酒明串珠菌论文-孟凡涛

酒明串珠菌论文-孟凡涛

导读:本文包含了酒明串珠菌论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:酒明串珠菌,不对称还原,(R)-2-辛醇,反Prelog规则

酒明串珠菌论文文献综述

孟凡涛[1](2010)在《酒明串珠菌不对称合成手性醇及其反Prelog脱氢酶的酶学特性研究》一文中研究指出光学纯的手性醇是化学合成中广泛应用的重要手性砌块,其中(R)-和(S)-2-辛醇是合成类固醇、昆虫性外激素(生物杀虫剂)等光学活性药物和农药的中间体,特别是制备高性能液晶及液晶组件不可或缺的原料。利用微生物醇脱氢酶(ADH)对潜手性酮进行不对称还原制备单一对映体的手性醇是当前手性合成的研究热点,因其具有立体选择性好、理论产率高(100%)、环境友好等的特点。论文以本研究室筛选到的一株不对称还原2-辛酮生成(R)-2-辛醇的酒明串珠菌Oenococcus oeni CECT 4730为基础,着眼于工业化生产,以时空产率为目标,采用原位分离技术构建了新的水/有机溶剂两相反应系统,对全细胞不对称制备(R)-2-辛醇进行研究,并对O. oeni CECT 4730中起关键催化作用的反Prelog规则(R)-ADH进行了分离纯化和酶学性质研究。主要工作及取得的结论如下:(1)通过比较酒明串珠菌O. oeni CECT4730在6中常见明串珠菌培养基上生长和产(R)-ADH的情况,发现ATB培养基为最适的发酵培养基类型。通过Plackett-Burman试验选出ATB中对该菌发酵产酶具有显着正效应的3个因素,按其重要性依次为:番茄汁、酵母膏、柠檬酸氢二铵。并且发现ATB培养基中番茄汁浓度较高时,其对O. oeni CECT4730发酵产(R)-ADH的促进作用比对细胞生长的促进作用更为明显。通过响应面分析确定了各显着性影响因素的最优水平,从而确定了O. oeni CECT4730发酵培养基的最适配方为:葡萄糖1%、蛋白胨1%、盐酸-L-半胱氨酸0.05%、MgSO_4·7H_2O 0.02%、MnSO_4·4H_2O 0.005%、吐温80 0.1%、番茄汁23.8%、酵母膏0.52%、柠檬酸氢二铵0.34%,pH 4.9。与优化前相比,全细胞脱氢酶活力提高了133.4%;菌体细胞量提高了12.8%。(2)通过摇瓶静置发酵对O. oeni CECT4730发酵产酶的非营养条件进行了优化,确定的最适条件为:种龄36 h,接种量10%,温度30 oC,起始pH 4.9,装液量为200 ml/250 ml。以7 L发酵罐进行发酵放大试验,发现接种前充入CO_2形成厌氧环境更有利于该菌的生长和产酶,该菌对剪切力敏感,最适搅拌转速为50 r/min,与摇瓶静置发酵相比,发酵周期缩短了约4 h,全细胞脱氢酶活力(12.91 U vs 12.84 U)和菌体细胞量(OD_(600))(1.597 vs 1.574)均有一定程度的提高。(3)运用原位分离技术构建了适合O. oeni CECT4730全细胞催化反应的新的Tis- HCl /正壬烷两相反应系统。通过对摇瓶反应中的限制性因素的考察,发现Va/Vo(v/v)、pH、温度、摇床转速、辅助底物及底物浓度等均能对反应产率和反应初速度产生明显影响,而只有pH和温度能对产物ee值产生影响。在最适反应条件下(V_a/V_o 1:1、pH 8.0、温度30 oC、摇床转速150 r/min、辅助底物葡萄糖和细胞用量比5.4:1(m/m)、细胞和底物的用量比0.51:1 (g/mmol)),当底物浓度达到0.94 mol/L时,反应24 h,时空产率的最大值比前期的研究提高了26.3%,达24 mmol/L·h,产物的ee (R) > 98%。(4)从2 L发酵液中约11 g湿菌体开始目的酶的纯化,经超声波破碎细胞、硫酸铵盐析、Q-Sepharose-FF阴离子柱层析、Sephacryl S-200凝胶柱层析后,得到约0.36 mg电泳纯的(R)-ADH,活力为254.5 U/mg,酶活收率为2.4%,纯化倍数约25.6倍。纯酶的催化反应遵循反Prelog规则,还原2-辛酮得到的产物的ee (R)达到98.9%。(5)该酶的主要酶学性质研究发现:其分子量为100 kDa (±10 kDa),亚基分子量49 kDa (±2 kDa),为双亚基结构。最适pH为8.0,最适温度为30 oC,均与全细胞催化反应的最适条件一致。Pb~(2+), Ag~+,和Hg~(2+)对其活力有较大的抑制作用;Fe~(3+), Cu~(2+)和Zn~(2+)次之。其底物选择性按2-己酮< 2-庚酮<苯乙酮< 2-辛酮的顺序表现为越来越适合该酶催化,而这些甲基酮取代基的大小依次为C_4H_9– < C_5H_(11)– < C_6H_5– < C_6H_(13)–。该酶为NADPH依赖型,对2-辛酮的K_m和V_m分别为0.2 mmol/L和67.1μmol min-1 mg-1,对NADPH的K_m和V_m分别为0.5 mmol/L和147.1μmol min~(-1) mg~(-1)。该酶在分子量、亚基结构、最适pH和最适温度、金属离子影响等酶学特性方面与文献报道过的(R)-ADH存在明显差异。(本文来源于《江南大学》期刊2010-06-01)

