唐书贵1汪乐媛1宋志勇1朱斌1陈刚1唐萃萍2毛建伟2邓晓军2马晓强2杜跃虹2蔡寅2
(1成都市疾病预防控制中心四川成都610041;2新津县血吸虫病防治站四川成都610041)
【摘要】目的观察碳酸氢铵在实验室环境中对鱼的毒性大小。方法在实验室中各个塑料桶装20L水，分别配置碳酸氢铵5000mg、3000mg、1000mg、500mg、100mg、50mg、10mg、5mg、1mg、0.5mg/l，0mg/l为空白对照；氯硝柳胺50mg、10mg、5mg、3mg、1mg、0.5mg/l作为对比组。各组分别投放鲤鱼、鲫鱼、草鱼、花鲢鱼苗10条后连续观察96h。结果碳酸氢铵5000mg、3000mg、1000mg/l，4种鱼苗4h内全死亡，500mg/l，8h内4种鱼苗全部死亡，100mg/l,48h4种鱼苗全部死亡，50mg/l及以下浓度和空白对照，96h后4种鱼苗存活92.5%-97.5%；氯硝柳胺0.5mg/l及以上浓度96h4种鱼苗全部死亡。结论碳酸氢铵对鱼的毒性比氯硝柳胺小，50mg/l及以下浓度对4种鱼苗比较安全。
【关键词】碳酸氢铵氯硝柳胺毒鱼存活死亡
【中图分类号】R965【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）15-0010-03
消灭钉螺是控制血吸虫病流行的重要措施之一。氯硝柳是世界卫生组织推荐,国家规定的灭钉螺药，它对鱼类毒性特别大。喷洒杀灭钉螺必需要反复多次[1]。为减少灭螺次数和提高灭螺效果，采用塑料地膜覆盖（覆盖）杀灭钉螺方法具有很好的灭钉螺效果[2～8]。但是，唯一不足就是覆盖时间较长。为在保持地膜覆盖杀灭钉螺效果不变，缩短覆盖时间，通过实验室和现场覆盖加用碳酸氢铵杀灭钉螺效果观察，取得了覆盖时间短，杀灭钉螺效果理想的结果[9]。但是，碳酸氢铵是一种农业常用化肥，用作杀灭钉螺对鱼类毒性大小常未见报导。为此，2010年进行了实验室毒鱼的观察，结果报告如下。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1灭螺剂50％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿剂粉剂，安徽东盛制药有限公司生产，生产批号200909106，生产日期2009-09-10。碳酸氢铵，市场购买,一等品，总氮≥17.1%，由四川宏益化工有限责任公司生产，生产日期2010-3-15。
1.1.2鱼苗实验用鲤鱼苗、草鱼苗、鲫鱼苗、花鲢鱼苗，选购于新津县的一个鱼类良种养殖场、长度均为3-5cm。鱼苗实验用前驯养3d后，活跃健康的作为实验备用鱼苗。
1.1.3养鱼塑料桶实验用养鱼圆形塑料桶购于市场，无毒，每只塑料桶可容水25升。购回后用清洁水浸泡2d洗净备用。
1.2方法
1.2.1试验分组毒鱼药液配制，每只养鱼试验的塑料桶中加清洁无氯自来水20/l，帖上用药名称和用量标签后，采用天平分别称取碳酸氢铵配置5000mg/l、3000mg/l、1000mg/l、500mg/l、100mg/l、50mg/l、10mg/l、5mg/l、1mg/l、0.5mg/l剂量组和0剂量组作为空白对照；氯硝柳胺配制5mg/l、3mg/l、1mg/l、0.5mg/l作为与碳酸氢铵比较。
1.2.2鱼苗投放每个塑料桶装好水后，加入各剂量组相对应的碳酸氢铵或氯硝柳胺搅拌均匀后随机投放已备健康活跃的鲤鱼苗、草鱼苗、鲫鱼苗、花鲢鱼的鱼苗各10条。
1.2.3鱼苗存活与死亡观察试验后的前8h每隔半小时观察记录记1次各种鱼苗存活与死亡条数。8h后每天上午和下午观察记录2次鱼苗存活与死亡情况，每天4次，连续观察4天观察记录各剂量组的鱼苗存活与死亡条数。
2结果
