导读:本文包含了染料示踪论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:淋巴结,前哨,乳腺癌,染料,荧光,淋巴管,吲哚。
染料示踪论文文献综述
丛斌斌[1](2019)在《乳腺癌前哨淋巴结新型染料荧光示踪剂Cy754的基础与临床研究》一文中研究指出目的:乳腺癌前哨淋巴结活检术是确定腋窝淋巴结分期的微创技术,该技术的准确性和安全性已经得到多项临床试验结果的验证。目前,乳腺癌临床实践指南推荐,对于腋窝前哨淋巴结阴性的患者,前哨淋巴结活检术替代腋窝淋巴结清扫术是安全、可行的;对于腋窝前哨淋巴结1~2枚转移的早期乳腺癌患者,如果接受保乳和术后全乳放疗,也是可以避免腋窝淋巴结清扫的。前哨淋巴结是肿瘤细胞最先转移的第一枚或第一站淋巴结,该淋巴结不仅引流乳腺原发肿瘤区域的淋巴液,而且还引流整个乳腺器官的淋巴液,其转移状况能够为评估腋窝其他淋巴结的转移提供重要参考。腋窝前哨淋巴结与周围组织对比不明显,难以通过肉眼观察进行区分,需要借助示踪剂使前哨淋巴结显现出来,从而定位前哨淋巴结并引导完成前哨淋巴结活检。目前,临床上应用的前哨淋巴结示踪剂包括两大类,一类是非特异性示踪剂,例如蓝染料、放射性核素和荧光示踪剂等;另一类是特异性示踪剂,例如Lymphoseek、~(99m)Tc-利妥昔单抗和利妥昔单抗-吲哚菁绿等。这些前哨淋巴结示踪剂仍存在部分缺陷,限制了其在前哨淋巴结活检方面的临床应用和推广。蓝染料示踪剂引导前哨淋巴结活检需要外科医生精湛的解剖技巧和严格的学习曲线练习,但仍会出现较高的前哨淋巴结活检假阴性率;核素示踪剂引导前哨淋巴结活检存在患者和医护人员的放射性损伤,放射性核素制备需要昂贵的仪器设备,部分医院无核医学科难以完成核素示踪剂的配制,核素靶向示踪剂虽然具备靶向定位前哨淋巴结的性能但仍无法摆脱核素制备的限制;荧光示踪剂同样需要外科医生精湛的解剖技巧和严格的学习曲线练习,然而淋巴管内的荧光示踪剂外漏会污染周围组织的荧光显像造成前哨淋巴结漏检和定位不准确,荧光靶向示踪剂虽然具备靶向定位前哨淋巴结的作用但激发荧光的光强度较差难以穿透深部组织。本研究首先将通过化学合成的方法制备新型聚甲川菁染料Cy754,增加菁染料Cy754分子的水溶性,红移菁染料Cy754分子最大吸收波长和最大荧光发射波长,增加其光稳定性和荧光量子产率并增加其斯托克斯位移,并检测新型聚甲川菁染料Cy754的吸收和发射光谱、安全性和发射荧光的光强度等。其次将通过直接偶联反应将新型聚甲川菁染料Cy754与前哨淋巴结靶向试剂利妥昔单克隆抗体进行结合,制备新型荧光靶向示踪剂利妥昔单抗-Cy754。随后将对新型荧光靶向示踪剂利妥昔单抗-Cy754的单抗蛋白分子完整性、免疫活性和菁染料Cy754标记率,同时将检测利妥昔单抗-Cy754的安全性,并将通过大鼠后肢前哨淋巴结动物模型检测新型荧光靶向示踪剂利妥昔单抗-Cy754的前哨淋巴结定位性能。最后将新型荧光靶向示踪剂利妥昔单抗-Cy754与联合法进行对比,通过临床验证进一步明确利妥昔单抗-Cy754的前哨淋巴结定位性能,以及利妥昔单抗-Cy754与联合法在定位前哨淋巴结方面的相关性和一致性。方法:通过化学合成的方法制备新型聚甲川菁染料Cy754,通过分光光度计检测新型聚甲川菁染料Cy754的最大紫外吸收光谱和最大荧光发射光谱,通过无菌培养基检测新型甲川菁染料Cy754内有无细菌成分,通过鲎试剂检测Cy754样品溶液中是否存在细菌内毒素。