lncRNA TIF通过OMA1调控A549细胞的凋亡

论文摘要

研究目的:本文通过研究长链非编码RNA TIF（long non-coding RNA TIF,lncRNA TIF）对阿霉素（doxorubicin,DOX）诱导的A549细胞系凋亡的影响,探讨lncRNA TIF在A549细胞的凋亡过程中发挥功能的具体机制,为肺癌的治疗提供新思路。研究方法:（1）采用高通量lncRNAs基因芯片技术,筛选2μM DOX处理组中差异表达的lncRNAs,同时通过实时荧光定量PCR（RT-qPCR）技术进行复筛。（2）检测19对肺癌组织和癌旁组织样本中lncRNA TIF的表达。（3）构建lncRNA TIF慢病毒过表达和敲低细胞系。（4）Mito Tracker线粒体染色法检测细胞线粒体分裂与融合情况。（5）流式技术检测细胞凋亡情况。（6）细胞划痕实验检测迁移情况。（7）通过RT-qPCR和Western blot技术探究lncRNA TIF和线粒体分裂蛋白OMA1的关系。结果:（1）根据基因芯片结果和复筛结果确定了差异表达显著的lncRNA,lnc-ZMYM6-2-1,我们命名为lncRNA TIF（Tumor Inhibitor Factor）,作为目的lncRNA进行下一步研究。（2）与癌旁组织样本相比,肺癌组织样本中lncRNA TIF的表达下调（P<0.05）。（3）DOX处理能够促进A549细胞的线粒体分裂,而敲低lncRNA TIF后,能够抑制DOX引起的线粒体分裂。（4）DOX处理能够促进A549细胞的凋亡,而敲低lncRNA TIF后,能够抑制DOX引起的细胞凋亡。（5）敲低lncRNA TIF后,能够促进A549细胞的迁移能力。（6）过表达lncRNA TIF后,OMA1在mRNA水平和蛋白水平的表达均上调;敲低lncRNA TIF后,OMA1在mRNA水平和蛋白水平的表达均下调。（7）DOX处理后,OMA1在mRNA水平和蛋白水平的表达均上调。结论:在肺癌组织样本中lncRNA TIF的表达下调,而DOX处理的A549细胞中,lncRNA TIF的表达上调;lncRNA TIF能够促进A549细胞的凋亡,抑制细胞的迁移;OMA1具有促进线粒体分裂,促进细胞凋亡的功能,在DOX诱导的A549细胞凋亡过程中OMA1表达上调;lncRNA TIF的表达和OMA1的表达呈现正相关的关系。因此,lncRNA TIF在A549细胞的凋亡过程中发挥功能,其靶标分子可能是OMA1。为此lncRNA TIF可能为临床肺癌的治疗提供新的视野,作为新的靶点分子。

论文目录

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 张延慧

导师: 李培峰

关键词: 细胞,细胞凋亡

来源: 青岛大学

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技

专业: 生物学,基础医学

单位: 青岛大学

分类号: R329.2

DOI: 10.27262/d.cnki.gqdau.2019.000152

总页数: 53

文件大小: 1636K

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