论文摘要
目的:微小RNA（miRNAs）是一类对基因转录后调节起关键作用的小的非编码RNA。黄芪主要用于调节免疫功能。本次研究采用合成黄芪来源的miR-396拟似物（mimic）体内转染后对哮喘小鼠Th2细胞的抑制作用。方法:选择健康雄性BALB/c小鼠40只,分对照组、哮喘模型组、转染组、地塞米松治疗组,每组10只。用OVA诱导和激发小鼠制作哮喘模型。在完成第2次OVA激发后,转染组每只小鼠隔天经鼻滴入miR-396拟似物200 ng,共7次。治疗对照组给予腹腔注射地塞米松。实验后第58天处死小鼠,转染组采用RT-PCR检测肺组织、外周血和脾脏miR-396表达;同时测定各组脾脏匀浆单个核细胞中的T-bet、STAT-6、GATA-3、ROR-γt和Foxp3;采用ELISA测定各组肺匀浆中IL-5、IL-13、IL-17A、TGF-β和IFN-γ水平;光镜下观察肺组织病理学改变。结果:转染组小鼠肺组织miR-396为内参基因U6表达量的（10.69±1.27）倍;脾脏表达量为的（13.87±2.05）倍;外周血的表达量为（12.62±1.65）倍。miR-396转染组与哮喘模型组肺部细胞因子比较,IFN-γ水平显著提高（P<0.05）;miR-396转染组IL-5、IL-13水平均显著低于哮喘模型组（P值均<0.001）;且抑制作用优于地塞米松治疗组（P分别为0.001和0.004）;转染组IL-17A水平被显著抑制（P<0.001）,TGF-β水平得到显著提高（P<0.001）,但其调节作用显著低于地塞米松治疗组。miR-396转染后显著降低了哮喘Th2细胞GATA-3 mRNA表达水平和Th17细胞ROR-γt mRNA的表达,但对抑制Th17细胞ROR-γt mRNA表达作用弱于地塞米松治疗组;miR-396转染对T-bet、STAT-6和Foxp-3 mRNA表达均无显著作用（P>0.05）。miR-396转染组肺部病理改变提示炎症状况得到缓解。结论:本研究结果证实了经鼻滴入转染方法可使哮喘小鼠脾脏、外周血和肺组织均高表达植物来源的miR-396。研究表明,转染miR-396拟似物可抑制Th2细胞炎症因子IL-5和IL-13,显著降低Th2细胞的主要转录因子GATA-3。黄芪来源的miR-396可作为一种哮喘治疗策略加以深入研究。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 沈朝斌,郁兰,顾燕妮,王嵩,陆磊
关键词: 体内转染,黄芪,微小,哮喘,动物模型
来源: 中国免疫学杂志 2019年24期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技
专业: 中药学
单位: 上海中医药大学附属上海市中西医结合医院
基金: 上海市中西医重点专病基金项目(上海市中医发展办公室ZXBZ 2013-003),上海市卫生和计划生育委员会科研课题青年项目(2017Y0160)资助
分类号: R285.5
页码: 3001-3007
总页数: 7
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