导读:本文包含了破骨细胞分化因子论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:因子,细胞,受体,关节炎,类风湿,肿瘤,骨质疏松。
破骨细胞分化因子论文文献综述
桑龙,韩红德,吴克第,付昆[1]（2019）在《丹参素通过核因子κB受体活化因子配体通路抑制破骨细胞分化治疗大鼠骨质疏松症的研究》一文中研究指出目的探讨丹参素通过核因子κB受体活化因子配体(NF-κB-RANKL)通路抑制破骨细胞分化治疗大鼠骨质疏松症的作用。方法选取清洁级健康雌性SD大鼠72只,随机分为空白组12只及造模组60只。造模组用维A酸诱导建立骨质疏松模型,空白组大鼠给予等量0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)。将造模成功的大鼠随机分为模型组、对照组及低、中、高浓度实验组,每组12只。模型组及空白组均灌胃予以0.5%CMC-Na 5 mL·kg~(-1),qd;对照组灌胃予以14 mg·mL~(-1)仙灵骨葆混悬液5 mL·kg~(-1),qd;低、中、高浓度实验组分别灌胃予以2,4和6 mg·mL~(-1)丹参素混悬液5 mL·kg-1,qd。6组大鼠均给药14周。检测比较6组大鼠骨密度(BMD)值,胫骨骨保护素(OPG)、RANKL、NF-κB mRNA表达水平。结果治疗后,空白组、模型组、对照组和低、中、高浓度实验组的第4腰椎BMD值分别为(1.13±0.07),(0.39±0.03),(0.89±0.09),(0.58±0.05),(0.71±0.06)和(0.87±0.08) g·cm~2,右股骨BMD值分别为(0.96±0.08),(0.35±0.04),(0.84±0.06),(0.52±0.06),(0.67±0.08)和(0.83±0.07) g·cm~2,胫骨OPG mRNA分别为(2.56±0.42),(0.79±0.11),(1.94±0.26),(1.21±0.17),(1.46±0.21)和(1.92±0.23),RANKL mRNA分别为(0.78±0.09),(2.41±0.32),(1.13±0.13),(1.96±0.25),(1.57±0.19)和(1.15±0.14),NF-κB mRNA分别为(0.73±0.10),(2.36±0.31),(2.09±0.21),(1.45±0.18),(1.81±0.25)和(2.07±0.24)。低、中、高浓度实验组和对照组的上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(均P <0.05)。结论丹参素能有效改善骨质疏松大鼠骨密度,调节破骨细胞分化因子OPG和RANKL水平,抑制骨吸收,且丹参素浓度越高效果越明显,其作用机制可能与调控NF-κB-RANKL信号转导通路活性有关。(本文来源于《中国临床药理学杂志》期刊2019年23期）
徐子涵,蔡佳宇,李婧,商玮,赵智明[2]（2019）在《姜黄素对类风湿关节炎破骨细胞分化中核因子κB受体活化因子基因及蛋白表达的影响》一文中研究指出目的研究姜黄素对类风湿关节炎(RA)破骨细胞(OC)分化中核因子κB受体活化因子(RANK)基因及蛋白表达的影响。方法采用核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)诱导RA病人外周血单个核细胞(PBMC)向OC分化,给予不同浓度的姜黄素(2.5、5及10μmol/L)进行干预,并设空白对照组。抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色标记成熟OC并计数;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白质印迹法(Western Blot)检测各组细胞RANK基因表达和蛋白水平。结果 RA病人PBMC经RANKL诱导后能获得大量TRAP阳性的OC,经姜黄素(2.5、5及10μmol/L)干预后,TRAP阳性细胞数明显减少(P<0.05);与空白对照组相比,姜黄素各浓度组细胞RANK基因表达显着降低(P<0.05);姜黄素(2.5、5及10μmol/L)各浓度组细胞RANK蛋白的表达分别为(0.46±0.09)、(0.36±0.08)和(0.25±0.07),与空白对照组(0.68±0.11)相比均显着降低(F=21.278,P=0.000)。结论姜黄素可能通过下调RANK基因和相关蛋白的表达,抑制RA病人OC分化。(本文来源于《安徽医药》期刊2019年10期）
