血清4型禽腺病毒W株的分离鉴定和全基因组序列分析

血清4型禽腺病毒W株的分离鉴定和全基因组序列分析

论文摘要

为了解血清4型禽腺病毒(fowl adenovirus genotype 4,FAdV-4)W株全基因序列、结构特征及遗传变异情况,本试验采集发病鸡肝脏和肾脏进行PCR鉴定、SPF鸡胚和鸡胚肝细胞分离、电镜观察证明该病毒为FAdV-4,TCID50为10-7.2/0.1 mL;电镜观察可见70 nm左右的二十面体无囊膜病毒颗粒;经绒毛尿囊膜途径接种10日龄SPF鸡胚后能明显抑制鸡胚发育出现侏儒胚,接种10 d内死亡率达100%;进一步对W株进行全基因组扩增及序列分析。病毒序列分析结果显示,其全基因组长为43 591 bp,共有60个开放阅读框,W株与GenBank中公布的FAdV-4参考毒株全基因组核苷酸序列同源性为98.4%~100%,其中与标准株非致病性毒株ON1(登录号:GU188428.1)的同源性为98.4%,主要缺失ORF19(脂肪酶基因)和ORF27;通过对病毒主要结构蛋白Hexon、Fiber-1和Fiber-2基因分析发现,W株与近几年国内分离株亲缘关系较近,与ON1株及其他国外分离株差异较大。综上说明,该分离株具有高致病性,与国外分离株存在较大差异,为进一步分析FAdV-4的毒力增强机制提供了基础依据。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 样品采集
  •     1.1.2 试验动物
  •     1.1.3 主要试剂
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 引物设计及合成
  •     1.2.2 病毒的分离鉴定
  •     1.2.3 病毒对SPF鸡胚的致病性
  •     1.2.4 病毒的纯化及电镜观察
  •     1.2.5 病毒TCID50测定
  •     1.2.6 病毒测序分析
  • 2 结 果
  •   2.1 病毒分离鉴定
  •   2.2 病毒对SPF鸡胚的致病性
  •   2.3 病毒TCID50测定结果
  •   2.4 病毒电镜观察结果
  •   2.5 W株测序结果
  •   2.6 W株Hexon的遗传特性
  •   2.7 W株Fiber的遗传特性
  • 3 讨 论
  • 4 结 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 赵玉杰,刘建勋,陈田田,王赛楠,何春辉,陈盼盼,刘琳,李新生

    关键词: 禽腺病毒,分离,鉴定,基因

    来源: 中国畜牧兽医 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 河南农业大学牧医工程学院

    基金: 河南省高校科技创新团队支持计划(19IRTSTHN007),河南省科技开放合作项目(182106000048),国家“十三五”科技专项(2017YFD0500701-5)

    分类号: S852.65

    DOI: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2019.07.022

    页码: 2059-2068

    总页数: 10

    文件大小: 3209K

    下载量: 283

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