导读:本文包含了氨基肽酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:肽酶,氨基,亮氨酸,李斯特,唾液酸,鞭毛,脯氨酸。
氨基肽酶论文文献综述
刘炎,黄耀伟[1](2019)在《猪肠道冠状病毒与入侵受体氨基肽酶N的相互作用》一文中研究指出猪肠道冠状病毒是目前危害养猪产业的重要病原。目前已发现能够感染猪肠道的致病性冠状病毒有4种:猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪丁型冠状病毒和猪肠道甲型冠状病毒。冠状病毒感染宿主的第一步是识别宿主细胞膜受体分子并与之结合,随后启动入侵及膜融合进而使病毒基因组进入宿主细胞内部。因此,冠状病毒受体是决定其宿主范围及组织嗜性的关键因素。确定冠状病毒受体及病毒与受体的结合机制对预防新发病毒及开发冠状病毒治疗性药物具有重要意义。猪传染性胃肠炎病毒利用猪氨基肽酶N(aminopeptidase N,APN)作为感染宿主的功能性受体,并利用唾液酸作为辅助结合因子。猪APN最初也被鉴定为猪流行性腹泻病毒的功能性受体,但近年的研究结果与前面的报道存在较大的差异,产生了较大的争议。最近的研究认为,猪丁型冠状病毒的功能性受体也是APN,并且猪丁型冠状病毒能够利用多个物种的APN作为功能性受体,这与其跨物种传播具有密切关系。最新发现的猪肠道甲型冠状病毒则不使用APN作为其入侵受体。本文综述了前面3种猪肠道病毒感染宿主细胞的受体及结合机制的研究进展,并比较分析了猪APN及唾液酸在不同猪肠道冠状病毒入侵宿主过程中结合方式的异同,为进一步研究新发猪肠道冠状病毒受体提供参考。(本文来源于《中国生物化学与分子生物学报》期刊2019年09期)
鲁文花[2](2019)在《弓形虫氨基肽酶N3的定位和酶动力学研究》一文中研究指出弓形虫是一种专性细胞内寄生原生动物,属于顶端复合体,可感染几乎所有.的有核细胞,引起人畜共患的弓形虫病。目前,弓形虫病尚无有效治疗药物,迫切需要找到有效的药物靶点,以开发治疗弓形虫的新型药物。氨基肽酶作为一种蛋白酶在蛋白质成熟、多肽降解和蛋白质稳定等方面起关键性作用,并作为药物靶点已在人类和动物疾病的防治上得到了广泛的研究,尤其是疟原虫病的防治已经将这些氨基肽酶联合作为有效的药物靶点,而关于弓形虫氨基肽酶的研究,非常少见。因此,本研究为氨基肽酶作为弓形虫药物靶点的研究提供理论依据,以弓形虫为研究对象,系统分析弓形虫氨基肽酶N3(TgAPN3)的亚细胞定位和生化特性。研究结果如下:通过同源性比对显示,TgAPN3的氨基酸序列与哈氏哈蒙德虫酶具有高度同一性(97%),与人源氨基肽酶N的同源性较低(24%);细胞定位分析显示TgAPN3定位于虫体的胞浆内,与致密颗粒的标志性蛋白共定位;为了分析TgAPN3的酶活性,使用大肠杆菌对重组的弓形虫氨基肽酶N3(rTgAPN3)进行了体外表达,纯化后的蛋白对H-Ala-MCA荧光底物显示出了明显的酶活性;pH的变化对TgAPN3的酶活性有明显的影响,该酶在酸性范围内显示出良好的活性,在pH为7.0时显示出了最大酶活性;不同金属离子影响TgAPN3的酶活性,与其他金属离子相比,Co2+离子对酶活性的增强效果最为明显;底物偏好性鉴定结果显示,该酶优先选择含有N-末端为Ala残基的底物,其次是Tyr和Cys;酶抑制剂的鉴定结果显示,bestatin和phebestatin显着抑制了 rTgAPN3的酶活性。因此,TgAPN3在酸性环境及金属离子Co2+作用下,以H--Ala-MCA作为底物时具有高活性。弓形虫分裂期间在致密颗粒和PV中检测到TgAPN3,表明致密颗粒蛋白成熟和分泌的潜在作用。这结果对TgAPN3的定位分析为其功能研究奠定了基础,而TgAPN3体外生化特性的鉴定为该酶作为弓形虫药物靶点的研究提供了重要的理论依据。(本文来源于《延边大学》期刊2019-05-21)