季秋实,董明,许诺,姜龙,牛卫东[3]（2019）在《小眼畸形相关转录因子及其信号通路在破骨细胞分化中的作用》一文中研究指出背景:小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)被发现其是编码一个众所周知的转录因子家族的成员,但目前对它的分析可能仍然处于初级阶段。MITF对许多不同器官的生理学和病理学至关重要,包括眼睛、耳朵、免疫系统、黑色素瘤,特别是骨骼和皮肤。目的:文章介绍MITF基因位点的发现与克隆,综述了MITF上调与破骨细胞活性相关的基因的表达和通过细胞融合调节破骨细胞的发育,敲除MITF后抑制破骨细胞的分化以及MITF及其信号通路在破骨细胞的分化中的作用。方法:作者以"MITF、骨破坏、破骨细胞、成骨细胞、小眼畸形相关转录因子、组织蛋白酶K、核因子κB、核因子κB配体"为关键词,检索2000年至2018年中国知网数据库和PubMed数据库中相关文献,并将这些文献进行筛选与总结。结果与结论:最终纳入文献43篇。①MITF对于多种细胞系的分化是必不可少的,并且通过与谱系特异性辅因子的相互作用以及其对特定信号级联的响应而获得其特异性;②MITF在破骨细胞的分化过程中发挥了重要的作用,其能够促进骨破坏;③研究MITF在骨破坏中的作用机制以及骨微环境的改变,可以成为治疗这一系列骨破坏疾病的关键靶点。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2019年36期）
赵昱,彭军,刘汝利[4]（2019）在《破骨细胞分化因子及基质金属蛋白酶-2在外耳道胆脂瘤中的表达及意义》一文中研究指出目的探讨破骨细胞分化因子(RANKL)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在外耳道胆脂瘤(EACC)中的表达及意义。方法采用免疫组化法分别对47例EACC和18例正常外耳道皮肤(对照组)进行RANKL及MMP-2的检测。结果 EACC组织中RANKL及MMP-2的阳性表达率分别为76.60%(36/47)和78.72%(37/47),均显着高于对照组,差异均有统计学意义(χ~2=22.983、21.177,P值均<0.05)。EACC组织中RANKL及MMP-2的阳性表达与骨质破坏程度有关(P<0.05)。RANKL及MMP-2共同阳性33例、共同阴性7例,相关性分析显示,两者之间呈正相关(r=0.572,P<0.05)。结论 RANKL及MMP-2在EACC组织中的表达明显升高,且表达水平与骨质破坏程度有关,表明两者可能共同参与骨质吸收破坏过程。(本文来源于《中国眼耳鼻喉科杂志》期刊2019年02期）
刘志远[5]（2019）在《转录因子Nrf1和Nrf2对破骨细胞分化的调控及Nrf2在砷致骨代谢障碍中的作用》一文中研究指出目的:砷是一种广泛存在于自然界的类金属元素,人类可通过饮用砷污染的地下水、食用砷污染的蔬菜和稻米及含砷药物接触到砷。慢性砷暴露不仅可以引起皮肤损伤、糖尿病、心血管疾病、肿瘤,也可导致骨代谢紊乱。流行病学调查显示,慢性砷暴露会增加各种骨骼疾病的发病风险,动物及细胞实验表明,砷一方面通过抑制成骨细胞分化导致骨类疾病的发生,另一方面低剂量的砷暴露(2.5-5μM)通过增加过氧化氢生成促进破骨细胞分化。据此,本研究第一部分利用C57BL/6背景下的野生型小鼠及原代细胞和细胞系模型体内体外实验相结合,探讨砷对破骨细胞分化的影响。科室的前期结果及大量实验表明,砷可激活Nrf1和Nrf2,在细胞增殖、分化和行使生物学功能过程中起到重要的作用。