导读:本文包含了冠状动脉平滑肌细胞的增殖论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:冠状动脉,平滑肌,细胞,羟色胺,支架,药物,泽兰。
冠状动脉平滑肌细胞的增殖论文文献综述
陈俭,李传荣,王瑞敏,毛幼林,黄琼[1]（2019）在《B族Ⅰ型清道夫受体过表达对血小板源性生长因子诱导的冠状动脉平滑肌细胞增殖和迁移的影响》一文中研究指出目的探讨B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)在人冠状动脉平滑肌细胞(hCASMC)增殖和迁移过程中的作用及机制。方法常规培养hCASMC,根据处理方法将细胞分为空白对照组、5μg·L~(-1)血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)组、10μg·L~(-1)PDGF-BB组、20μg·L~(-1)PDGF-BB组、20μg·L~(-1)PDGF-BB+腺病毒绿色荧光蛋白(AdGFP)组(PDGF-BB+Ad-GFP组)、20μg·L~(-1)PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组(PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组)。采用噻唑兰法检测各组细胞增殖情况,Western blot法检测各组细胞中SR-BⅠ表达,Transwell法检测各组细胞迁移情况。结果空白对照组及5、10、20μg·L~(-1)PDGF-BB组细胞中SR-BⅠ相对表达量分别为1.00±0.05、0.76±0.08、0.52±0.06、0.30±0.05,5、10、20μg·L~(-1)PDGF-BB组细胞SR-BⅠ相对表达量均显着低于空白对照组(P<0.05),10、20μg·L~(-1)PDGF-BB组细胞SR-BⅠ相对表达量均显着低于5μg·L~(-1)PDGF-BB组(P<0.05),20μg·L~(-1)PDGF-BB组细胞SR-BⅠ相对表达量显着低于10μg·L~(-1)PDGF-BB组(P<0.05)。培养24、48、72 h时,5、10、20μg·L~(-1)PDGF-BB组及PDGF-BB+Ad-GFP组、PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组细胞增殖能力均显着高于空白对照组(P<0.05),10、20μg·L~(-1)PDGF-BB组及PDGF-BB+Ad-GFP组、PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组细胞增殖能力显着高于5μg·L~(-1)PDGF-BB组(P<0.05),20μg·L~(-1)PDGF-BB组、PDGF-BB+Ad-GFP组、PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组细胞增殖能力显着高于10μg·L~(-1)PDGF-BB组(P<0.05); PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组细胞增殖能力低于20μg·L~(-1)PDGF-BB组和PDGF-BB+Ad-GFP组(P<0.05); 20μg·L~(-1)PDGF-BB组与PDGF-BB+Ad-GFP组细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05)。空白对照组、20μg·L~(-1)PDGF-BB组、PDGF-BB+Ad-GFP组及PDGFBB+Ad-GFP-SR-BⅠ组细胞迁移数分别为24.2±3.6、76.6±4.2、75.2±4.8和60.6±3.6,各组细胞迁移数比较差异有统计学意义(F=40.695,P<0.01); 20μg·L~(-1)PDGF-BB组、PDGF-BB+Ad-GFP组及PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组细胞迁移数显着高于空白对照组,PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组细胞迁移数显着低于20μg·L~(-1)PDGF-BB组、PDGF-BB+Ad-GFP组(P<0.05); 20μg·L~(-1)PDGF-BB组与PDGF-BB+Ad-GFP组细胞迁移数比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PDGF-BB能够促进h CASMC增殖和迁移,并减少SR-BⅠ表达,过表达SR-BⅠ能够抑制PDGFBB的作用,抑制h CASMC增殖和迁移。(本文来源于《新乡医学院学报》期刊2019年05期）