吴波[3](2019)在《不对称方酸类近红外荧光探针的设计及其在亮氨酸氨基肽酶检测中的应用》一文中研究指出不对称方酸染料在近红外区域(650-900 nm)具有优异的光学性质,但是由于它们的水溶性差,在水介质中表现出很强的聚集趋势,常常导致荧光淬灭,致使它们在生理环境下对酶的检测和成像受到限制。亮氨酸氨基肽酶(LAP)在多种病理过程中异常高水平地表达,因此实时准确地监测LAP活性和对LAP进行实时成像具有十分重要的意义。在本研究中,我们设计了一种乙二醇低聚体修饰的不对称方酸荧光探针USSQ-Leu,用来对内源性亮氨酸氨基肽酶的活性进行检测和成像。利用~1H NMR和HR-MS对USSQ-Leu的结构进行表征。通过溶解性测试考察了探针结构与溶解性之间的关系并证明了我们所设计的结构有效率地改善了探针的溶解性。通过测定探针的光谱性质和对酶的响应行为发现,USSQ-Leu具有良好的近红外吸收特性并在650 nm处有最大吸收峰,在生理条件下可与亮氨酸氨基肽酶发生反应发射出荧光并在710 nm有最大发射峰;探针对酶的响应具有时间依赖性和浓度依赖性,以及很好的检测专一性和检测灵敏度(0.61ng/mL)。利用HPLC和HR-MS验证了在LAP作用下USSQ-Leu上的L-亮氨酸基团脱落从而恢复荧光的检测机制。采用MTT法和流式细胞法研究并证实探针具有低细胞毒性和良好的细胞摄取能力。通过细胞荧光成像实验,考察并证实探针对内源性LAP的具有良好的检测能力;在异位移植瘤小鼠模型中研究了探针可以对小鼠体内的LAP的灵敏检测和成像。(本文来源于《华南理工大学》期刊2019-04-09)
张建春[4](2019)在《血清亮氨酸氨基肽酶和胃泌素-17与胃病继发骨质疏松症的关系》一文中研究指出目的探讨血清亮氨酸氨基肽酶(LAP)和胃泌素-17(G-17)与胃病继发骨质疏松症(OP)的关系。方法选择2012—2017年南京市高淳人民医院收治的310例行胃镜检查且其余检查结果完整的受检者,其中胃黏膜正常或显示轻度非萎缩性胃炎140例(正常对照组)、萎缩性胃炎108例(萎缩性胃炎组)、胃癌62例(胃癌组),另选同期在本院行胃切除手术的46例患者作为胃切除组。收集所有受检者的LAP、G-17、谷氨酰转肽酶(GGT)、血清钙检测结果,对LAP和G-17进行Pearson相关性分析。分析3组LAP、G-17异常数与OP发病率之间的关系。结果正常对照组、萎缩性胃炎组、胃癌组、胃切除组的血清钙和G-17呈逐步下降的趋势〔血清钙(mmol/L):2.26±0.30、2.20±0.24、2.02±0.20、1.82±0.22,G-17(pmol/L):10.23±3.07、7.57±2.14、3.30±1.39、0.38±0.12〕,GGT和LAP呈逐步上升趋势〔GGT(U/L):38±10、39±11、40±11、40±12,LAP(U/L):30.2±10.0、46.2±10.3、58.6±10.2、70.3±11.0〕;胃癌组和胃切除组与正常对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.05),各组间GGT比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。LAP、G-17升高例数占比与OP患病例数呈同步上升趋势。LAP与G-17呈高度负相关(r=-0.875,P<0.05)。结论随胃病严重程度的增加,血清LAP逐步升高。对于胃病患者,在排除肝脏受损情况后,LAP异常升高应考虑OP的可能。(本文来源于《实用检验医师杂志》期刊2019年01期)