通过实验大鼠分别检测高剂量、中剂量和低剂量Cy754样品的急性毒性,连续观察确认有无死亡,明确实验大鼠的肝功能和肾功能,检测实验大鼠各脏器中药物残留情况。在相同能量激发光源的条件下,对比新型聚甲川菁染料Cy754与吲哚菁绿发射荧光的光强度和组织穿透力。通过直接偶联反应将新型聚甲川菁染料Cy754与前哨淋巴结靶向试剂利妥昔单克隆抗体进行结合,制备新型荧光靶向示踪剂利妥昔单抗-Cy754。通过双层析快速薄层层析-硅胶层析纸法测定利妥昔单抗大分子蛋白上小分子Cy754的标记率。通过凝胶电泳法检测利妥昔单抗-Cy754中单克隆抗体大分子蛋白的完整性。通过双抗体夹心间接酶联免疫测定法检测利妥昔单抗-Cy754中单抗大分子蛋白的免疫活性。通过无菌培养基检测利妥昔单抗-Cy754样品内有无细菌成分,通过鲎试剂检测利妥昔单抗-Cy754样品溶液中是否存在细菌内毒素。通过实验大鼠分别检测高剂量、中剂量和低剂量利妥昔单抗-Cy754样品的急性毒性,连续观察确认有无死亡,明确实验大鼠的肝功能和肾功能,检测实验大鼠各脏器中药物残留情况。在相同能量激发光源的条件下,对比利妥昔单抗-Cy754与利妥昔单抗-吲哚菁绿发射荧光的光强度和组织穿透力。通过染料法淋巴引流的时间窗来构建大鼠后肢前哨淋巴结模型。通过大鼠后肢前哨淋巴结引流模型对利妥昔单抗-Cy754、利妥昔单抗-吲哚菁绿和菁染料Cy754的前哨淋巴结定位性能进行对比。通过临床研究验证利妥昔单抗-Cy754的前哨淋巴结定位性能(山东省肿瘤医院伦理委员会批准伦理批件号No.SDTHEC201603008),计划共入组了12例乳腺癌患者,进行利妥昔单抗-Cy754前哨淋巴结显像并引导完成前哨淋巴结活检,并与联合法前哨淋巴结活检进行对比,明确利妥昔单抗-Cy754与联合法在定位前哨淋巴结上的相关性和一致性。结果:经化学合成的新型聚甲川菁染料Cy754为蓝黑色粉末,极易溶于水,水溶液的颜色为靛蓝色,最大紫外吸收波长为754 nm,最大荧光发射波长为795 nm。经过连续1周培养和观察,确定Cy754样品的培养基颜色无变化,也无细菌菌落生长。所有浓度的Cy754样品鲎试剂检测结果均为阴性,符合中国药典2015年版的细菌内毒素检测要求,说明Cy754样品中无细菌内毒素。经过连续观察,高剂量、中剂量和低剂量叁组实验大鼠均未发现实验大鼠死亡,各组实验大鼠的肝功能和肾功能未见异常,各脏器(心脏、肝脏、肾脏和肺脏)均未发现Cy754残留。在相同能量激发光源的条件下,新型聚甲川菁染料Cy754的发射荧光强度优于吲哚菁绿,菁染料Cy754的组织穿透力也优于吲哚菁绿。经直接偶联制备的新型荧光靶向示踪剂利妥昔单抗-Cy754为深蓝色液体。经过检测利妥昔单抗大分子蛋白上小分子Cy754的标记率可达99%以上。经过检测确定利妥昔单抗与Cy754发生偶联反应之后仍保持了单抗蛋白分子的完整性。经过检测确定利妥昔单抗与Cy754进行偶联反应之后并未改变其免疫活性。经过连续培养和观察,确定利妥昔单抗-Cy754样品培养基颜色无变化,也无细菌菌落生长。经过灵敏度为0.5 EU/mL的鲎试剂检测后发现,所有浓度的利妥昔单抗-Cy754样品溶液结果均为阴性,符合中国药典2015年版的细菌内毒素检测要求,说明利妥昔单抗-Cy754样品中无细菌内毒素。经过连续观察,确认利妥昔单抗-Cy754无急性毒性,各组实验大鼠的肝功能和肾功能未见异常,各脏器(心脏、肝脏、肾脏和肺脏)均未发现Cy754残留。在相同能量激发光源的条件下,利妥昔单抗-Cy754的发射荧光强度优于利妥昔单抗-吲哚菁绿,利妥昔单抗-Cy754的组织穿透力也优于利妥昔单抗-吲哚菁绿。