因位点的诊断,该方法是一种简便、快速、低成本的检测方法,在地中海贫血筛查中有较好的应用前景。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

熔解曲线分析论文参考文献

[1].韦红,张阳,刘韦卓,王少华,李明虎.Gene-XpertMTB/RiF与熔解曲线法检测结核分枝杆菌利福平耐药分析[J].河南预防医学杂志.2019

[2].胡晓艳,吴宇亮,李科铮,钟宇萍,徐颂周.基于探针熔解曲线分析技术的非缺失型地中海贫血基因检测方法的建立[J].广东医学.2019

[3].黄秋英,夏众敏,洪国粦,李庆阁.基于多色探针熔解曲线分析技术的华法林个体化用药相关基因多态性快速检测方法[J].厦门大学学报(自然科学版).2019

[4].倪润芳,黄秋英,钱思雨,李腾文,苏国强.锁核酸修饰探针熔解曲线分析在Kras基因突变检测中的应用[J].厦门大学学报(自然科学版).2019

[5].孙曼娜,娄季武,赵颖,付有晴,刘彦慧.荧光探针熔解曲线分析法快速检测SMN1基因纯合性缺失[J].广东医学.2019

[6].如克亚木阿不都沙拉木,常伟,阿布都沙拉木·托合提,关文龙.熔解曲线法耐药酶检测技术的临床应用分析[C].中华医学会结核病学分会2019年全国结核病学术大会论文汇编.2019

[7].姚欣,黎彧利,朱艮苗.高分辨率熔解曲线对痰液中结核分枝杆菌耐药性分析[J].新疆医科大学学报.2019

[8].马诗玥,廖林,何本进,林发全.应用高分辨熔解曲线分析法检测遗传性球形红细胞增多症患者SLC4A1基因突变[J].中国实验血液学杂志.2018

[9].王霓,周世航,邵林楠,于卫建,张开立.熔解曲线分析法用于RHD1227G>A基因分型的实验研究[C].中国输血协会第九届输血大会论文专辑.2018

[10].王霓,周世航,邵林楠,于卫建,张开立.熔解曲线分析法用于RHD1227G>A基因分型的实验研究[J].中国输血杂志.2018

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