张华巍[2]（2018）在《血流剪切力调控内皮细胞外泌体分泌进而调控冠状动脉平滑肌细胞增殖和迁移》一文中研究指出研究背景:大部分粥样斑块好发的位置在血管分叉、弯曲以及狭窄等血流稍慢的地方。研究表明,由于剪切力高低的不同,造成的结果也不一样,大部分平直的血管,受到的是高剪切力刺激,也就是我们俗称的高剪切力,近期研究结论认为高剪切力具有抗动脉粥样硬化形成的作用。而在血管分叉,弯曲等位置,容易产生涡流,以致血流方向不均一,速度受到影响,与之前位置相比明显降低的剪切力(剪切力0± 4 dyne/cm2),这一剪切力与之前数据相比,也称之为低剪切力,一定程度上促进了动脉粥样硬化斑块的形成与发展。外泌体,主要是由细胞内部囊泡运输体组成。它的形成主要通过细胞外泌囊泡,囊泡直径一般在30-l00nm之间,外泌体最重要的功能是可以装载细胞的各种成分,同时可以选择性地传递至靶细胞,继而引起靶细胞的改变。其中,Exosomes区别于其他信号通路的最大特点能在细胞间直接摄取,并能有效的转运包括miRNA在内的核酸序列。目的:为了初步探索Exosomes是否参与致A S的机制中,并探讨血流剪切力对于外泌体分泌是否有影响。方法通过新生儿脐带提取HUVECs并培养,对于培养的上述细胞给予不同时间剪切力的干预并通过超速离心法分离外泌体。采用BCA法测量总的蛋白含量以及外泌体蛋白含量,同时通过免疫印迹法测量获得的外泌体的表型蛋白。实验结果1.外泌体表型蛋白western blot鉴定本实验对离心所得exosomes进行western blot方法检测TSG101,CD63表达情况,以细胞蛋白作为阳性对照,测量外泌体表型蛋白。2.低剪切力对HUVECs外泌体蛋白浓度的影响低剪切力刺激后外泌体数量随着时间的延长有着明显的改变,在24小时蛋白浓度达到了高峰,与对照组相比有着明显的差异。3.低剪切力对HUVECs外泌体蛋白/细胞蛋白浓度的影响给予不同时间的剪切力刺激后,刺激时间越长,外泌体分泌的数量越多,也证实了低剪切力下,外泌体的分泌与刺激时间成正相关。结论1.通过原始HUVECs细胞可以培养外泌体,同时应用超速离心法能有效的分离HUVECs 颗粒,提取 exosomes。2.内皮细胞中外泌体表达受剪切力调控:低剪切力刺激时间越长,外泌体分泌的数量越多。研究背景近年来随着对其研究的深入,外泌体这一特定基因携带体逐渐被人们认识。外泌体(Exosomes)是如何起作用的,它主要通过细胞外泌囊泡形成,囊泡直径一般在30-1OOnm之间,外泌体最重要的功能是可以装载细胞的各种成分,同时可以选择性地传递至靶细胞,继而引起靶细胞出现改变。目的外泌体主要起一个传递信号的作用,具体的影响作用还要靠其中携带的不同的miRNA的作用。而血流剪切力能否增强携带miRNA的作用。同时通过低剪切力的刺激使哪种miRNA引起改变呢。本研究通过培养的内皮细胞给予低剪切力刺激,通过免疫荧光法观察能否引起外泌体内所含基因的改变。实验方法通过新生儿脐带提取HUVECs并培养,对于培养的上述细胞给予不同时间剪切力的干预并通过超速离心法分离外泌体。对于不同组的外泌体细胞提取总的RNA,目的是通过荧光定量方式显示miRNA表达是否存在不同。结果与静止对照组相比,低剪切力刺激组明显上调miRNA-145,miRNA-143等基因的表达,而其它相关基因与静止组相比上调变化不大,(P<0.05)。结论1.外泌体主要是通过其携带的微小基因来进行信号传导,进而在细胞层面调控细胞的迁移与增殖。2.受剪切力的影响,在剪切力刺激后外泌体中携带的miRNAs表达差异相差较大。研究背景动物实验的冠脉血管内超声研究表明,大部分易损斑块容易发生的位置在哪,一般来说发生在低ESS的血管段。并且,基线上低ESS的程度严重影响了斑块进展。之前的研究中观察了体外作用下低剪切力引起内皮细胞外泌体分泌增加,同时改变了外泌体中所含的信号转导机制。目的本部分研究通过体外研究方式将提取的低剪切力刺激后的外泌体与静止状态下的外泌体分别转染冠状动脉平滑肌细胞,观察其对冠状动脉平滑肌细胞的作用,通过免疫荧光法及蛋白印迹法证实能否引起冠状动脉平滑肌细胞的增值与迁移。实验方法在外泌体与动脉平滑肌内皮细胞一起孵育后,为观察能否有效,通过荧光共聚焦显微镜观察hCASMCs摄取外泌体的效果,并通过MTT方法检测hCASMCs增值水平,Transwell实验检测hCASMCs迁移水平以及western blot检测hCASMCs相关表型蛋白实验结果1荧光共聚焦显微镜观察hCASMCs摄取外泌体荧光共聚焦显微镜可以观察到动脉平滑肌细胞能有效摄取外泌体。2 Transwell实验检测hCASMCs迁移水平与空白对照组相比,经过摄取低剪切力处理组的外泌体后,冠状动脉平滑肌细胞的迁移能力明显增加,与静止组摄取的外泌体相比,迁移能力得到明显提升,两组之间存在统计学差异,同样,酶标仪检测迁移细胞吸光度值也反映同样的结果(P<0.05)。3.低剪切力处理后HUVECs分泌的外泌体对hCASMCs增殖能力的影响与空白对照组相比,通过酶标仪检测迁移细胞吸光度值,经过摄取低剪切力处理组的外泌体后,冠状动脉平滑肌细胞的增值能力明显增加,与静止组摄取的外泌体相比,增值能力得到明显提升,两组之间存在统计学差异。(P<0.05)。4低剪切力处理后HUVECs分泌的外泌体对hCASMCs表型转换的影响叁组之间通过蛋白印迹法测量处理后的冠状动脉平滑肌细胞的表型蛋白,可见通过低剪切力处理的外泌体被摄取后,冠状动脉平滑肌内皮细胞对于Osteopontin,Epiregulin,Elasti几类蛋白与对照组和空白组相比有差异,a-SMA,Caldesmon,Calponin差异不大。