论文摘要
目的探讨慢病毒携带增强型绿色荧光蛋白基因（EGFP）标记大鼠脂肪干细胞（ADSCs）最适感染复数,检测EGFP-ADSCs干细胞特性及体内活性。方法提取培养大鼠脂肪干细胞,流式细胞仪表型鉴定及成骨、成脂、成软骨多向诱导分化。采用携带增强型绿色荧光蛋白基因的慢病毒载体（Lentivirus-EGFP）以不同的感染复数MOI=0、1、5、10、25、50转染ADSCs,流式细胞仪测转染率,筛选合适MOI。CCK8测转染后ADSCs的增殖能力。EGFP-ADSCs成骨、成脂、成软骨诱导后分别行碱性磷酸酶、油红O及阿尔新蓝染色检测。将标记后的细胞注射到大鼠皮下,术后1,2,4w取材行冰冻切片荧光观察及免疫组织化学染色,观察EGFP-ADSCs在体内的表达情况。结果 CD90阳性表达,CD34阴性表达,脂肪干细胞向成骨、成脂、成软骨分化。MOI=0、1、5、10、25、50的转染率分别是0.12%、3.62%、42.4%、66.6%、90.4%、98.0%。CCK8法测转染组（MOI=25）与未转染组（MOI=0）细胞增殖能力无明显差别。EGFP-ADSCs经诱导后仍向成骨、成脂、成软骨分化。1w,2w,4w见细胞于移植部位。结论慢病毒介导的EGFP基因标记大鼠脂肪干细胞最适感染复数为25,且不影响干细胞活性及多向分化潜能,可以成为标记脂肪干细胞的理想方法。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 张瑶瑶,吴国民,张潇毅,王琳,肖艳菊,王祥伸,陈楷
关键词: 脂肪干细胞,慢病毒,增强型绿色荧光蛋白,多向分化
来源: 现代口腔医学杂志 2019年05期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技,基础科学
专业: 生物学,基础医学
单位: 吉林大学口腔医院口腔颌面外科·吉林省牙发育及颌骨重塑与再生重点实验室,济南市章丘区妇幼保健院口腔科
基金: 国家自然科学青年基金(81400532)
分类号: R329.2
页码: 257-260
总页数: 4
文件大小: 794K
下载量: 203
相关论文文献
标签：脂肪干细胞论文; 慢病毒论文; 增强型绿色荧光蛋白论文; 多向分化论文;