山西老陈醋源芽孢菌抑菌机理及对腐败菌群体感应抑制的研究

论文摘要

本研究通过对山西老陈醋分离出的具有抑菌活性芽孢菌的抑菌机理及其对病原菌产信号分子的抑制作用进行研究,并将其应用在预防鲜切苹果腐败中,结果如下:（1）对从山西老陈醋酿造过程中分离出的75株芽孢菌进行具有抑菌活性的筛选,用微量肉汤法或抑菌圈法对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和黑曲霉710的抑菌效果进行了测定,并选择对其有较高抑菌率的芽孢菌,用抑菌圈法进一步对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌进行了抑菌筛选。结果表明,75株芽孢菌中萎缩芽孢杆菌CP 297的无细胞提取液（CFE）对大肠杆菌抑菌率最高,为77.03%,并可产生18.90mm的抑菌圈;地衣芽孢杆菌CP 1671-CFE对金黄色葡萄球菌抑菌率最高,高达96.5%,抑菌圈直径为20.20mm;解淀粉芽孢杆菌CP 2014-CFE对黑曲霉710有明显的抑菌效果。（2）对山西老陈醋分离筛选出有较高抑菌率的萎缩芽孢杆菌CP 297、地衣芽孢杆菌CP 1671、解淀粉芽孢杆菌CP 2014的抑菌物进行了抑菌谱和理化性质的测定。结果表明,萎缩芽孢杆菌CP 297-CFE和地衣芽孢杆菌CP 1671-CFE不仅可以抑制革兰氏阳性菌,也可以抑制革兰氏阴性菌,对大肠杆菌、福氏志贺氏菌、沙门氏菌、肺炎克雷伯氏菌、霍氏肠杆菌、铜绿假单胞菌都有一定的抑菌效果,有较宽的抑菌谱;解淀粉芽孢杆菌CP 2014-CFE对黑曲霉、黄曲霉、毛霉、串珠镰孢菌、青霉均有明显的抑菌圈,抑菌范围较广。并且萎缩芽孢杆菌CP 297、地衣芽孢杆菌CP 1671、解淀粉芽孢杆菌CP 2014抑菌物的抑菌活性最适pH为7.08.0,在偏酸、偏碱、高温下,抑菌活性有所降低,对蛋白酶较敏感。（3）通过钾离子浓度、AKP含量、电导率、蛋白质含量、菌体形态、细胞形态等方面,来研究萎缩芽孢杆菌CP 297-CFE对大肠杆菌、地衣芽孢杆菌CP 1671-CFE对金黄色葡萄球菌、解淀粉芽孢杆菌CP 2014-CFE对黑曲霉710的抑菌机理。结果表明萎缩芽孢杆菌CP 297-CFE、地衣芽孢杆菌CP 1671-CFE分别能够破坏大肠杆菌、金黄色葡萄球菌细胞壁的完整性,并且可以改变细胞膜的通透性,从而对其起到了抑制作用;解淀粉芽孢杆菌CP 2014-CFE能够抑制黑曲霉710菌丝的生长和孢子的萌发,从而起到对黑曲霉的抑制作用。（4）通过对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、福氏志贺氏菌、沙门氏菌和单增李斯特菌的代谢粗提物进行了分析,发现5株病原菌均产cyclo-（L-Pro-L-Gly）,cyclo-（L-Pro-L-Leu）和cyclo-（L-Pro-L-Phe）3种类型的DKPs信号分子。通过研究NaCl浓度、pH值、温度、芽孢菌无细胞提取液对其产信号分子DKPs的影响,结果发现随着NaCl浓度的增加,信号分子的种类减少,各类DKPs信号分子的相对含量呈下降趋势;随着pH、温度的升高,各类信号分子的相对含量均都所升高,随后下降;芽孢菌无细胞提取液也可以抑制腐败病原菌产信号分子DKPs的能力,减少了病原菌产信号分子DKPs的种类和相对含量。（5）通过研究在不接外源腐败菌、腐败病原菌混合液和霉菌孢子悬液的不同处理下鲜切苹果的感官评价、微生物菌落数及理化指标的变化,结果发现与无菌水处理后的鲜切苹果相比,经过添加外源信号分子DKPs处理的鲜切苹果,明显加速了苹果的腐烂;而经过芽孢菌复合抑菌物（CAE）处理有一定的保鲜作用,有明显的抑菌作用,腐败菌的菌落数均有降低,说明芽孢菌CAE对鲜切苹果的腐败起到了抑制作用。