王姣姣,史露露,刘美,高选[5](2019)在《唾液酸苷酶与脯氨酸氨基肽酶在细菌性阴道病中应用分析》一文中研究指出目的分析唾液酸苷酶与脯氨酸氨基肽酶在细菌性阴道病中的辅助诊断价值。方法收集2017年1月1日至11月13日因不孕不育来我院进行分泌物检查的29 279例标本,使用Nugent评分法鉴定细菌性阴道病,同时对每例标本进行唾液酸苷酶与脯氨酸氨基肽酶检测。结果 Nugent评分法鉴定出3938例BV阳性,阳性率为13.44%,在细菌性阴道病中唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶的检出率显着低于两者联合检测的检出率(P<0.05)。在细菌性阴道病中,唾液酸苷酶的敏感度、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为45.04%、99.85%、97.90%、92.12%,脯氨酸氨基肽酶的敏感度、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为30.65%、99.91%、98.20%、90.26%,唾液酸苷酶+脯氨酸氨基肽酶联合检测的敏感度、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为54.76%、99.81%、97.91%、93.42%。结论唾液酸苷酶与脯氨酸氨基肽酶对细菌性阴道病均有辅助诊断意义,且有互补作用,两者联合检测对细菌性阴道病更有诊断价值。(本文来源于《中华临床实验室管理电子杂志》期刊2019年01期)
周利平,李治锋[6](2019)在《胃切除术后骨质疏松患者亮氨酸氨基肽酶临床价值评价》一文中研究指出目的:探讨亮氨酸氨基肽酶(LAP)在胃切除术后骨质疏松患者中的临床价值。方法:选取84例胃切除术后继发骨质疏松患者为研究组,将其中行胃大部分切除术者40例设为大部切除组,行胃全切术者44例设为全切组。回顾性分析84例因胃切除手术继发骨质疏松患者的资料,收集患者初诊时血清钙(Ca2+)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)、亮氨酸氨基肽酶(LAP)检测结果,并选择同期100例正常人群作为对照组,进行统计分析。结果:研究组BGP、ALP、LAP含量明显高于对照组,Ca2+含量明显低于对照组(均为P <0. 001)。大部切除组与全切组患者比较,差异无统计学意义(均为P> 0. 05)。研究组LAP的含量与Ca2+呈显着负相关(r=-0. 783,P <0. 05)。研究组LAP、BGP的含量与ALP呈显着正相关(r=0. 682,r=0. 802,均为P <0. 05)。结论:对于胃切除术后的患者,在排除肝病等原因引起的LAP升高外,要警惕骨质疏松以及其他骨病的发生。(本文来源于《吉林医学》期刊2019年01期)
史春静,马晶,马晓霞,吕士红[7](2018)在《瑞舒伐他汀联合羟苯磺酸钙治疗老年糖尿病肾病的效果及对尿亮氨酸氨基肽酶、足细胞标志蛋白水平的影响》一文中研究指出目的探讨瑞舒伐他汀联合羟苯磺酸钙对老年糖尿病肾病的效果及对尿亮氨酸氨基肽酶(LAP)、足细胞标志蛋白(PCX)水平的影响。方法选取82例糖尿病肾病患者,根据随机数字法分为观察组和对照组,每组41例。对照组使用常规方案联合瑞舒伐他汀治疗,观察组在此基础上联合羟苯磺酸钙治疗。比较两组临床疗效、尿LAP、PCX、血糖、肾功能指标、尿蛋白指标及负面情绪生活质量的变化。