大鼠后肢前哨淋巴结模型确定大鼠后肢腘窝处淋巴结的位置为后肢前哨淋巴结的位置。大鼠后肢前哨淋巴结引流模型对比研究发现,新型聚甲川菁染料Cy754只能使引流淋巴管染色、显像而无引流淋巴结染色、显像,利妥昔单抗-Cy754能够准确定位前哨淋巴结并可经荧光脉管成像仪经体外引导完成前哨淋巴结活检术,与靶向荧光示踪剂利妥昔单抗-吲哚菁绿相比利妥昔单抗-Cy754具有更好的激发荧光组织穿透力。在临床验证阶段共入组了12例乳腺癌患者,其中11例通过利妥昔单抗-Cy754定位到腋窝前哨淋巴结并通过术中荧光脉管成像仪引导成功完成了前哨淋巴结活检。按照患者病例进行统计分析确定利妥昔单抗-Cy754与联合法在前哨淋巴结定位方面呈显着正相关关系,相关关系密切(r_s=0.782且>0.5,P=0.01),而且两种方法在前哨淋巴结定位上具有较好的一致性(kappa=0.76,P<0.01)。结论:1.新型聚甲川菁染料Cy754具有水溶性好、光稳定性好和荧光量子产率高等优点,与吲哚菁绿相比Cy754的发射荧光强度更强、组织穿透力更好;2.利妥昔单抗与Cy754偶联制备的新型荧光靶向示踪剂利妥昔单抗-Cy754具有较高的Cy754标记率,保持了单抗蛋白的完整性和免疫活性,生物安全性好,与利妥昔单抗-吲哚菁绿相比利妥昔单抗-Cy754发射荧光强度更强、组织穿透力更好;3.新型荧光靶向示踪剂利妥昔单抗-Cy754与联合法一样,能够定位前哨淋巴结并引导前哨淋巴结活检。(本文来源于《济南大学》期刊2019-05-01)
金昌国,胡浩,魏小军,艾向南,易文[2](2018)在《荧光示踪法与染料法探测兔甲状腺前哨淋巴结有效性研究》一文中研究指出目的比较荧光示踪法与染料法探测兔甲状腺前哨淋巴结的有效性,为临床开展甲状腺前哨淋巴结活检提供实验依据。方法 30只实验兔共计60侧甲状腺,每侧甲状腺分别注射600μmol·L~(-1)的吲哚菁绿(ICG)和5 g·L~(-1)的亚甲蓝0.02mL。切除所探测的组织进行病理检查,分别记录两种方法检测的淋巴结数量,比较两种方法的准确率和检出率。结果荧光探测法和亚甲蓝染料法检出兔甲状腺前哨淋巴结的准确率分别为92.7%和70.8%,检出率分别为91.7%和75.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在探测兔甲状腺前哨淋巴结方面荧光示踪法优于亚甲蓝染料法,具有较高的检出率和准确率。(本文来源于《安徽医药》期刊2018年05期)
崔嵘嵘,林晓燕,许诚,胡赟宏,王铮元[3](2016)在《染料示踪法联合荧光示踪法提高乳腺癌前哨淋巴结活检术成功率》一文中研究指出背景近年来乳腺癌前哨淋巴结活检术(SLNB)愈来愈受到重视,而示踪剂的选择对于其成功率至关重要。目的评价染料示踪法联合荧光示踪法在乳腺癌SLNB中的临床有效性以及应用价值。方法选取2010年1月—2015年9月同济大学附属杨浦医院乳腺外科符合纳入标准的原发性浸润性乳腺癌患者449例为研究对象。采用随机数字表法将患者分成A组(226例,采用染料示踪法)和B组(223例,采用染料示踪法联合荧光示踪法)。收集患者一般资料〔包括年龄、体质指数(BMI)〕,计算各组患者SLNB成功率。将患者以BMI(≤22.5 kg/m2和>22.5 kg/m2)、年龄(≤55岁和>55岁)进行分层分析。结果 A组患者年龄、BMI小于B组(P<0.05)。