导读:本文包含了酵母表达文库论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:酵母,文库,橡胶树,革囊,醛酸,猪瘟,胶乳。
酵母表达文库论文文献综述
杨恩东,牛晓伟,王心宇[1]（2015）在《小繁缕酵母表达cDNA文库的构建及PG互作蛋白的获得》一文中研究指出植物-病原菌相互作用过程中,病原菌的致病因子起着重要作用。为了探寻与核盘菌致病因子多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)存在相互作用的基因,以核盘菌的非特异性寄主-油菜田间杂草小繁缕(Stellaria apetala Ucria)为试验材料,构建了核盘菌诱导的小繁缕酵母表达c DNA文库,经检测文库满足酵母双杂交的筛选,进而以PG蛋白为诱饵对文库进行筛选。阳性克隆测序后分析发现共获得7个基因,NCBI文库比对后发现同源基因为40S核糖体蛋白、26S核糖体RNA基因、真核生物延伸因子EF-1A、丙酮酸激酶、多聚泛素、葡萄糖磷酸变位酶以及跨膜蛋白的编码基因。这些相互作用靶蛋白的发现为进一步了解和防控核盘菌奠定了基础。(本文来源于《核农学报》期刊2015年09期）
陈玉明,高玉龙,张礼洲,王念,高立[2]（2014）在《鸡法氏囊B淋巴细胞cDNA酵母表达文库的构建与鉴定》一文中研究指出为了研究传染性法氏囊病病毒(IBDV)与宿主B淋巴细胞作用机制,构建鸡法氏囊B淋巴细胞酵母表达文库,试验从3周龄SPF鸡中摘取法氏囊,分离制备B淋巴细胞,从中提取细胞总RNA,使用SMART和LD-PCR技术合成双链cDNA,并进一步与线性化载体pGADT7-Rec共同转化Y187酵母感受态细胞,通过同源重组构建酵母表达文库。结果表明:所构建cDNA文库的效价为9.5×107cfu/mL,重组率为100%,可以用于酵母双杂交试验。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2014年19期）
张义,阳江华,梁启福,唐朝荣[3]（2014）在《巴西橡胶树胶乳均一化cDNA酵母表达文库的构建》一文中研究指出利用DSN(duplex-specific nuclease)技术构建胶乳均一化cDNA酵母表达文库,为大规模文库筛选实验和发掘重要的低丰度表达基因,以及研究橡胶树胶乳中蛋白质与蛋白质之间的相互作用关系奠定基础。(本文来源于《热带作物学报》期刊2014年05期）
杨子平,李辉亮,郭冬,彭世清[4]（2013）在《巴西橡胶树胶乳酵母双杂交cDNA表达文库的构建及分析》一文中研究指出提取巴西橡胶树胶乳总RNA,并纯化mRNA。采用特异引物(oligo-dT)反转出第一链DNA,经LDPCR合成第二链DNA。将ds cDNA和经SmaⅠ线性化的pGADT7-Rec质粒共转化Y187酵母菌,构建酵母双杂交cDNA表达文库。结果表明,转化单菌落个数为2.8×107;文库滴度为4.92×107·mL-1;插入片段大小主要分布于500~2 000 bp间;重组率为96%。实验数据表明该文库能满足后续的杂交筛选。(本文来源于《热带生物学报》期刊2013年04期）
张云云,周君,李晔,张春丹,蔡江佳[5]（2013）在《可口革囊星虫(Phascolosoma esculenta)酵母双杂交文库和铁结合蛋白真核表达载体的构建》一文中研究指出构建了可口革囊星虫(Phascolosoma esculenta)的酵母双杂文库,总克隆数为6.09×106CFU,重组率100%,平均插入片段长度>1kb。随机挑取200个克隆子测序,结果 1个空载,67个无法对应的基因类型,已知的132个基因中线粒体蛋白占29.54%,蚯蚓血红蛋白15.9%,核糖体蛋白10.6%,铁结合蛋白8.3%,肌动蛋白6.1%,其它基因29.56%。这些基因分别为:5-氨基乙酰丙酸合成酶、类博莱霉素水解酶、纤溶蛋白、谷氨酰胺合成酶、热休克蛋白、非特性类碱性磷酸酶、脂肪酶、金属蛋白、线粒体、硫氧还蛋白、蛋白磷酸酶、肌钙蛋白C、泛素。根据已获得的可口革囊星虫铁结合蛋白基因,以EcoRⅠ和KpnⅠ为双酶切位点设计引物,构建了可口革囊星虫铁结合蛋白真核表达载体pPink-HC-fer,经PCR及测序检验,序列完全正确,然后电转化至酵母细胞中诱导表达,经SDS-PAGE检验其融合蛋白分子量大小约为23kDa。(本文来源于《海洋与湖沼》期刊2013年06期）