结论1.将低剪切力处理组和对照组外泌体使用PKH67标记,与hCASMCs共孵育24小时。荧光共聚焦显微镜证实hCASMCs确实能够摄取外泌体。2.对比空白对照组(不加外泌体)、对照处理HUVECs分泌的外泌体刺激以及低剪切力处理HUVECs分泌的外泌体刺激,低剪切力处理的外泌体对于hCASMCs迁移能力较其他两组有了明显提高。3.低剪切力处理后HUVECs分泌的外泌体对hCASMCs增殖能力,对比空白对照组(不加外泌体)、对照处理HUVECs分泌的外泌体刺激,增殖能力有了明显提高。4.低剪切力处理的外泌体对于hCASMCs增生以及蛋白表型的变化较其他两组没有显着差异。研究背景通过前面的研究我们发现低剪切力可以刺激原始内皮细胞产生较多的外泌体。通过分泌的外泌体与平滑肌细胞的孵育培养,观察到平滑肌细胞可以充分的摄取外泌体,继而引起下一步的信号转导。而外泌体仅仅是作为一种直接转运RNA的载体,其可以转运多种小分子RNA,从而引起不同细胞之间的不同作用。不同的RNA在信号转导过程中起的作用是不一样的,到底是哪个基因在信号转导中起了主要作用,必须将其单独给予增强来证实这一点。目的单独将miRNA-145作为单独研究对象,并通过与其抑制剂及阴性对照组进行比较,观察该基因是否能增强细胞的增值与迁移,继而可以明确是否通过该基因的调控来促进平滑肌细胞的迁移与增殖。从而最终获取低剪切力是通过调节何种基因来改变平滑肌细胞的性能的。实验方法通过购买的合成的miR-145的mimic,inhibitor,和negative。对外泌体细胞进行转染,根据酶标仪测量转染的效率,同时通过转染的外泌体被内皮细胞摄取后,测量hCASMCs迁移能力,增殖水平以及外泌体对hCASMCs表型转换的影响。实验结果1转染效率的验证含miRNA-145,miRNA-145抑制剂以及阴性对照剂的不同组经过多代细胞培养后。含miRNA-145转染效果明显高于另外2组,与另外两组相比之间存在统计学差异。(P<0.05)。2 MTT法检测外泌体对hCASMCs增殖水平的影响采用MTT方法检测通过冠状动脉平滑肌细胞摄取含有不同miRNA的外泌体后,细胞增值能力的改变,通过酶标仪检测迁移细胞吸光度值,含miRNA-145外泌体的被内皮细胞摄取后,冠状动脉平滑肌细胞的增殖能力明显增加,与另外两组相比之间存在统计学差异。(P<0.05)。3.各组外泌体对hCASMCs迁移能力的影响与加入抑制剂的对照组及阴性试剂的对照组相比,经过摄取含miRNA-145组的外泌体后,冠状动脉平滑肌细胞的迁移能力得到明显提升,叁组之间存在统计学差异,(P<0.05)。4 Western blot检测外泌体对hCASMCs表型转换的影响叁组之间通过蛋白印迹法测量处理后的冠状动脉平滑肌细胞的表型蛋白,可见含有miRNA-145的外泌体被摄取后,冠状动脉平滑肌内皮细胞对于a-SMA,Caldesmon,Calponin,Osteopontin,Epiregulin,Elasti 几类表型蛋白与对照组和空白组相比有明显差异。结论1.在外泌体含有的基因中,miRNA-145对细胞增殖作用以及迁移能力是明显提高的。2.抑制了 miRNA-145后,其他基因对于平滑肌内皮细胞的增殖作用以及迁移能力没有太大影响。3.低剪切力是通过调节HUVECs分泌的外泌体中特定miRNA对冠状动脉平滑肌细胞增殖、迁移和表型转换产生作用。(本文来源于《中国人民解放军医学院》期刊2018-05-23）
吴琪[3]（2018）在《STIM 1/Orai 1信号通路在高压负荷诱导冠状动脉血管平滑肌细胞异常增殖中的机制研究》一文中研究指出高血压是最常见的慢性疾病,它所引起的心、脑和肾等靶器官的损害,可增加冠心病、卒中等心脑血管疾病的发生率,给人类带来非常大的身心负担和经济负担。冠心病是高血压非常重要的靶器官损害之一。流行病学调查显示,我国冠心病患者中约60%合并高血压,而高血压病的人群患冠心病的概率比无高血压的人群高出4倍。冠心病的发生发展与高血压血管功能障碍密切相关,其相关分子机制的研究越来越受到人们的关注。目的:通过观察高压负荷对冠状动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化和收缩相关蛋白表达的变化和增殖影响,探讨高血压导致冠心病的可能发病机制。方法:选取SPF级16-18周龄的雄性SHR和Wistar大鼠各10只。二氧化碳处死大鼠,快速取出心脏,通过体视显微镜分出左右冠状动脉,通过苏木精-伊红(HE)染色法观察高血压冠状动脉的结构改变,免疫组织化学法观察高血压冠状动脉Orai1的表达改变。再通过组织贴壁法培养SHR和Wistar大鼠冠状动脉VSMCs,部分用于Western blot检测两组大鼠冠状动脉的表型转化蛋白标志物:α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌肌球蛋白重链(SM-MHC)、平滑肌22α(SM22α)、骨桥蛋白(OPN)以及通路相关蛋白:基质相互作用分子(STIM1)、Orai1、L-型钙通道(Cav1.2)、钙/钙调磷酸酶(Calcineurin)、活化T细胞核因子(NFAT)的蛋白表达水平。