论文目录

摘要

第一章前言

1.1 山西老陈醋中芽孢菌的作用

1.1.1 山西老陈醋的简介

1.1.2 山西老陈醋的功效

1.1.3 芽孢菌在山西老陈醋中的作用

1.2 芽孢菌抑菌及抑菌机理的研究

1.2.1 芽孢菌的抑菌物

1.2.2 芽孢菌抑菌机理及应用的研究

1.3 鲜切果蔬的研究

1.3.1 鲜切果蔬的发展与趋势

1.3.2 鲜切果蔬中的微生物

1.3.3 常见的鲜切果蔬抑菌剂

1.4 细菌群体感应现象的研究

1.4.1 细菌群体感应的概念

1.4.2 细菌群体感应的信号分子

1.4.3 细菌群体感应信号分子的检测方法

1.4.4 细菌群体感应的抑制剂

1.4.5 群体感应在食品防腐保鲜上的研究进展

1.5 本课题研究意义及内容

1.5.1 研究意义

1.5.2 研究内容

第二章山西老陈醋源芽孢菌的分离鉴定及具有抑菌活性芽孢菌的筛选

2.1 试验材料与仪器

2.1.1 菌种

2.1.2 培养基

2.1.3 试剂及药品

2.1.4 主要仪器

2.2 试验方法

2.2.1 试验样品采集

2.2.2 山西老陈醋源芽孢菌的分离和初步鉴定

2.2.3 山西老陈醋源具有抑菌活性芽孢菌的筛选

2.3 结果与讨论

2.3.1 山西老陈醋源芽孢菌的分离和鉴定

2.3.2 山西老陈醋源具有抑菌活性芽孢菌的筛选

2.4 本章小结

第三章山西老陈醋源具有抑菌活性芽孢菌的抑菌谱及抑菌物的理化性质

3.1 试验材料与仪器

3.1.1 菌种

3.1.2 培养基

3.1.3 试剂及药品

3.1.4 主要仪器

3.2 试验方法

3.2.1 山西老陈醋源具有抑菌活性芽孢菌的抑菌谱

3.2.2 山西老陈醋源具有抑菌活性芽孢菌抑菌物的理化性质

3.3 结果与讨论

3.3.1 山西老陈醋源具有抑菌活性芽孢菌的抑菌谱

3.3.2 山西老陈醋中具有抑菌活性芽孢菌抑菌物的理化性质

3.4 本章小结

第四章山西老陈醋源具有抑菌活性芽孢菌抑菌物的抑菌机理

4.1 试验材料与仪器

4.1.1 菌种

4.1.2 培养基

4.1.3 试剂及药品

4.1.4 主要仪器

4.1.5 主要溶液配制

4.2 试验方法

4.2.1 芽孢菌无细胞提取浓缩液的制备

4.2.2 CP297、1671 无细胞提取液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌机理

4.2.3 CP2014 无细胞提取液对黑曲霉710 的抑菌机理

4.3 结果与讨论

4.3.1 萎缩芽孢杆菌CP297-CFE对大肠杆菌的抑菌机理

4.3.2 地衣芽孢杆菌CP1671-CFE对金黄色葡萄球菌的抑菌机理

4.3.3 解淀粉芽孢杆菌CP2014-CFE对黑曲霉710 的抑菌机理

4.4 本章小结

第五章果蔬腐败病原菌群体感应产信号分子DKPs的能力

5.1 试验材料与仪器

5.1.1 菌种

5.1.2 培养基

5.1.3 试剂及药品

5.1.4 主要仪器

5.2 试验方法

5.2.1 腐败病原菌产信号分子DKPs能力的测定

5.2.2 环境对腐败病原菌产信号分子DKPs能力的影响

5.2.3 芽孢菌CFE对腐败病原菌产信号分子DKPs的影响

5.3 结果与讨论

5.3.1 腐败病原菌产信号分子DKPs能力的测定

5.3.2 环境对病腐败菌产信号分子DKPs能力的影响

5.3.3 芽孢菌无细胞提取液对腐败病原菌产信号分子DKPs能力的影响

5.4 本章小结

第六章芽孢菌复合抑菌物在预防鲜切苹果腐败中的应用研究

6.1 试验材料与仪器

6.1.1 菌种

6.1.2 培养基

6.1.3 试剂及药品

6.1.4 主要仪器

6.1.5 主要溶液配制

6.2 试验方法

6.2.1 芽孢菌复合抑菌物的制备

6.2.2 腐败菌菌液的制备

6.2.3 芽孢菌CAE在预防鲜切苹果腐败中的应用

6.3 结果与讨论

6.3.1 芽孢菌CAE在鲜切苹果不接外源腐败菌贮藏中的应用

6.3.2 芽孢菌CAE在预防腐败病原菌混合液处理鲜切苹果腐败中的应用

6.3.3 芽孢菌CAE在预防黑曲霉孢子悬液处理后鲜切苹果腐败中的应用

6.4 本章小结

主要结论与展望

主要结论

展望

参考文献

Abstract

硕士期间发表论文

致谢

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 贾瑞娟

导师: 许女

关键词: 山西老陈醋,芽孢菌,抑菌机理,群体感应

来源: 山西农业大学

年度: 2019

分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

专业: 生物学,轻工业手工业,轻工业手工业

单位: 山西农业大学

基金: “山西省科技重大专项项目(农谷)”,项目名称“基于生物发酵技术的食醋功能产品开发”(201703D211001-06-05)

分类号: TS264.22;TS201.3

DOI: 10.27285/d.cnki.gsxnu.2019.000072

总页数: 136

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山西老陈醋源芽孢菌抑菌机理及对腐败菌群体感应抑制的研究

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