α-PGM过表达对灵芝多糖发酵的影响

α-PGM过表达对灵芝多糖发酵的影响

论文摘要

为了探究灵芝多糖合成途径中磷酸葡萄糖变位酶(α-PGM)的过表达对灵芝多糖发酵产生的影响,利用农杆菌介导法将同源性基因pgm转化灵芝原生质体,筛选灵芝转化子,测定灵芝胞外多糖产量及胞内多糖含量,并研究多糖合成过程中相关酶基因转录水平的相对表达量和酶的活性。结果发现在PGM过表达的重组型灵芝菌株中胞内多糖含量和胞外多糖量最高分别为21.02 mg/100 mg菌体和0.71 g/L,分别比野生型菌株高9.1%和39.2%;灵芝多糖生物合成途径中pgm、pgi基因转录水平表达量较野生型灵芝菌株处于上调状态,且多糖合成代谢中相关酶活性有显著提高。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 菌种与试剂
  •   1.2 培养基
  •   1.3 方法
  •     1.3.1 液体发酵培养
  •     1.3.2 质粒PJW-PGM的构建
  •     1.3.3 农杆菌介导(ATMT)的DNA转化灵芝原生质体
  •     1.3.4 生物量、还原糖消耗、EPS产量、IPS质量分数的分析
  •     1.3.5 实时测量pgm、pgi的表达(qRT-PCR)
  •     1.3.6 PGM、UGPG、PGI和PMI比酶活的测定
  • 2 结果与分析
  •   2.1 灵芝转化子的筛选
  •   2.2 α-PGM的过表达对灵芝生物量、还原糖消耗、EPS产量和IPS质量分数的影响
  •   2.3 α-PGM的过表达对多糖合成途径中相关酶基因表达量的影响
  •   2.4 α-PGM的过表达对多糖合成途径中相关酶比酶活的影响
  • 3 结语
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李瑞勤,王琼,沈梦烨,丁重阳,顾正华,张梁,石贵阳

    关键词: 灵芝多糖,磷酸葡萄糖变位酶,酶活

    来源: 食品与生物技术学报 2019年11期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 有机化工,一般化学工业

    单位: 江南大学生物工程学院,江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室

    基金: 国家自然科学基金项目(31271918),国家863计划项目(2012AA021505)

    分类号: TQ281;TQ920.1

    页码: 18-24

    总页数: 7

    文件大小: 1629K

    下载量: 77

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