Nrf1和Nrf2同属于CNC-bZIP转录因子,可与sMaf蛋白结合形成异二聚体,结合到靶基因启动子近端的抗氧化元件,调控启动多种基因的表达。Nrf1广泛表达于多种组织,其不仅介导抗氧化反应,还参与调控包括组织发育、蛋白酶体稳态、线粒体呼吸、脂质代谢和细胞分化等多种生理过程。Nrf1可通过调节DSPP和维生素A而影响成牙质细胞和成骨细胞的分化和功能,Nrf1也可通过减少osterix的表达而调控间充质干细胞向成骨细胞的分化。且人群调查结果显示,Nrf1与血中成骨相关的指标的表达量成正相关。但其在破骨细胞分化过程中的作用尚无文献报道。Nrf2在破骨细胞分化过程中起到重要的作用,Nrf2可以通过上调抗氧化酶表达降低细胞内的ROS水平而抑制破骨细胞的分化。在RANKL诱导的破骨细胞分化过程中,可通过降低Nrf2/Keap1的比率,降低细胞内抗氧化酶的表达水平,促进破骨细胞的分化和功能。据此,本研究的第二部分应用Nrf1/Nrf2髓系细胞特异性敲除的小鼠、Nrf1/Nrf2缺失的原代和细胞系及Nrf1过表达的细胞系的体内外实验相结合,探讨Nrf1/Nrf2在破骨细胞分化过程中的作用及其机制。Nrf2可对抗外来的氧化损伤,保护细胞,在Nrf2缺失的鼠中,对电离辐射的敏感增加,易发生骨质疏松,科室的前期结果也表明,Nrf2的缺失可导致小鼠对外来刺激的敏感性增加。据此,本研究的第叁部分应用Nrf2全身和髓系细胞特异性敲除的小鼠构建慢性饮水砷暴露模型,探讨Nrf2在砷对破骨细胞分化影响中的作用,应用Nrf2缺失的原代和细胞系细胞研究探讨相关机制。研究方法:1、野生型C57BL/6小鼠构建骨质疏松模型并进行砷暴露处理5月龄雌性C57BL/6小鼠随机分为假手术组和去势手术组,其中假手术和去势手术组又细分为对照组(蒸馏水)和染砷组(5 ppm和20 ppm,叁价无机砷(iAs~Ⅲ):五价无机砷(iAs~Ⅴ)=1:1),砷暴露3个月后,采用Micor-CT和双能X射线检测骨密度。利用骨髓诱导的前破骨细胞和RAW 264.7细胞系研究不同浓度iAs~Ⅲ对破骨细胞分化的影响,利用ROS清除剂NAC研究砷对破骨细胞分化影响的机制。2、髓系细胞Nrf1特异性敲除小鼠构建骨质疏松模型3月龄雌性C57BL/6髓系细胞Nrf1特异性敲除及对照小鼠随机分为假手术组和去势手术组,两个月后采用Micro-CT和双能X射线检测骨密度并收集病理及血清学指标,研究Nrf1对骨的影响。3、Nrf1缺失及过表达细胞诱导分化并应用相应抑制剂处理利用Nrf1敲除的髓系细胞及Nrf1沉默和过表达的RAW 264.7细胞系研究Nrf1对破骨细胞分化的影响及相关机制。应用糖代谢抑制剂2-DG和ROS清除剂NAC处理基础状态下和分化过程中的破骨细胞,研究Nrf1对破骨分化的影响及相关机制。4、Nrf2全身敲除小鼠进行染砷处理10月龄雌性的Nrf2全身敲除及对照组小鼠随机分为对照组和5 ppm砷处理组。砷暴露4个月后,采用Micro-CT和双能X射线检测骨密度并收集病理及血清学指标,研究在砷导致骨密度下降过程中,Nrf2在其中的作用及相关机制。5、Nrf2缺失细胞诱导向破骨细胞分化并应用砷及相应抑制剂处理利用Nrf2敲除的髓系细胞和Nrf2沉默的RAW 264.7细胞系研究不同浓度砷对破骨细胞分化的影响。利用ROS清除剂NAC及p38抑制剂SB203580处理分化过程中的细胞研究砷对破骨细胞分化的影响及其相关机制。结果:1、砷对骨的影响与假手术对照组比,单纯20 ppm染砷组小鼠股骨骨密度下降;去势手术组整体骨密度下降明显,但其中5 ppm和20 ppm组的骨密度与非染砷去势组相比无显着变化;RAW 264.7细胞和骨髓造血干细胞体外培养均显示低剂量iAs~Ⅲ显着影响破骨细胞分化并呈现明显的剂量-效应关系,低剂量促进破骨细胞分化而高剂量产生细胞毒性从而显示一定的抑制效应。进一步机制研究发现抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸显着抑制低剂量iAs~Ⅲ暴露促进的破骨细胞分化,并呈现明显的剂量-效应关系。2、转录因子Nrf2和Nrf1在破骨细胞分化过程中的作用在破骨细胞分化过程中,Nrf2及其下游基因表达水平降低。