毛皮兽阿留申病毒可视化交叉等温扩增检测方法的建立及初步应用

毛皮兽阿留申病毒可视化交叉等温扩增检测方法的建立及初步应用

论文摘要

为建立快速、特异、灵敏的毛皮兽阿留申病毒可视化交叉引物等温扩增检测方法(CPA),以阿留申病毒属内病毒序列为参考,在VP2序列高变区保守区段设计合成4条特异引物。通过优化CPA反应条件,建立了毛皮兽阿留申病毒可视化交叉引物等温扩增检测方法,并进行了特异性、敏感性试验以及对临床样品的检测。结果显示,该方法可扩增水貂阿留申病毒(AMDV)和狐貉阿留申病毒(RFAV),对犬科和水貂组织以及常见病毒无特异性反应;对AMDV、RFAV可视化检测下限分别为5.38×10~2copies/μL、5. 93×10~2copies/μL;对83份临床样品的检测结果显示,其中有16份PCR检测为阴性,CPA、qPCR检测为阳性的样品,表明CPA检测方法优于传统PCR。本试验建立了一种高敏感性、特异性检测毛皮兽阿留申病毒的方法,通过添加荧光染料实现了可视化检测,它更加适合基层兽医站、养殖场进行快速核酸检测。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 韦韬,吴艳虹,马瑞芳,丛丽,岳志刚,赵永强,肖家美,邵西群

关键词: 水貂阿留申病毒,阿留申病毒,交叉引物等温扩增,可视化检测

来源: 中国兽医科学 2019年06期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 中国农业科学院特产研究所

基金: 吉林省自然科学基金项目(20190201169JC),中国农业科学院农业科技创新工程项目(2018)

分类号: S852.65

DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0100

页码: 671-677

总页数: 7

文件大小: 1433K

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