结果治疗后,观察组临床总有效率显着高于对照组(P<0. 05)。观察组的尿LAP、PCX及糖化血红蛋白(HbA1c)、餐后2 h血糖(2 h BG)、空腹血糖(FPG)水平显着低于对照组(P<0. 05)。观察组的肾小球滤过率(GFR)水平显着高于对照组(P<0. 05),尿微量白蛋白(Umalb)、血肌酐(Scr)水平显着低于对照组(P<0. 05)。观察组的焦虑评分、抑郁评分显着低于对照组(P<0. 05),生活质量评分显着高于对照组(P<0. 05)。结论瑞舒伐他汀联合羟苯磺酸钙能有效降低老年糖尿病肾病患者尿LAP、PCX水平,临床疗效良好。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2018年23期)
李小燕,胡玉皎,程晓东[8](2018)在《血清亮氨酸氨基肽酶水平在妊娠期妇女体内的变化趋势及临床应用》一文中研究指出目的探讨血清亮氨酸氨基肽酶(LAP)水平在妊娠期妇女体内的变化趋势及临床应用。方法选取该院2016年1月至2018年4月产科门诊健康产妇2 373例及女性健康体检者605例,根据孕周分为早孕组(<13周),中孕组(13~28周),晚孕组(>28周),分析各组LAP血清水平。对妊娠10周以上产妇不同妊娠时间的LAP水平进行分析。另外,根据年龄分为适龄组(<30岁),中龄组(30~35岁),高龄组(>35岁),合并成新的分组:早孕适龄组、早孕中龄组、早孕高龄组、中孕适龄组、中孕中龄组、中孕高龄组、晚孕适龄组、晚孕中龄组、晚孕高龄组。将健康体检者根据年龄分为未孕适龄组(<30岁)、未孕中龄组(30~35岁)、未孕高龄组(>35岁)。对上述各组LAP水平进行分析。结果血清LAP检测水平由高到低依次为晚孕组、中孕组、早孕组、未孕组,且中孕到晚孕阶段,血清LAP检测水平明显升高。妊娠10周以上产妇LAP血清检测水平中位数在27周明显升高,在37周达到最高峰,而后下降到较高水平。9个分组间LAP水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。LAP水平与年龄无关,与妊娠周数相关。结论在妊娠期妇女LAP血清检测水平的动态检测具有重要意义。(本文来源于《现代医药卫生》期刊2018年17期)
郑君,曹世诺,张朝霞,贾洪林[9](2018)在《弓形虫氨基肽酶的协同作用及功能性特征》一文中研究指出近年来,氨基肽酶作为一种有效的药物靶位已经在很多抗寄生虫药物的研究中得到了应用,其中,M1、M17以及M18家族的天冬氨酰氨基肽酶就作为理想的药物靶点应用到了抗疟原虫的药物研究中。弓形虫与疟原虫同属于顶复门原虫,在弓形虫的基因组中存在着10个氨基肽酶的同源编码基因,这些基因在(本文来源于《第十一届全国寄生虫学青年工作者学术研讨会摘要集》期刊2018-08-10)
王航[10](2018)在《单增李斯特菌氨基肽酶Lmo1711以及鞭毛结构蛋白FlhB的生物学功能研究》一文中研究指出单核细胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)为革兰氏阳性菌胞内寄生菌,广泛存在于生鲜食品和环境中。单增李斯特菌可穿过肠屏障,通过血流传播并到达肝脏,脾脏,中枢神经系统和胎儿,最终引起人败血症、脑炎、脑膜炎和胃肠炎及孕妇流产,死亡率可达30%,是最严重的人类食源性感染之一。单增李斯特菌在感染过程中,需要表达多种毒力蛋白来完成对宿主细胞的感染。单增李斯特菌将毒力因子分泌到胞外,需要不同的分泌系统参与,目前已知主要是Sec分泌系统和Tat分泌系统承担分泌功能,而鞭毛分泌系统是否也参与了特殊因子的分泌目前还未有报道。因此,本研究主要阐明了:1.