廖亚金,李素,贺番,何文瑞,董泓[6]（2013）在《猪外周血单个核细胞cDNA酵母表达文库的构建及与猪瘟病毒E2蛋白相互作用细胞蛋白的筛选》一文中研究指出为研究猪瘟病毒(CSFV)蛋白与宿主细胞蛋白之间的相互作用,本研究通过SMART技术合成猪外周血单个核细胞(PBMC)双链cDNA,以携带与载体pGADT7-Rec重组位点同源序列的特异引物经long-distance PCR扩增双链cDNA。纯化双链cDNA并与载体pGADT7-Rec共转化酵母菌株Y187,经同源重组构建PBMC cDNA酵母表达文库。以CSFV E2蛋白为诱饵进行酵母双杂交筛选,得到阳性克隆根据序列比对分析结果,进一步进行共转化验证。结果显示筛选到17个与CSFV E2蛋白相互作用的宿主细胞蛋白,基因注释(GO)分析表明这些蛋白分别参与免疫、代谢、细胞生长与增殖、生物调节等过程,为研究它们与CSFV E2的相互作用奠定了基础。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2013年09期）
陈思宇[7]（2013）在《矮牵牛与烟草单重瓣相关基因的表达分析及酵母单杂交文库的建立》一文中研究指出矮牵牛,作为研究花发育的模式植物,近几年关于其花发育相关的转录因子研究多不胜数,这些花发育转录因子主要集中于MADS-box家族。拟南芥中大多数MADS-box家族基因的功能都已被揭示,尤其是C类基因AG,很早就被研究发现它的缺失表达能够造成雄蕊的瓣化,以及花器官分生组织的无限增生,最终在植物花上表现出重瓣的表型。在矮牵牛中,我们同样发现它的C类基因PMADS3干涉载体的转化可以使野生烟草花获得重瓣表型。为了探索PMADS3基因调控花单重瓣发育的具体途径,我们以实验室姐妹交保存的自然界的单重瓣矮牵牛和野生型烟草、转基因的重瓣烟草作为材料,分别利用基因芯片、抑制消减杂交以及实时定量PCR这叁种技术筛选鉴定了这两类植株中同源的差异表达基因,并初步认为这些基因为PMADS3调控花单重瓣发育途径上的调控因子。另外,为了进一步完善PMADS3调控花单重瓣发育的具体途径,本实验构建了酵母单杂交文库以用来研究这些调控因子之间的上下游关系以及发掘这条途径上其他的调控因子。具体内容及结果如下：1)利用实时定量PCR技术对已知的NCBI上的烟草18个转录因子和矮牵牛33个转录因子在单重瓣植株之间的表达量进行了检测,分别在这两种植株中筛选了15个差异表达的转录因子,并对这些转录因子进行了聚类,同源性较高且表达变化趋势一致的转录因子则被我们假设为PMADS3调控花单重瓣发育的途径上的作用因子。我们最后获得了4对同源转录因子,分别是：FBP20与tobmads1, PMADS3与NtMADS3, FBP6与NtFBP6, PMADS12与SEP。除去PMADS3基因外,我们推测其他叁对同源基因都参与了PMADS3的调控途径。2)分析矮牵牛和烟草基因芯片的数据结果,我们将其中log值大于2的所有差异基因分上调和下调两类聚类在一起；处理抑制消减杂交技术获得的矮牵牛和烟草差异表达基因,将重瓣植株中特异表达的基因定义为表达量上调,而单瓣植株中特异表达的基因定义为表达量下调,也分上调和下调两类聚类,并与基因芯片的结果整合在一起,我们可以发现许多矮牵牛中差异表达的基因与烟草同源,并且差异变化趋势一致。3)进一步采用实时定量PCR技术对基因芯片和抑制消减杂交获得的同源差异基因进行验证,对相对定量PCR结果分析后可以挑出3对差异同源基因,并且都表现出表达量下调的现象。我们推测这3对基因可能是PMADS3基因控制花单重瓣发育中的调控因子。4)为了对筛选到的3对转录因子和3对差异结构基因进行验证,并进一步确定它们之间的作用关系以及发掘其他可能的调控因子,我们以重瓣矮牵牛花芽为材料,建立了酵母单杂交AD-cDNA文库,并对文库的质量从转化效率和重组片段长度两方面进行了评价。(本文来源于《华中农业大学》期刊2013-06-01）