部分Wistar大鼠冠状动脉VSMCs给予不同高静水压处理24h,再通过Western blot检测其上述蛋白的表达水平。其余部分冠状动脉VSMCs用细胞计数(CCK-8)观察不同压力处理后,对细胞数量的影响,以及β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal)试剂盒染色观察两组大鼠冠状动脉VSMCs对细胞衰老的影响。结果:(1)HE染色发现Wistar组冠状动脉VSMCs排列整齐,中膜弹力纤维无增生,内膜均一,而SHR组冠状动脉中膜增厚,VSMCs排列紊乱,形态不规则,内皮细胞排列紊乱。(2)免疫组织化学法发现Orai1在高血压冠状动脉VSMCs的表达增多。(3)发现SHR冠状动脉VSMCs的收缩表型标志物SM-MHC以及相关蛋白Cav1.2、NFAT_2的表达明显下调,合成表型标志物OPN以及相关蛋白STIM1、Orai1、Calcineurin表达明显上调;(4)通过高静水压(分0mmHg组、120mmHg组、180mmHg组)处理冠状动脉VSMCs 24h后,120mmHg组和180mmHg组的SM-MHC、α-SMA、Cav1.2蛋白表达以及180mmHg组的NFAT_2蛋白表达较0mmHg组明显下调;120mmHg组和180mmHg组的OPN、Calcineurin蛋白表达以及180mmHg组STIM1、Orai1蛋白表达较0mmHg组明显上调;(5)SHR组冠状动脉VSMCs在24h、48h、72h的增殖能力均较同代数的Wistar组明显降低,而细胞衰老百分率却明显增多。(6)通过高静水压处理冠状动脉VSMCs 24h后,120mmHg组和180mmHg组在48h的增殖能力较0mmHg组明显降低;结论:高血压可能通过激活STIM1,使Orai1通道表达上调,激活calcineurin-NFAT信号途径,使冠状动脉VSMCs出现表型转化,导致冠脉功能改变,最终导致冠状动脉粥样硬化。(本文来源于《南昌大学》期刊2018-05-01）
王庆捷[4]（2016）在《5-羟色胺对冠状动脉平滑肌细胞增殖、迁移和窦房结自律性的影响》一文中研究指出第一部分5-羟色胺促人冠状动脉平滑肌细胞增殖、迁移的研究目的观察不同浓度5-羟色胺(5-HT)对体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞(hCASMC)增殖、迁移的影响及作用机制。方法体外培养hCASMC,予以不同浓度(10-8、10-7、10-6、10-5、10-4、10-3mol/1)的5-HT,观察各种浓度的5-HT对hCASMC的增殖能力(MTT法)和迁移能力(迁移小室法)。分别给予5-羟色胺转运体(5-HTT)抑制剂氟西汀(10-5mo1/1)、西酞普兰((10-6 mo1/1)和5-HT受体(5-HTR)阻断剂GR127935(10-6 mo1/1)、ketanserin (10-7 mol/1),观察5-HTT和5-HTR阻断剂在5-HT诱导的hCASMC增殖迁移中的作用。通过高效气相液相色谱检测胞质内5-HT含量,观察5-HTT阻断剂对于胞内5-HT含量的影响。使用重组腺病毒5-HTT编码基因载体过表达hCASMC 5-HTT,观察过表达5-HTT对5-HT诱导的hCASMC增殖、迁移的影响。结果(1)细胞生长良好,形态多样,多数呈典型纤维样细胞,呈梭形、长梭形、或带状,细胞伸出较长突起相互接触,少数呈叁角形或星型,核卵圆形居中,SM-a-肌动蛋白鉴定阳性。(2)不同浓度5-HT对hCASMC的增殖活力相比较,结果显示：与对照组相比,浓度为10-7mol/1的5-HT的诱导下细胞增殖活力增加(P<0.01),促增殖作用在10-5mol/1时达顶峰,5-HT浓度超过10-5mo1/1时细胞增殖率开始下降。(3)5-HTT阻断剂氟西汀或西酞普兰均可有效抑制5-HT诱导的hCASMC增殖和迁移,与5-HT组相比有显着性差异(P<0.01),这一作用可能与hCASMC胞内摄入的5-HT减少相关；5-HTR拮抗剂GR127935和ketanserin对5-HT诱导的hCASMC增殖无明显影响。(4)过表达5-HTT基因的hCASMC对5-HT诱导的细胞增殖、迁移作用显着增加(P<0.05)。结论5-HT明显促进hCASMC增殖和迁移,5-HTT在5-HT诱导的人冠状动脉平滑肌细胞增殖和迁移中起重要作用。第二部分5-羟色胺转运体在血管损伤后的表达变化及调控因素目的检测血管损伤发生时5-羟色胺转运体(5-HTT)的表达和炎症因子对其的调控作用。方法使用大鼠颈动脉球囊损伤模型,western blot检测发生损伤后狭窄段颈动脉白细胞介素1-beta (IL-1β)和5-HTT表达。给予IL-1β (10ng/ml)及IL-1受体拮抗剂(IL-1ra 10ng/ml)干预体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞(hCASMC)检测其对5-HTT表达的影响。给予IL-1β干预表达5-HTT的HEK293细胞,膜片钳检测5-HT诱导的电流,检测IL-1β对5-HTT功能的影响。结果(1)球囊损伤损伤3天后,新生内膜开始形成,7天后新生内膜已经形成并增厚,以后血管平滑肌细胞继续增生,内膜继续增厚。 (2)颈动脉球囊损伤后组织IL-1β表达增加,于第7天达到高峰,第21天仍明显高于对照组(p<0.05)；5-HTT表达增加,于14天达到高峰(p<0.05)。(3)IL-1β上调hCASMC 5-HTT表达,增强HEK293-5-HTT细胞5-HT诱导电流,IL-1受体拮抗剂可抑制这一作用。结论5-HTT和IL-1β在血管损伤后狭窄过程中表达增加；而IL-1β可以上调5-HTT表达和促进5-HTT功能。第叁部分心肌蛋白5-羟色胺化修饰及其对窦房结细胞自律性影响研究目的检测并筛选心肌细胞受5-羟色胺化作用的靶点,通过生物仿真预测和分析其对窦房结自律性的影响及机制。方法分离单个大鼠心肌细胞,分为四组：a：心肌细胞未与5-HT 孵育且加入了转谷酰胺酶抑制剂（Dansylcadaverine, DSC)和钙离子螯合剂EGTA,b：心肌细胞以1 mM 5-HT和6.7 mM CaCl2处理,c：心肌细胞预先给予0.2 mM DSC孵育10 min后再加入1 mM 5-HT处理,d：心肌细胞预先给予5 mMEGTA后再加入1 mM 5-HT处理。提取蛋白,使用5-HT抗体和Protein A Agarose进行蛋白质免疫共沉淀、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离和快速银染,选择符合5-羟色胺化特点的蛋白质条带进行蛋白质质谱分析。应用窦房结计算机数学心脏模型,对所筛选的蛋白进行生物仿真,探讨其对窦房结节律的影响和机制。结果分离的大鼠单个心肌细胞表面光滑、边缘和横纹清晰,细胞呈长杆状,具有良好透光度。5-羟色胺化检测发现分子量100 kDa附近一条带蛋白量受DSC和EGTA影响明显减少,提示为符合5-羟色胺化特征的蛋白质条带。蛋白质质谱分析鉴定目的条带为肌内质网钙叁磷酸腺苷酶2a(SERCA2a)。利用窦房结细胞计算机数学模型的仿真提示SERCA正向钙亲和力降低或反向钙亲和力增加以及轻度内质网钙泄漏引起窦房结节律增快,反之SERCA正向钙亲和力增加或反向钙亲和力降低以及严重内质网钙泄漏引起窦房结节律减慢。结论SERCA2a可被5-HT进行5-羟色胺化修饰,SERCA钙亲和力改变既可引起窦房结节律增快也可引起窦房结节律减慢。(本文来源于《东南大学》期刊2016-01-30）
何飞连,桂春,李浪,陈力铨,齐彬[5]（2015）在《神经调节蛋白1通过增强其受体磷酸化促进人冠状动脉平滑肌细胞的增殖和迁移》一文中研究指出目的探讨神经调节蛋白1(NRG1)对人冠状动脉平滑肌细胞(HCASMC)增殖和迁移的影响。方法培养HCASMC,Western blot法检测HCASMC中表皮生长因子受体2(Erb B2)、Erb B3和Erb B4的表达以及Erb B2、Erb B3和Erb B4的磷酸化;MTT法检测不同浓度NRG1刺激对HCASMC增殖的影响,利用TranswellTM小室检测不同浓度NRG1刺激对HCASMC迁移能力的影响。结果 Erb B2、Erb B3和Erb B4均能在HCASMC中表达,加入NRG1处理后,与空白对照组比较,3个受体磷酸化水平均明显增加。不同浓度的NRG1干预对HCASMC增殖和迁移的影响不同,10 ng/m L的NRG1能明显促进HCASMC的增殖和迁移。结论 NRG1通过增强其受体Erb B2、Erb B3和Erb B4的磷酸化促进HCASMC的增殖和迁移,进而可能促进HCASMC在血管生成中的作用。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2015年12期）
刘红升,赵晓东,苏琴,王琼,姚咏明[6]（2014）在《炎症因子对类胰岛素样生长因子1沉默表达人冠状动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响》一文中研究指出目的研究炎症因子对类胰岛素样生长因子1(IGF1)沉默表达的人冠状动脉平滑肌细胞(hCASMCs)增殖和凋亡的影响。方法应用慢病毒RNA干扰技术沉默hCASMCs的IGF1表达。分别用未感染病毒载体的细胞和感染阴性对照病毒载体的hCASMCs作为空白对照和阴性对照。肿瘤坏死因子-α50 ng/ml与白细胞介素-1β40 ng/ml共同刺激细胞8 h。采用酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清液中IGF1浓度,MTT法及流式细胞术检测细胞的增殖及凋亡。结果炎症因子刺激后,IGF1沉默表达的hCASMCs上清液中IGF1的浓度显着低于空白对照组和阴性对照组[(426.35±120.96)比(1 030.69±54.69)和(992.82±26.90)pg/ml,P=0.000];细胞的增殖活性显着低于两个对照组(0.302±0.011比0.401±0.028和0.393±0.017,F=37.628,P=0.000),凋亡率显着高于对照组[(10.57±0.99)%比(0.19±0.13)%和(1.31±0.30)%,P=0.001]。结论炎症因子可能具有抑制IGF1敲减后的hCASMCs增殖和促进凋亡的作用。(本文来源于《中国医学科学院学报》期刊2014年02期）