Nrf2全身敲除及组织特异敲除与对照组比其骨密度无明显变化。进一步的体外实验证明Nrf2缺失可导致破骨细胞分化和功能增强。在破骨细胞分化过程中Nrf1先升高后降低。Nrf1缺失的小鼠中破骨细胞数目增加、功能增强且股骨骨密度下降,去势处理后,其骨密度下降的更明显。髓系细胞体外培养和RAW 264.7细胞均显示Nrf1缺失的细胞向破骨细胞分化能力增加。进一步的机制研究发现Nrf1的长亚型对NFATc1有正向调控作用,短亚型对NFATc1调控有负向调控作用,表明Nrf1可通过调节NFATc1的表达而对破骨细胞分化产生影响。Nrf1缺失后,其细胞内的ROS水平升高、代谢增强、NF-κB信号通路活化,表明Nrf1也可通过细胞代谢水平等的改变而促进破骨细胞分化。3、转录因子Nrf2在砷所致骨密度下降中的作用在破骨细胞分化过程中Nrf2降低。5 ppm的砷处理Nrf2缺失小鼠骨密度下降明显,对照组小鼠骨密度无明显变化;RAW 264.7细胞和髓系细胞体外培养均显示低剂量的砷可显着促进破骨细胞分化,且在Nrf2缺失的细胞中,其促进效果更明显。进一步的机制研究发现抗氧化剂NAC和p38抑制剂SB203580可显着抑制Nrf2缺失导致的NFATc1表达水平升高,并抑制砷引起的破骨细胞分化增强。结论:1、砷暴露引起的氧化应激可通过促进破骨细胞分化而引起骨密度下降。抗氧化剂可有效的抑制砷引起的破骨细胞分化增强,提示抗氧化剂的干预可能用于防治砷暴露引发的骨质疏松。2、体外实验显示,髓系细胞Nrf2缺失可增强破骨细胞分化,但在基础状态下,Nrf2缺失对骨密度无影响。Nrf1缺失可通过增加破骨细胞数目和增强破骨细胞功能而导致小鼠股骨骨密度下降。进一步的机制研究发现Nrf1主要通过升高NFATc1的表达水平、增强代谢、提高ROS水平及改变NF-κB信号通路引起的破骨细胞分化增强。提示Nrf1可作为预防和治疗骨质疏松新的靶点。3、Nrf2缺失的小鼠对砷引起骨密度降低的作用更敏感。进一步的机制研究表明抗氧化剂NAC和p38抑制剂SB203580可显着抑制Nrf2缺失导致的NFATc1表达水平升高,并抑制破骨细胞分化。提示应用抗氧化剂和p38抑制剂的干预可能用于防治砷暴露引发的骨质疏松。(本文来源于《中国医科大学》期刊2019-02-01）
占允中,叶舟,占蓓蕾,张俊超[6]（2019）在《骨质疏松性椎体骨折患者血清破骨细胞生成抑制因子和破骨细胞分化因子的表达及意义》一文中研究指出目的探讨骨质疏松性椎体骨折患者血清破骨细胞生成抑制因子(osteoclast suppressor,OCIF)和破骨细胞分化因子(osteoclast differentiation factor,ODF)的表达及意义。方法选择衢州市人民医院2013年1月—2016年12月符合标准的骨质疏松性椎体骨折患者70例为骨质疏松组,非骨质疏松性椎体骨折患者70例为对照组。采用双抗体夹心酶联免疫吸附实验(Double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法测定血清OCIF和ODF水平。采用双能X线骨密度仪测量腰椎正位总体L1～4骨密度及左侧股骨颈骨密度。采用SPSS20. 0统计软件对数据进行分析。结果骨质疏松组血清OCIF和ODF水平均高于对照组(均P <0. 05)。骨质疏松组腰椎正位骨密度和股骨颈骨密度均低于对照组(均P <0. 05)。骨质疏松患者血清OCIF、ODF水平与腰椎正位骨密度、股骨颈骨密度均呈负相关(均P <0. 05)。骨质疏松患者血清OCIF、ODF水平与骨折程度无显着相关性(均P> 0. 05)。结论骨质疏松性椎体骨折患者血清OCIF、ODF水平升高,血清OCIF、ODF水平与骨质疏松性椎体骨折患者的骨密度关系密切,与骨折的严重程度关系不大。(本文来源于《中华全科医学》期刊2019年01期）