223例BMI≤22.5kg/m2患者中,采用染料示踪法联合荧光示踪法SLNB成功率〔94.7%(108/114)〕高于采用染料示踪法〔78.0%(85/109)〕〔OR=5.082,95%CI(1.988,12.993)〕。226例BMI>22.5 kg/m2患者中,采用染料示踪法联合荧光示踪法SLNB成功率〔85.3%(93/109)〕高于采用染料示踪法〔63.2%(74/117)〕〔OR=3.378,95%CI(1.763,6.471)〕。不同BMI层之间同质(χ2BD=0.495,P=0.482)。去除BMI的混杂作用后,采用染料示踪法联合荧光示踪法SLNB成功率高于采用染料示踪法(χ2MH=25.979,P<0.001,ORMH=3.896)。244例≤55岁患者中,采用染料示踪法联合荧光示踪法SLNB成功率〔92.6%(112/121)〕高于采用染料示踪法〔75.4%(94/123)〕〔OR=3.928,95%CI(1.731,8.515)〕。205例>55岁患者中,采用染料示踪法联合荧光示踪法SLNB成功率〔87.3%(89/102)〕高于采用染料示踪法〔63.1%(65/103)〕〔OR=4.002,95%CI(1.975,8.111)〕。不同年龄层之间同质(χ2BD=0.006,P=0.939)。去除年龄的混杂作用后,采用染料示踪法联合荧光示踪法SLNB成功率高于采用染料示踪法(χ2MH=26.686,P<0.001,ORMH=3.928)。Logistic回归分析结果显示,示踪法、BMI、年龄是SLNB结果的影响因素(P<0.05)。Logistic回归模型分类预测准确率为80.2%。结论染料示踪法联合荧光示踪法可有效提高乳腺癌SLNB成功率,值得临床推荐使用。(本文来源于《中国全科医学》期刊2016年24期)
谢兆森,Bhaskar,Bondada,李勃,丁杰[4](2016)在《采用染料示踪法可视化研究葡萄新梢水分运输途径》一文中研究指出当前,对于葡萄(Vitis vinifera)新梢中水分在不同器官与组织间运输途径的研究鲜有报道,本文以八年生‘霞多丽’(‘Chardonnay’)葡萄为实验材料,采用染料示踪法观察葡萄新梢中水分运输途径及关联组织结构。结果表明,在水分沿新梢纵向运输过程中,各器官的水势大小影响着水分在各器官中的运输与分配,同一节位上葡萄果穗水势最高,其次为叶片,副梢水势最低;新梢不同节位叶片水势和气孔导度都存在差异,从新梢基部到顶端所保留的11片叶中,从基部第1叶到第6叶水势逐渐减小,第6叶水势值最低,但从第6叶到顶端第11叶水势有小幅增加,而叶片气孔导度从基部到顶端则呈先增加后下降趋势;从不同节位叶柄的染色率来看,随着水分沿新梢纵向往上运输,从基部到顶端叶片,叶柄染色率下降;从各器官与新梢的水分联系途径来看,叶柄与新梢间通过4~9条从新梢木质部分离出来的维管束(叶迹)相联系,而卷须、果柄和副梢等器官与新梢间维管束连成一体,在节处出现分支通向以上器官,尽管果实与果柄存在木质部运输通道,但在果实发育的第二次快速生长期,只在果刷与果肉细胞相连的维管束中观察到染料分布,与此同时,冬芽处于独立状态,与新梢无木质部相连。因此,新梢着生的各器官与新梢间的水分运输途径存在差异,水分在各器官的运转与分配规律受到运转途径解剖结构的制约,同时,维持各器官水分平衡关系和生理活动需水也调控着新梢水分在各器官的运输与分配。(本文来源于《植物生理学报》期刊2016年08期)
