论文摘要
木聚糖酶具有水解自然界丰富的木聚糖的能力,在许多工业生产过程中被用作重要的生物催化剂。具有优良性能,特别是热稳定性好的木聚糖酶在工业上有很高的需求。为了达到这一目的,我们在B因子分析的基础上发现了具有显著灵活性的87-QNSS-90残基,并通过多重序列比对了GH11木聚糖酶中高度保守的87-RGHT-90残基,利用定点突变技术直接将87-90残基替换为4个单突变体。结果显示,4个单突变体的耐热性都有很好的提高。4个单突变体在最适温度60℃耐受1h后均保持高于50%的活性,而XyncDBFV在相同条件下的保留活性仅为20.94%。N88G在65℃耐受1h后残留活性大于60%,XyncDBFV的残留活性迅速下降,45分钟后全部丧失活性。通过分子动力学模拟和结构分析,我们探讨了突变体的耐热机制:Cα波动减少,β-片形成倾向增加,发现了新的氢键相互作用,并解释了突变体热稳定性提高的分子机制。本研究证实,结合B因子分析和多重序列比对是获得耐热酶的有效策略。
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文章来源
类型: 国内会议
作者: 马瑜,韩楠玉,慕悦林,唐湘华,李俊俊,黄遵锡
关键词: 木聚糖酶,定点突变,分子模拟,热稳定性
来源: 第十二届中国酶工程学术研讨会 2019-08-08
年度: 2019
分类: 基础科学
专业: 生物学
单位: 云南师范大学生命科学学院云南师范大学酶工程重点实验室生物能源持续开发利用教育部工程研究中心
分类号: Q55
页码: 188
总页数: 1
文件大小: 497k
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