磷脂酰胆碱特异性和磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C酶学性质及其在油脂脱胶中的应用

磷脂酰胆碱特异性和磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C酶学性质及其在油脂脱胶中的应用

论文摘要

通过基因工程方法将具有磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)特异性磷脂酶C(PC-PLC)和磷脂酰肌醇(PI)特异性磷脂酶C(PI-PLC)基因分别在枯草芽孢杆菌WB800中进行胞外表达。对2种重组蛋白粗酶的酶学性质进行研究,并探究其用于油脂脱胶中的效果。结果表明:PC-PLC和PI-PLC均在30~45℃和中性偏酸的条件下具有较好的稳定性,2 h后残余活性仍在60%以上。Zn2+、Mg2+对PC-PLC的活性有促进作用,而Ca2+对PI-PLC的活性有促进作用。油脂脱胶研究结果表明,PC-PLC的最适脱胶条件为50℃、pH 6.0、反应2 h、酶添加量为80 mg/kg;PI-PLC的最适脱胶条件为45℃、pH 7.0、反应2 h、酶添加量为60 mg/kg。PC-PLC和PI-PLC联合脱胶实验中大豆毛油中磷含量从531 mg/kg降至4.1 mg/kg,此时甘油二酯(DAG)含量增加0.95%。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 菌株与质粒
  •   1.2 仪器与试剂
  •   1.3 PC、PE特异性磷脂酶C和PI特异性磷脂酶C在枯草芽孢杆菌中的克隆表达
  •   1.4 PC-PLC与PI-PLC粗酶液的制备及蛋白浓度测定
  •   1.5 PC-PLC与PI-PLC粗酶液酶学性质研究
  •     1.5.1 PC-PLC与PI-PLC的最适温度及温度稳定性
  •     1.5.2 PC-PLC与PI-PLC的最适pH及pH稳定性
  •     1.5.3 金属离子对PC-PLC与PI-PLC酶活力影响
  •   1.6 PC-PLC与PI-PLC用于大豆油酶法脱胶
  •     1.6.1 脱胶方法
  •     1.6.2 油相pH的测定
  •     1.6.3 不同脱胶条件对PC-PLC与PI-PLC脱胶效果的影响
  •     1.6.4 PC-PLC与PI-PLC联合脱胶效果的研究
  • 2 结果与讨论
  •   2.1 PC-PLC和PI-PLC在枯草芽孢杆菌中的克隆表达结果
  •   2.2 PC-PLC和PI-PLC粗酶液酶学性质研究结果
  •     2.2.1 最适温度和温度稳定性
  •     2.2.2 最适pH和pH稳定性
  •     2.2.3 金属离子对酶活力影响研究
  •   2.3 PC-PLC和PI-PLC在不同条件下脱胶效果研究
  •     2.3.1 温度对脱胶效果影响
  •     2.3.2 pH对脱胶效果影响
  •     2.3.3 酶添加量对脱胶效果影响
  •     2.3.4 反应时间对脱胶效果的影响
  •   2.4 PI-PLC与PC-PLC组合使用脱胶效果
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 邹权,陈圣,严明

    关键词: 特异性磷脂酶,酶法脱胶

    来源: 生物加工过程 2019年02期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

    专业: 生物学,一般化学工业,轻工业手工业

    单位: 南京工业大学生物与制药工程学院

    分类号: TS224;Q55

    页码: 144-151

    总页数: 8

    文件大小: 1933K

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