刘璇[5](2016)在《亚甲蓝染料示踪法在早期乳腺癌前哨淋巴活检术中的应用研究》一文中研究指出随机选取治疗的早期乳腺癌患者42例,所有患者在治疗时同时进行前哨淋巴活检术(SLNB)和常规腋窝淋巴扫除术(ALND),使用苏木精=伊红(HE)染色法的检验结果作为检测标准,研究早期乳腺癌治疗中SLNB取代ALND的可行性。研究对所有患者均进行了SLNB和ALND,以HE结果为参照,两种手法的准确度和灵敏度并无显着差异。SLNB就最终效果而言对ALND有一定的指导作用,并且理论上在改善患者术后恢复效率方面要明显优于ALND。因此,对于早期乳腺癌临床治疗上使用SLNB取代ALND具有较高的可行性。(本文来源于《现代诊断与治疗》期刊2016年09期)
唐铁雷,孙小虎,张斌,房金妍[6](2015)在《亚甲蓝染料示踪法在早期乳腺癌前哨淋巴结活检术中的应用》一文中研究指出目的探讨基层医院给予早期乳腺癌行亚甲蓝染料示踪法前哨淋巴结活检术(sentinel lymhnole biopsy,SLNB)的安全性和可行性。方法选取该院2010~2012年87例早期乳腺癌患者为研究对象,采用亚甲蓝染料示踪法行SLNB及腋窝淋巴结清扫术(axillary lymph node dissection,ALND),分析前哨淋巴结(SLN)检出率、准确率、敏感度及假阴性率。结果本研究中SLN检出率95.4%(83/87),准确率93.98%(78/83),敏感度81.82%(36/44),假阴性率11.36%(5/44),患者均无药物不良反应及严重术后并发症发生。结论该方法具有准确、安全等优点,适于在基层医院推广,但相关方法仍需改进和完善,以提高诊断可靠性。(本文来源于《中国妇幼保健》期刊2015年21期)
丁丹,孔德领[7](2014)在《基于“聚集诱导发光”染料的荧光探针用于干细胞示踪的研究》一文中研究指出目的干细胞示踪一直是一个重要的科学问题。荧光方法示踪干细胞具备高瞬时分辨率与高灵敏度的优势。迄今为止,基于有机小分子荧光染料,荧光蛋白及无机半导体量子点的远红/近红外发射的荧光探针被广泛地应用于体内外光学成像中。但是这些传统荧光探针在实际应用中有着其固有的缺点,如荧光蛋白和有机小分子较差的光稳定性和较弱的抑制光漂白能力极大地限制了这类材料的实用性及灵敏度,此问题在长时间成像研究中尤为突出。而无机量子点固有的毒性极大地限制了这类荧光探针的实际应用。因此,设计和制备良好生(本文来源于《天津市生物医学工程学会第叁十四届学术年会论文集》期刊2014-04-01)
金文彬,刘凤桐,李学敏,白文明,江涛[8](2013)在《新型靶向淋巴系统染料示踪剂的制备及其动物实验》一文中研究指出目的基于毛细淋巴管与毛细血管孔径之间差别,设计并合成1种新型大分子淋巴特异性右旋糖酐与甲苯胺蓝偶合物染料示踪剂。方法以甲苯胺蓝为原料,右旋糖酐为载体制备大分子染料。兔颈部淋巴染色实验中,以甲苯胺蓝为阳性对照,对比2种染料相应颈部淋巴管、前哨淋巴结(SLN)染色时间,舌体扩散范围,并进行了病理组织学检查。结果制得平均分子粒径为200nm的新型大分子右旋糖酐和甲苯胺蓝偶合物淋巴染色示踪剂。新型大分子染料淋巴管平均染色时间(19.7min)大于阳性对照组(14.3min),SLN平均染色时间(>4周)大于对照组(<2d),舌体平均扩散范围(10.5mm)小于对照组(20.0mm)。结论新型大分子染料较常用活性染料甲苯胺蓝具有染色时间长,不易弥散,淋巴选择性高等特点。(本文来源于《中国海洋药物》期刊2013年05期)