商玮,徐子涵,刘春丽,李婧,郭郡浩[7]（2018）在《肿瘤坏死因子α对类风湿关节炎患者外周血单核细胞向破骨细胞分化的影响》一文中研究指出目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)对类风湿关节炎(RA)患者外周血单核细胞向破骨细胞分化的影响。方法采集RA患者外周血,密度梯度离心后经贴壁法纯化后获得单核细胞,分为A组、B组、C组、D组、E组、F组,分别加入核因子κB受体活化因子配体(RANKL)0 ng/ml+TNF-α0 ng/ml、RANKL 100 ng/ml+TNF-α0 ng/ml、RANKL 0 ng/ml+TNF-α5 ng/ml、RANKL 100 ng/ml+TNF-α2.5 ng/ml、RANKL 100 ng/ml+TNF-α5 ng/ml、RANKL 100 ng/ml+TNF-α10 ng/ml进行诱导培养。细胞培养14天后通过细胞形态学特征及抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色鉴定所得细胞,并对TRAP染色阳性细胞进行计数。免疫印迹法检测TRAP染色阳性的各组细胞核因子κB受体活化因子(RANK)、活化T细胞核因子c1(NFATc1)蛋白的表达。结果 TRAP染色显示,A组、C组获得的细胞不具有典型破骨细胞特征,B组、D组、E组和F组的细胞符合破骨细胞TRAP染色特征。D组、E组和F组TRAP阳性细胞计数、RANK及NFATc1蛋白表达均高于B组(均P<0.05)。结论在缺乏RANKL的条件下,TNF-α不能独立诱导RA患者外周血单核细胞分化为破骨细胞,但存在RANKL时TNF-α能增加RANKL诱导生成的破骨细胞数量,这可能与其上调RANK、NFATc1蛋白的表达有关。(本文来源于《广西医学》期刊2018年16期）
刘璐,段智霞,池红万[8]（2018）在《血清及尿液中破骨细胞分化因子检测在诊断骨质疏松中的可行性》一文中研究指出目的:探讨血清以及尿液中破骨细胞分化因子(RANKL)检测在骨质疏松症诊断中应用的可行性。方法:选择郑州市骨科医院2015年6月至2017年7月收治的106例骨质疏松患者作为观察组;同时间段选择90例健康体检人员作为对照组;针对两组研究对象血清以及尿液中RANKL水平,于临床选择酶联免疫吸附实验(ELISA)方法加以检测,最终观察对比两组研究对象的诊断结果。结果:观察组患者血清以及尿液中RANKL水平高于对照组健康人员,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:对于骨质疏松患者在临床展开血清以及尿液中RANKL水平诊断后发现,RANKL与患有骨质疏松症以及病症发展密切相关,从而证明RANKL检测工作的临床应用价值。(本文来源于《深圳中西医结合杂志》期刊2018年04期）
鲁兴[9]（2017）在《整合素β1在细胞因子诱导的破骨细胞分化中的作用及其机制》一文中研究指出骨组织的变化在很大程度上是由两种骨细胞联合作用的,即成骨细胞和破骨细胞。成骨细胞是主要负责新骨形成,而破骨细胞则负责清除骨化组织。他们的形成和活动受到多种激素和细胞因子的严格控制。干扰这些细胞能形成许多病理骨状况。特别是在成人骨骼疾病中,如骨关节炎,类风湿性关节炎,破骨细胞活动异常。促炎分泌物如TNF-α、IL-6产生于病理骨组织中,并逐渐调节破骨细胞活动,促进疾病发展,因此靶向抑制这些促炎症分泌物的对于疾病的治疗至关重要。最近的研究进展显示了肿瘤坏死因子受体(TNFR)/TNF样蛋白质的重要性:骨保护素(OPG),核因子激活受体(RANK)和RANK配体(RANKL)共同调控破骨细胞功能。目前的研究表明RANKL或TNF-α联合巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)能从骨髓巨噬细胞体外引起破骨细胞生成,但机制不完全清楚。所以,进一步阐明RANKL或TNF-α信号通路生理和病理的调整,对于骨溶解的临床干预治疗具有重要的意义。整合蛋白是介导细胞和细胞及细胞和基质间相互作用的异二聚体受体,他们在破骨细胞分化和活化中起到重要作用。破骨细胞的表达的整合蛋白经分析确定至少有叁种主要的集成类型——α5β3,α5β1,α2β1。尽管α5β3整合蛋白在破骨细胞生成中有至关重要的作用,其他的类型仍然未知。