罗小平,杨进,程宇,徐朝军[7]（2010）在《原花青素对人冠状动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响》一文中研究指出目的研究原花青素对人冠状动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。方法采用MTT实验检测原花青素对体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞增殖的影响,运用流式细胞术、基因组DNA电泳观察凋亡特征性"梯状"条带检测细胞凋亡,采用Caspase活性定量检测试剂盒分析Caspase-9、Caspase-3的活性。结果原花青素对人冠状动脉平滑肌细胞具有明显的抑制作用,且其作用有剂量依赖性。流式细胞仪检测显示原花青素可以显着诱导人冠状动脉平滑肌细胞凋亡,DNA电泳显示原花青素作用于人冠状动脉平滑肌细胞后出现凋亡细胞特有的DNA阶梯状条带。原花青素作用后人冠状动脉平滑肌细胞Caspase-9、Caspase-3活性明显升高。结论原花青素可能通过线粒体信号通路抑制人冠状动脉平滑肌细胞的生长并诱导其凋亡。(本文来源于《临床合理用药杂志》期刊2010年20期）
聂波,李佳彦,王硕仁,朱陵群,孙逸坤[8]（2010）在《泽兰对人冠状动脉平滑肌细胞增殖的影响》一文中研究指出目的研究中药泽兰对人冠状动脉平滑肌细胞(HCASMC)增殖的影响。方法利用体外细胞实验,通过人碱性成纤维生长因子和人表皮生长因子刺激细胞增殖,随机分为空白组、不同浓度泽兰水提物(LLST)组(320μg/mL、640μg/mL、1 280μg/mL、2 560μg/mL、5120μg/mL)和不同浓度泽兰醇洗脱物(LLCX)组(40μg/mL、80μg/mL、160μg/mL、320μg/mL、640μg/mL)。采用MTT法和流式细胞术分别测定细胞OD值、G0/G1期、S期、G2/M期和apoptosis期细胞百分比,观察泽兰不同浓度药液对细胞增殖的影响。结果 MTT结果显示泽兰LLST和LLCX 10个剂量均可抑制细胞增殖(P<0.05)。细胞周期结果显示:泽兰LLST 320μg/mL、640μg/mL、1 280μg/mL浓度组和泽兰LLCX40μg/mL、80μg/mL、160μg/mL浓度组的G0/G1期细胞百分比较空白组增高(P<0.05);S期细胞百分比较空白组降低(P<0.05)。抑制增殖作用的最佳药物浓度分别为1 240μg/mL和160μg/mL。结论中药泽兰具有抑制HCASMC增殖的活性。(本文来源于《中西医结合心脑血管病杂志》期刊2010年09期）
李璇,杜荣增,严金川,马根山[9]（2008）在《川芎嗪洗脱支架对猪冠状动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响》一文中研究指出目的:观察川芎嗪洗脱支架(TES)对平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。方法:在6只小型猪冠状动脉分别植入 TES 与金属裸支架(BMS)。术后第28天处死动物,用组织病理学方法检测内膜增殖情况,用免疫组化和 TUNEL 法观察 TES 对平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。结果:TES组较 BMS 组管腔面积增加、支架内新生内膜面积和面积再狭窄百分比减小(P<0.05)。BMS 组较 TES 组增殖细胞核抗原(PCNA)细胞阳性率明显增加(P<0.05)。TES 组较 BMS 组单位面积内平滑肌细胞(VSMC)凋亡数明显增加(P<0.05)。结论:与金属裸支架相比,川芎嗪涂层支架明显降低支架内再狭窄,TES 可以显着抑制 VSMC 增殖、迁移并促进 VSMC 凋亡。(本文来源于《第一届全国中西医结合心血管病中青年医师论坛论文汇编》期刊2008-09-01）
李璇,马根山,陈忠,苏亚民[10]（2008）在《川芎嗪洗脱支架对猪冠状动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响》一文中研究指出目的观察川芎嗪洗脱支架(TES)对平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。方法在6只小型猪冠状动脉分别植入TES与金属裸支架(BMS),术后第28天处死动物,用组织病理学方法检测内膜增殖情况,用免疫组化和TUNEL法观察TES对平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。结果TES组较BMS组冠状动脉管腔面积增加、支架内新生内膜面积和面积再狭窄百分比减小(P<0.05),BMS组较TES组增殖细胞核抗原(PCNA)细胞阳性率明显增加(P<0.05),TES组较BMS组单位面积内平滑肌细胞(VSMC)凋亡数明显增加(P<0.05)。结论与EMS相比,TES可明显降低支架内再狭窄,显着抑制VSMC增殖、迁移并促进VSMC凋亡。(本文来源于《现代医学》期刊2008年04期）