凡庆东,张在鸿,杨日高,吴国庆,穆宇[9](2013)在《蓝染料示踪早期乳腺癌前哨淋巴结活检52例临床分析》一文中研究指出目的探讨亚甲蓝示踪前哨淋巴结活检在早期乳腺癌患者手术中的临床价值。方法术前采用亚甲蓝分4点注射于距乳腺原发肿瘤周围1cm的皮下组织及瘤体周围,然后再行前哨淋巴结活检术,并分析结果。结果 52例中,48例成功检出前哨淋巴结,检出率为92.3%,其敏感性、准确率、假阴性率分别为88.9%、95.8%、11.1%。结论采用亚甲蓝示踪前哨淋巴结活检可以准确反映早期乳癌患者腋窝淋巴结的病理状况。(本文来源于《东南国防医药》期刊2013年03期)
沈伟娟,朱毓平[10](2013)在《美蓝染料法示踪早期乳腺癌前哨淋巴结50例临床观察》一文中研究指出目的 :探讨使用美蓝染料法示踪和定位乳腺癌前哨淋巴结(sentinel lymph node,SLN)的可行性和预测乳腺癌腋窝淋巴结(axillary lymph node,ALN)转移的准确性。方法:对50例临床早期乳腺癌患者(0~Ⅱ期)在乳晕下及肿瘤周围皮下注射蓝色染料美蓝来示踪和定位SLN,行淋巴结活检和清扫,病理检查并分析结果。结果:成功检出SLN 47例,检出率94.0%(47/50),本组准确率为93.6%(44/47),假阴性率为9.4%(3/32),假阳性率为0。结论:使用国产染料美蓝示踪和定位乳腺癌SLN是可行的,能较准确地反应ALN的情况,并减少手术创伤。(本文来源于《南通大学学报(医学版)》期刊2013年03期)
染料示踪论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
目的比较荧光示踪法与染料法探测兔甲状腺前哨淋巴结的有效性,为临床开展甲状腺前哨淋巴结活检提供实验依据。方法 30只实验兔共计60侧甲状腺,每侧甲状腺分别注射600μmol·L~(-1)的吲哚菁绿(ICG)和5 g·L~(-1)的亚甲蓝0.02mL。切除所探测的组织进行病理检查,分别记录两种方法检测的淋巴结数量,比较两种方法的准确率和检出率。结果荧光探测法和亚甲蓝染料法检出兔甲状腺前哨淋巴结的准确率分别为92.7%和70.8%,检出率分别为91.7%和75.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在探测兔甲状腺前哨淋巴结方面荧光示踪法优于亚甲蓝染料法,具有较高的检出率和准确率。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
染料示踪论文参考文献
[1].丛斌斌.乳腺癌前哨淋巴结新型染料荧光示踪剂Cy754的基础与临床研究[D].济南大学.2019
[2].金昌国,胡浩,魏小军,艾向南,易文.荧光示踪法与染料法探测兔甲状腺前哨淋巴结有效性研究[J].安徽医药.2018
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[7].丁丹,孔德领.基于“聚集诱导发光”染料的荧光探针用于干细胞示踪的研究[C].天津市生物医学工程学会第叁十四届学术年会论文集.2014
[8].金文彬,刘凤桐,李学敏,白文明,江涛.新型靶向淋巴系统染料示踪剂的制备及其动物实验[J].中国海洋药物.2013
[9].凡庆东,张在鸿,杨日高,吴国庆,穆宇.蓝染料示踪早期乳腺癌前哨淋巴结活检52例临床分析[J].东南国防医药.2013
[10].沈伟娟,朱毓平.美蓝染料法示踪早期乳腺癌前哨淋巴结50例临床观察[J].南通大学学报(医学版).2013