单增李斯特菌氨基肽酶Lmo1711的体外酶学功能及其在细菌感染过程中的生物学作用。2.单增李斯特菌鞭毛结构元件FlhB的生物学功能。1.单增李斯特菌氨基肽酶Lmo1711的酶学特征与参与细菌感染我们通过生物信息学分析预测Lmo1711属于氨基肽酶M29家族,氨基肽酶II型,可以水解氨基酸N端残基对蛋白进行修饰。酶活分析显示,Lmo1711具有较强的氨基肽酶活性,针对不同底物的结合和催化能力差异较大。在单肽对硝基苯胺底物中,Lmo1711与亮氨酸对硝基苯胺(Leu-pNA)、精氨酸对硝基苯胺(Arg-pNA)和赖氨酸对硝基苯胺(Lys-pNA)反应对应的K_(cat)/K_m分别为3.149×10~5min~(-1)M~(-1)、1.536×10~5min~(-1)M~(-1)和1.035×10~4min~(-1)M~(-1),由此可见Lmo1711对Leu-pNA的催化效率最高,即对亮氨酸残基的亲和程度最高;对多肽对硝基苯胺切割能力较弱。Lmo1711氨基肽酶活性具有金属离子依赖性,Co~(2+)、Cd~(2+)、Zn~(2+)等多种金属离子均能显着增强其活性,其中Co~(2+)的激活效应最显着。酶学分析表明,Lmo1711保守的关键氨基酸活性位点(Glu250、Glu316、His345、Tyr352、His378、Asp380)决定了Lmo1711的催化活性。生物学功能研究发现,缺失lmo1711后细菌生长能力不受影响,但缺失株感染Caco-2细胞后其侵袭和增殖能力显着低于野生株。此外,缺失该基因后细菌在L929细胞中的迁移能力亦显着降低。本研究首次发现并证实,单增李斯特菌Lmo1711属于M29氨基肽酶家族成员,具有较强的催化活性,且对金属离子具有不同程度的依赖性,并且在一定程度上参与了细菌在细胞中的感染。2.单增李斯特菌鞭毛结构元件FlhB生物学功能研究本研究发现单增李斯特菌鞭毛结构蛋白FlhB(由lmo0679基因编码)参与了细菌的鞭毛合成与运动。缺失flhB后李斯特菌不形成鞭毛,运动能力完全丧失,并导致motA、flaA、fliN、fliI、fliK、flgC等多种鞭毛相关基因的转录水平和FliM、Fli Y和Fla A等鞭毛蛋白的表达水平降低。基于细菌鞭毛与III型分泌系统的亲缘性,本研究以单增李斯特菌鞭毛结构元件FlhB为主要研究对象,进一步探索了李斯特菌鞭毛结构与蛋白分泌功能之间的关联。我们利用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantification,i TRAQ)方法分别对flhB和fliS的基因缺失株中分泌蛋白进行了差异蛋白质谱分析。iTRAQ结果显示,李斯特菌缺失flhB和fliS后大量的鞭毛与非鞭毛相关蛋白分泌量下降。具体来看,在37℃条件下,缺失flhB后有38种蛋白分泌量上调,39种蛋白分泌量下调;缺失fliS后有25种蛋白分泌量上调,25种蛋白分泌量下调。在30℃条件下,缺失flhB后有29种蛋白分泌量上调,62种蛋白分泌量下调;缺失fliS后有23种蛋白分泌量上调,57种蛋白分泌量下调。可以看出,在30℃条件下,flhB和fliS缺失后下调的蛋白数量明显多于在37℃。COG(Cluster of orthologous group)功能分类显示,这些差异蛋白主要参与翻译,核糖体结构与生物发生以及糖转运与代谢等过程;GO(Gene ontology)分析鉴定发现,差异蛋白主要是细胞组分(27.74%),巨分子复合物(12.19%)和细胞器(12.01%)。经过查询Uniprot等蛋白信息网站与相关文献,我们从中选取了鞭毛钩调节蛋白FliK、鞭毛丝组件蛋白FlaA和细胞分裂调控蛋白DivIVA等李斯特菌中报道较少的蛋白进行Western blot验证。