崔鹏鹏,高宏雷,李凯,高立,高玉龙[8]（2013）在《MDCC-MSB1细胞酵母双杂交cDNA表达文库的构建与鉴定》一文中研究指出提取生长状态良好的MDCC-MSB1细胞的mRNA,以5′端标记有生物素的Oligo dT primer为引物反转录,合成双链后连接Adapter。分级纯化后,通过BP重组反应构建入门文库,滴度为1×105 CFU/mL,文库总容量为1.1×106 CFU,平均插入片段长度为1190bp,阳性重组率为100%。入门文库扩增后提取质粒,通过LR重组反应转化为表达文库,平均滴度为1×105 CFU/mL,文库总容量为1.2×106 CFU,平均插入片段长度为1087bp,重组率为100%。构建的表达文库具有较高的质量,为研究鸡传染性贫血病毒的受体及其细胞嗜性奠定了基础。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2013年05期）
刘清醒,郭长虹,毕影东,郭东林[9]（2013）在《利用酵母单杂交方法筛选大豆根融合基因表达cDNA文库》一文中研究指出酵母单杂交体系通过筛选cDNA文库可直接得到与靶序列相互作用的蛋白质基因序列,是研究DNA-蛋白质相互作用和转录因子功能的最常用、最有效的方法之一。通过构建与Gal4p的激活结构域融合的表达cDNA文库,利用抗病相关基因启动子区的W-box顺式元件采用酵母单杂交方法对该文库进行了筛选,共得到4个阳性克隆。结果为进一步研究与顺式元件W-box相互作用的WRKY蛋白奠定了基础。(本文来源于《大豆科学》期刊2013年02期）
祁小乐,陈玉明,张礼洲,任宪刚,高立[10]（2013）在《鸡胚成纤维细胞cDNA酵母表达文库的构建与鉴定》一文中研究指出试验提取CEF细胞总RNA,运用SMART和LD-PCR技术合成cDNA,通过同源重组克隆入真核表达质粒pGADT7,转化酵母菌Y187,构建cDNA表达文库。文库滴度高达6.94×107cfu/mL,重组率达100%。随机挑选10个克隆进行测序,全部为原鸡序列。本研究为进一步研究重要禽源病毒与宿主细胞的相互作用奠定了基础。(本文来源于《中国家禽》期刊2013年08期）
酵母表达文库论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了研究传染性法氏囊病病毒(IBDV)与宿主B淋巴细胞作用机制,构建鸡法氏囊B淋巴细胞酵母表达文库,试验从3周龄SPF鸡中摘取法氏囊,分离制备B淋巴细胞,从中提取细胞总RNA,使用SMART和LD-PCR技术合成双链cDNA,并进一步与线性化载体pGADT7-Rec共同转化Y187酵母感受态细胞,通过同源重组构建酵母表达文库。结果表明:所构建cDNA文库的效价为9.5×107cfu/mL,重组率为100%,可以用于酵母双杂交试验。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
酵母表达文库论文参考文献
[1].杨恩东,牛晓伟,王心宇.小繁缕酵母表达cDNA文库的构建及PG互作蛋白的获得[J].核农学报.2015
[2].陈玉明,高玉龙,张礼洲,王念,高立.鸡法氏囊B淋巴细胞cDNA酵母表达文库的构建与鉴定[J].黑龙江畜牧兽医.2014
[3].张义,阳江华,梁启福,唐朝荣.巴西橡胶树胶乳均一化cDNA酵母表达文库的构建[J].热带作物学报.2014
[4].杨子平,李辉亮,郭冬,彭世清.巴西橡胶树胶乳酵母双杂交cDNA表达文库的构建及分析[J].热带生物学报.2013
[5].张云云,周君,李晔,张春丹,蔡江佳.可口革囊星虫(Phascolosomaesculenta)酵母双杂交文库和铁结合蛋白真核表达载体的构建[J].海洋与湖沼.2013
[6].廖亚金,李素,贺番,何文瑞,董泓.猪外周血单个核细胞cDNA酵母表达文库的构建及与猪瘟病毒E2蛋白相互作用细胞蛋白的筛选[J].中国预防兽医学报.2013
[7].陈思宇.矮牵牛与烟草单重瓣相关基因的表达分析及酵母单杂交文库的建立[D].华中农业大学.2013
[8].崔鹏鹏,高宏雷,李凯,高立,高玉龙.MDCC-MSB1细胞酵母双杂交cDNA表达文库的构建与鉴定[J].中国畜牧兽医.2013
[9].刘清醒,郭长虹,毕影东,郭东林.利用酵母单杂交方法筛选大豆根融合基因表达cDNA文库[J].大豆科学.2013
[10].祁小乐,陈玉明,张礼洲,任宪刚,高立.鸡胚成纤维细胞cDNA酵母表达文库的构建与鉴定[J].中国家禽.2013
论文知识图