冠状动脉平滑肌细胞的增殖论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
研究背景:大部分粥样斑块好发的位置在血管分叉、弯曲以及狭窄等血流稍慢的地方。研究表明,由于剪切力高低的不同,造成的结果也不一样,大部分平直的血管,受到的是高剪切力刺激,也就是我们俗称的高剪切力,近期研究结论认为高剪切力具有抗动脉粥样硬化形成的作用。而在血管分叉,弯曲等位置,容易产生涡流,以致血流方向不均一,速度受到影响,与之前位置相比明显降低的剪切力(剪切力0± 4 dyne/cm2),这一剪切力与之前数据相比,也称之为低剪切力,一定程度上促进了动脉粥样硬化斑块的形成与发展。外泌体,主要是由细胞内部囊泡运输体组成。它的形成主要通过细胞外泌囊泡,囊泡直径一般在30-l00nm之间,外泌体最重要的功能是可以装载细胞的各种成分,同时可以选择性地传递至靶细胞,继而引起靶细胞的改变。其中,Exosomes区别于其他信号通路的最大特点能在细胞间直接摄取,并能有效的转运包括miRNA在内的核酸序列。目的:为了初步探索Exosomes是否参与致A S的机制中,并探讨血流剪切力对于外泌体分泌是否有影响。方法通过新生儿脐带提取HUVECs并培养,对于培养的上述细胞给予不同时间剪切力的干预并通过超速离心法分离外泌体。采用BCA法测量总的蛋白含量以及外泌体蛋白含量,同时通过免疫印迹法测量获得的外泌体的表型蛋白。实验结果1.外泌体表型蛋白western blot鉴定本实验对离心所得exosomes进行western blot方法检测TSG101,CD63表达情况,以细胞蛋白作为阳性对照,测量外泌体表型蛋白。2.低剪切力对HUVECs外泌体蛋白浓度的影响低剪切力刺激后外泌体数量随着时间的延长有着明显的改变,在24小时蛋白浓度达到了高峰,与对照组相比有着明显的差异。3.低剪切力对HUVECs外泌体蛋白/细胞蛋白浓度的影响给予不同时间的剪切力刺激后,刺激时间越长,外泌体分泌的数量越多,也证实了低剪切力下,外泌体的分泌与刺激时间成正相关。结论1.通过原始HUVECs细胞可以培养外泌体,同时应用超速离心法能有效的分离HUVECs 颗粒,提取 exosomes。2.内皮细胞中外泌体表达受剪切力调控:低剪切力刺激时间越长,外泌体分泌的数量越多。研究背景近年来随着对其研究的深入,外泌体这一特定基因携带体逐渐被人们认识。外泌体(Exosomes)是如何起作用的,它主要通过细胞外泌囊泡形成,囊泡直径一般在30-1OOnm之间,外泌体最重要的功能是可以装载细胞的各种成分,同时可以选择性地传递至靶细胞,继而引起靶细胞出现改变。目的外泌体主要起一个传递信号的作用,具体的影响作用还要靠其中携带的不同的miRNA的作用。而血流剪切力能否增强携带miRNA的作用。同时通过低剪切力的刺激使哪种miRNA引起改变呢。本研究通过培养的内皮细胞给予低剪切力刺激,通过免疫荧光法观察能否引起外泌体内所含基因的改变。实验方法通过新生儿脐带提取HUVECs并培养,对于培养的上述细胞给予不同时间剪切力的干预并通过超速离心法分离外泌体。对于不同组的外泌体细胞提取总的RNA,目的是通过荧光定量方式显示miRNA表达是否存在不同。结果与静止对照组相比,低剪切力刺激组明显上调miRNA-145,miRNA-143等基因的表达,而其它相关基因与静止组相比上调变化不大,(P<0.05)。结论1.外泌体主要是通过其携带的微小基因来进行信号传导,进而在细胞层面调控细胞的迁移与增殖。2.受剪切力的影响,在剪切力刺激后外泌体中携带的miRNAs表达差异相差较大。研究背景动物实验的冠脉血管内超声研究表明,大部分易损斑块容易发生的位置在哪,一般来说发生在低ESS的血管段。并且,基线上低ESS的程度严重影响了斑块进展。之前的研究中观察了体外作用下低剪切力引起内皮细胞外泌体分泌增加,同时改变了外泌体中所含的信号转导机制。目的本部分研究通过体外研究方式将提取的低剪切力刺激后的外泌体与静止状态下的外泌体分别转染冠状动脉平滑肌细胞,观察其对冠状动脉平滑肌细胞的作用,通过免疫荧光法及蛋白印迹法证实能否引起冠状动脉平滑肌细胞的增值与迁移。实验方法在外泌体与动脉平滑肌内皮细胞一起孵育后,为观察能否有效,通过荧光共聚焦显微镜观察hCASMCs摄取外泌体的效果,并通过MTT方法检测hCASMCs增值水平,Transwell实验检测hCASMCs迁移水平以及western blot检测hCASMCs相关表型蛋白实验结果1荧光共聚焦显微镜观察hCASMCs摄取外泌体荧光共聚焦显微镜可以观察到动脉平滑肌细胞能有效摄取外泌体。2 Transwell实验检测hCASMCs迁移水平与空白对照组相比,经过摄取低剪切力处理组的外泌体后,冠状动脉平滑肌细胞的迁移能力明显增加,与静止组摄取的外泌体相比,迁移能力得到明显提升,两组之间存在统计学差异,同样,酶标仪检测迁移细胞吸光度值也反映同样的结果(P<0.05)。3.低剪切力处理后HUVECs分泌的外泌体对hCASMCs增殖能力的影响与空白对照组相比,通过酶标仪检测迁移细胞吸光度值,经过摄取低剪切力处理组的外泌体后,冠状动脉平滑肌细胞的增值能力明显增加,与静止组摄取的外泌体相比,增值能力得到明显提升,两组之间存在统计学差异。(P<0.05)。