WB结果显示,在30℃条件下,flhB缺失后,DivIVA,FliK和FlaA分泌量显着下降;fliS缺失后Fli K和FlaA分泌量显着下降。其中DivIVA与细菌的分裂增殖相关。本研究首次发现并证实单增李斯特菌FlhB参与了细菌运动,鞭毛合成,鞭毛与非鞭毛蛋白分泌等过程,为进一步探索单增李斯特的非经典分泌机制与致病机制提供了初步试验基础。综上,本研究:(1)首次探索并证实了单增李斯特菌氨基肽酶Lmo1711属于金属离子依赖的M29氨基肽酶家族成员,并参与了细菌在细胞中的感染和迁移,与细菌毒力相关。研究结果对于深入完善和挖掘李斯特菌新的毒力因子及致病机制具有重要意义。(2)首次探索了单增李斯特菌鞭毛结构元件FlhB的生物学功能和介导的分泌作用,为后续进一步研究革兰氏阳性菌鞭毛T3SS及新的分泌型蛋白的生物学功能奠定了关键基础。(本文来源于《浙江农林大学》期刊2018-06-08)
氨基肽酶论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
弓形虫是一种专性细胞内寄生原生动物,属于顶端复合体,可感染几乎所有.的有核细胞,引起人畜共患的弓形虫病。目前,弓形虫病尚无有效治疗药物,迫切需要找到有效的药物靶点,以开发治疗弓形虫的新型药物。氨基肽酶作为一种蛋白酶在蛋白质成熟、多肽降解和蛋白质稳定等方面起关键性作用,并作为药物靶点已在人类和动物疾病的防治上得到了广泛的研究,尤其是疟原虫病的防治已经将这些氨基肽酶联合作为有效的药物靶点,而关于弓形虫氨基肽酶的研究,非常少见。因此,本研究为氨基肽酶作为弓形虫药物靶点的研究提供理论依据,以弓形虫为研究对象,系统分析弓形虫氨基肽酶N3(TgAPN3)的亚细胞定位和生化特性。研究结果如下:通过同源性比对显示,TgAPN3的氨基酸序列与哈氏哈蒙德虫酶具有高度同一性(97%),与人源氨基肽酶N的同源性较低(24%);细胞定位分析显示TgAPN3定位于虫体的胞浆内,与致密颗粒的标志性蛋白共定位;为了分析TgAPN3的酶活性,使用大肠杆菌对重组的弓形虫氨基肽酶N3(rTgAPN3)进行了体外表达,纯化后的蛋白对H-Ala-MCA荧光底物显示出了明显的酶活性;pH的变化对TgAPN3的酶活性有明显的影响,该酶在酸性范围内显示出良好的活性,在pH为7.0时显示出了最大酶活性;不同金属离子影响TgAPN3的酶活性,与其他金属离子相比,Co2+离子对酶活性的增强效果最为明显;底物偏好性鉴定结果显示,该酶优先选择含有N-末端为Ala残基的底物,其次是Tyr和Cys;酶抑制剂的鉴定结果显示,bestatin和phebestatin显着抑制了 rTgAPN3的酶活性。因此,TgAPN3在酸性环境及金属离子Co2+作用下,以H--Ala-MCA作为底物时具有高活性。弓形虫分裂期间在致密颗粒和PV中检测到TgAPN3,表明致密颗粒蛋白成熟和分泌的潜在作用。这结果对TgAPN3的定位分析为其功能研究奠定了基础,而TgAPN3体外生化特性的鉴定为该酶作为弓形虫药物靶点的研究提供了重要的理论依据。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
氨基肽酶论文参考文献
[1].刘炎,黄耀伟.猪肠道冠状病毒与入侵受体氨基肽酶N的相互作用[J].中国生物化学与分子生物学报.2019
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[10].王航.单增李斯特菌氨基肽酶Lmo1711以及鞭毛结构蛋白FlhB的生物学功能研究[D].浙江农林大学.2018