孟凡涛,徐岩[2](2010)在《树脂原位吸附提高酒明串珠菌不对称合成(R)-2-辛醇的催化效率》一文中研究指出通过运用原位吸附技术构建水/树脂反应系统,利用树脂的原位吸附来提高酒明串珠菌Oenococcus oeni CECT 4730不对称合成(R)-2-辛醇的催化效率。通过比较6种不同型号的吸附树脂对反应的影响,选出了最适的树脂AB-8。通过考察树脂的用量及水/树脂相中底物浓度对反应的影响,发现反应体系中加入一定量合适的吸附树脂,能够显着减小底物和产物的抑制,大幅度的提高初始底物浓度和反应产率。AB-8树脂加量为15g/L的水/树脂系统中,底物浓度为30g/L时,反应产率达到58%,较之水相系统提高了1.7倍。(本文来源于《化工进展》期刊2010年02期)

张春晖,李华,夏霜梅[3](1997)在《酒明串珠菌31DH酿酒特性的研究》一文中研究指出研究了四个品种干红葡萄酒的酒明串珠菌(Leuconostocoenos)31DH的酿酒特性。结果表明,18~20℃为该菌进行苹果酸-乳酸发酵(MLF)的最适温度;PH<3.1时,MLF触发困难;31DH对总SO2的抗性达60mg/L且能耐12.8%的酒精度。葡萄酒经过MLF后,总酸下降2.0~3.5g/L,挥发酸和挥发酯分别上升0.20~0.30g/L和0.15~0.22g/L,风味平衡指数达5以上,口感变得柔和、润口、协调,酒质得到提高。(本文来源于《微生物学通报》期刊1997年01期)

酒明串珠菌论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

通过运用原位吸附技术构建水/树脂反应系统,利用树脂的原位吸附来提高酒明串珠菌Oenococcus oeni CECT 4730不对称合成(R)-2-辛醇的催化效率。通过比较6种不同型号的吸附树脂对反应的影响,选出了最适的树脂AB-8。通过考察树脂的用量及水/树脂相中底物浓度对反应的影响,发现反应体系中加入一定量合适的吸附树脂,能够显着减小底物和产物的抑制,大幅度的提高初始底物浓度和反应产率。AB-8树脂加量为15g/L的水/树脂系统中,底物浓度为30g/L时,反应产率达到58%,较之水相系统提高了1.7倍。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

酒明串珠菌论文参考文献

[1].孟凡涛.酒明串珠菌不对称合成手性醇及其反Prelog脱氢酶的酶学特性研究[D].江南大学.2010

[2].孟凡涛,徐岩.树脂原位吸附提高酒明串珠菌不对称合成(R)-2-辛醇的催化效率[J].化工进展.2010

[3].张春晖,李华,夏霜梅.酒明串珠菌31DH酿酒特性的研究[J].微生物学通报.1997

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