4低剪切力处理后HUVECs分泌的外泌体对hCASMCs表型转换的影响叁组之间通过蛋白印迹法测量处理后的冠状动脉平滑肌细胞的表型蛋白,可见通过低剪切力处理的外泌体被摄取后,冠状动脉平滑肌内皮细胞对于Osteopontin,Epiregulin,Elasti几类蛋白与对照组和空白组相比有差异,a-SMA,Caldesmon,Calponin差异不大。结论1.将低剪切力处理组和对照组外泌体使用PKH67标记,与hCASMCs共孵育24小时。荧光共聚焦显微镜证实hCASMCs确实能够摄取外泌体。2.对比空白对照组(不加外泌体)、对照处理HUVECs分泌的外泌体刺激以及低剪切力处理HUVECs分泌的外泌体刺激,低剪切力处理的外泌体对于hCASMCs迁移能力较其他两组有了明显提高。3.低剪切力处理后HUVECs分泌的外泌体对hCASMCs增殖能力,对比空白对照组(不加外泌体)、对照处理HUVECs分泌的外泌体刺激,增殖能力有了明显提高。4.低剪切力处理的外泌体对于hCASMCs增生以及蛋白表型的变化较其他两组没有显着差异。研究背景通过前面的研究我们发现低剪切力可以刺激原始内皮细胞产生较多的外泌体。通过分泌的外泌体与平滑肌细胞的孵育培养,观察到平滑肌细胞可以充分的摄取外泌体,继而引起下一步的信号转导。而外泌体仅仅是作为一种直接转运RNA的载体,其可以转运多种小分子RNA,从而引起不同细胞之间的不同作用。不同的RNA在信号转导过程中起的作用是不一样的,到底是哪个基因在信号转导中起了主要作用,必须将其单独给予增强来证实这一点。目的单独将miRNA-145作为单独研究对象,并通过与其抑制剂及阴性对照组进行比较,观察该基因是否能增强细胞的增值与迁移,继而可以明确是否通过该基因的调控来促进平滑肌细胞的迁移与增殖。从而最终获取低剪切力是通过调节何种基因来改变平滑肌细胞的性能的。实验方法通过购买的合成的miR-145的mimic,inhibitor,和negative。对外泌体细胞进行转染,根据酶标仪测量转染的效率,同时通过转染的外泌体被内皮细胞摄取后,测量hCASMCs迁移能力,增殖水平以及外泌体对hCASMCs表型转换的影响。实验结果1转染效率的验证含miRNA-145,miRNA-145抑制剂以及阴性对照剂的不同组经过多代细胞培养后。含miRNA-145转染效果明显高于另外2组,与另外两组相比之间存在统计学差异。(P<0.05)。2 MTT法检测外泌体对hCASMCs增殖水平的影响采用MTT方法检测通过冠状动脉平滑肌细胞摄取含有不同miRNA的外泌体后,细胞增值能力的改变,通过酶标仪检测迁移细胞吸光度值,含miRNA-145外泌体的被内皮细胞摄取后,冠状动脉平滑肌细胞的增殖能力明显增加,与另外两组相比之间存在统计学差异。(P<0.05)。3.各组外泌体对hCASMCs迁移能力的影响与加入抑制剂的对照组及阴性试剂的对照组相比,经过摄取含miRNA-145组的外泌体后,冠状动脉平滑肌细胞的迁移能力得到明显提升,叁组之间存在统计学差异,(P<0.05)。4 Western blot检测外泌体对hCASMCs表型转换的影响叁组之间通过蛋白印迹法测量处理后的冠状动脉平滑肌细胞的表型蛋白,可见含有miRNA-145的外泌体被摄取后,冠状动脉平滑肌内皮细胞对于a-SMA,Caldesmon,Calponin,Osteopontin,Epiregulin,Elasti 几类表型蛋白与对照组和空白组相比有明显差异。结论1.在外泌体含有的基因中,miRNA-145对细胞增殖作用以及迁移能力是明显提高的。2.抑制了 miRNA-145后,其他基因对于平滑肌内皮细胞的增殖作用以及迁移能力没有太大影响。3.低剪切力是通过调节HUVECs分泌的外泌体中特定miRNA对冠状动脉平滑肌细胞增殖、迁移和表型转换产生作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
冠状动脉平滑肌细胞的增殖论文参考文献
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[2].张华巍.血流剪切力调控内皮细胞外泌体分泌进而调控冠状动脉平滑肌细胞增殖和迁移[D].中国人民解放军医学院.2018
[3].吴琪.STIM1/Orai1信号通路在高压负荷诱导冠状动脉血管平滑肌细胞异常增殖中的机制研究[D].南昌大学.2018
[4].王庆捷.5-羟色胺对冠状动脉平滑肌细胞增殖、迁移和窦房结自律性的影响[D].东南大学.2016
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[8].聂波,李佳彦,王硕仁,朱陵群,孙逸坤.泽兰对人冠状动脉平滑肌细胞增殖的影响[J].中西医结合心脑血管病杂志.2010
[9].李璇,杜荣增,严金川,马根山.川芎嗪洗脱支架对猪冠状动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响[C].第一届全国中西医结合心血管病中青年医师论坛论文汇编.2008
[10].李璇,马根山,陈忠,苏亚民.川芎嗪洗脱支架对猪冠状动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响[J].现代医学.2008
论文知识图