2.1碳酸氢铵毒鱼试验结果：通过室内观察，鲤鱼苗、鲫鱼苗、草鱼苗、花鲢鱼苗，碳酸氢铵5000mg/l、3000mg/l，2.5h内4种鱼苗全部死亡；1000mg/l、500mg/l，6h内4种鱼苗全部死亡；100mg/l，24h仅鲤鱼苗存活1条外，其他三种鱼苗均全部死亡；50mg/l及以下10mg、5mg、1mg、0.5mg/l的5个组,96h时投放的鲤鱼苗50条全部存活，鲫鱼苗50条存活49条，草鱼苗50条存活46条，花鲢鱼苗50条存活45条，累计4种鱼苗共投放鱼苗200条，存活190条；0对照组鲤鱼苗10条全部存活，鲫鱼苗10条全部存活，草鱼苗10条存活9条，花鲢鱼苗10条存活9条。各剂量组4种鱼苗存活率在92.5%-97.5之间，50mg/l与0对照组比较，（X2＝0．052，ｐ＞0.05）存活率差异无统计学意义。表一。
表一碳酸氢铵对4种鱼苗毒性试验观察结果统计
2.2氯硝柳胺毒鱼试验结果通过实验室96h观察，氯硝柳胺毒鱼，50mg、10mg、5mg/l，鲤鱼苗、鲫鱼苗、草鱼苗、花鲢鱼苗均在0.5h内全部死亡；3mg/l，1h时鲤鱼苗存活2条，鲫鱼苗存活3条，草鱼苗存活2条，花鲢鱼苗存活2条，2h时4种鱼苗全部死亡；氯硝柳胺浓度在1mg/l浓度2h时4种鱼苗全部死亡；0.5mg/l鲤鱼苗、鲫鱼苗96h全部死亡，草鱼苗48h全部死亡，花鲢鱼苗6h全部死亡。0对照组96h鲤鱼苗、鲫鱼苗全存活，草鱼苗、花鲢鱼苗各存活9条和死亡各1条。见表二。
表二氯硝柳铵对4种鱼苗毒性试验观察结果统计
2.3实验温度和水酸碱第一天室温22℃，水温18℃，水pH=7.0。第二天室温25℃，水温20℃。第三天室温27℃，水温21℃。第四天室温28℃，水温22℃。
3讨论
氯硝柳胺是世界卫生组织推荐，国家规定的杀灭钉螺药物，它喷洒和浸杀法均具有对钉螺很强的杀灭作用。但是，喷洒必需反复多次才能达到满意效果[1]，浸杀法一次也不容易达到满意效果。并且氯硝柳胺对鱼类毒性特别大，属于剧毒。现场灭螺时容易引起毒鱼事故。实验结果中显示氯硝柳胺50mg、10mg、5mg/l时，半小时内4种鱼苗全部死亡，3mg、1mg/l时，2小时内4种鱼苗全部死亡，0.5mg/l时，24h仅鲤鱼苗存活3条，鲫鱼苗存活2条，草鱼苗存活1条，花鲢鱼苗全部死亡，96小时4种鱼苗全部死亡。证明氯硝柳胺0.5mg/l以上剂量越大，鱼类死亡越快，死亡时间越短，0.5mg/l时对鱼类也不安全。现场大面积使用氯硝柳胺杀灭钉螺很容易造成毒鱼死亡事故。
碳酸氢铵是一种多年农业常用化肥，用作农业施肥常用量对环境污染小，对人畜毒性低，不容易造成意外事故。用作杀灭钉螺，浸杀法杀灭效果比较好，其效果不如五氯酚钠和氯硝柳胺[10]。实验室碳酸氢铵撒干粉法、喷洒法、集中点投放法加地膜覆盖取得了灭钉螺效果好，覆盖时间又短的好结果[9]。通过实验室碳酸氢铵对4种鱼苗的毒害观察显示，100mg/l及以上用量48h内全部死亡，并且反应出在此剂量时随着剂量的曾加而鱼苗死亡越快，随着剂量的下降鱼苗死亡越慢，证明碳酸氢铵在100mg/l及以上对鱼是不安全的。而结果中碳酸氢铵50mg/l及以下鱼苗存活与空白组比较没有差异，证明碳酸氢铵在此剂量对鱼很安全。况且氯硝柳胺加地膜覆盖杀灭钉螺对鱼类比较安全[11]。证明采用碳酸氢铵加地膜覆盖杀灭钉螺应该说对鱼类是更加安全的。又能提高杀灭钉螺效果和缩短地膜覆盖时间。这是有利于开展应用碳酸氢铵加地膜覆盖杀灭钉螺方法的应用证据。
综上所述，实验室实验结果证明，氯硝柳胺1mg/l及以上剂量鱼类在2h内很快全部死亡，0.5mg/l时96小时内4种鱼苗也慢慢的全部死亡，说明对鱼类也是不安全的，现场环境中采用氯硝柳胺喷洒或浸杀法杀灭钉螺很容易造成毒鱼事故。碳酸氢铵100mg/l及以上剂量48h4种鱼苗全部死亡，对鱼类是不安全的，50mg/l及以下剂量鱼类存活率与空白对照组鱼类存活率无差异。说明此剂量内对鱼类是安全的。故认为碳酸氢铵对鱼类的毒性比氯硝柳胺小。在使用碳酸氢铵后再加上用黑色塑料地膜覆盖杀灭钉螺的方法对鱼类是安全的。
参考文献
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基金项目:成都市卫生局0914科学研究基金资助.