但考虑到大部分都涉及到整合蛋白β1,通过整合蛋白β1可以分析其他亚类型和整合蛋白β1参与破骨细胞分化的作用。α肿瘤坏死因子(TNF-α)是一种主要由巨噬细胞和单核细胞产生的促炎细胞因子,并参与正常炎症反应和免疫反应。α肿瘤坏死因子在许多病理状态下产生增多,包括败血症、恶性肿瘤、心脏衰竭和慢性炎性疾病。在重症类风湿关节炎患者的血液及关节中都可发现肿瘤坏死因子增多。在本研究中TNF-α具有诱导破骨细胞分化的重要作用。而研究中另外一种具有诱导破骨细胞分化的重要作用的因子为 RANKL,RANKL 全称为 Receptor Activator for Nuclear Factor-K B Ligand(核因子κ B受体活化因子配体),又名为TNF-related activation-induced cytokine(TRANCE),TNF 相关激活诱导细胞因子;osteoprotegerin ligand(OPGL),骨保护素配体osteoclast differentiation factor(ODF),破骨细胞分化因子。为避免不同命名在学术上引起不便,美国骨矿研究学会(ASBMR)将其标准化命名为RANKL。其在成骨细胞中表达(osteoblast),激活破骨细胞。RANKL过表达,可导致一系列骨疾病,如风湿性关节炎,银屑病性关节炎等相关疾病。虽然RANKL和TNF α诱导破骨细胞分化的作用是已知的,但是其具体的作用机制还不完全清楚,尤其是TNF α的机制,报道很少。TNF α诱导破骨细胞生成的下游信号传导通路没有一致的研究结论。然而,我们越来越多的证据证实了在TNF α作用时和整合素β1作用密切相关。因此,本项目拟研究整合素β1在细胞因子诱导的破骨细胞分化中的作用及其机制。我们首先构建了整合素β1沉默表达细胞系,用RNA干扰技术进行整合素β1的基因敲除,成功构建了所需要的细胞系。然后通过这种细胞系,探索整合素β1是对破骨细胞分化是否具有作用。我们用两种诱导剂诱导破骨细胞分化,分别为RANKL和TNF-α。在两种诱导剂处理组中,结果明显不同。在TNF-α诱导破骨细胞生成中,稳定的敲除整合素β1后,TRAP阳性破骨细胞数量明显减少,而RANKL处理组中,TRAP阳性破骨细胞数量没有显着变化。为了进一步验证结果,我们做了破骨细胞陷窝形成实验,实验结果和TRAP阳性检测结果类似,TNF-α诱导后,整合素β1敲除组陷窝形成显着下降,RANKL处理后,未见显着变换。最后,我们对破骨细胞分化的标志性基因Cathespin κ和Osterix进行检测,结果显示,同样的,在TNF-α诱导后,整合素β1敲除组中Cathespinκ和Osterix的表达都显着降低,而RANKL处理后,两种基因的表达未发现显着变化。以上结果表明,在TNF-α诱导破骨细胞分化的过程中,整合素β1起着重要的作用,它可以促进这一分化过程,而在RANKL诱导破骨细胞分化的过程中,整合素β1则没有这一作用。为了阐明整合素β1在破骨细胞分化中的分子机制,我们进一步研究与破骨细胞分化有关的信号通路的变化,我们选择了叁种信号通路,NF-κB信号通路、MAPK信号通路、JNK信号通路。分别应用RANKL,TNF-α作用于细胞,检测两种因子作用下对照组与整合素β1敲除组之间NF-κB、MAPK以及JNK叁种信号通路中关键因子的变化。在TNF-α作用的反应中,整合素β1敲除组MAPK信号通路关键因子p38激酶磷酸化明显减少,而NF-KB和JNK信号通路中的关键因子均没有显着变化。相比之下,在RANKL作用下,对照组和整合素β1敲除组NF-κB、MAPK以及JNK叁种信号通路中各关键因子均没有发生显着变化。这一结果提示我们,在TNF-α诱导的破骨细胞分化中,整合素β1的作用可能与MAPK信号通路有一定关系。为了进一步验证我们的实验结论,我们用MAPK抑制剂作用于β1敲除组细胞,仍然分别用RANKL和TNF-α进行诱导处理,结果发现,抑制MAKP后,只在TNF-α处理的β1敲除组中观察到破骨细胞分化显著降低。令人惊讶的是,尽管在RANKL处理中我们也增加了 MAPK抑制剂,但是没有显示破骨细胞分化显着减少。通过推测,这意味着与TNF-α诱导破骨细胞的形成相比,MAPK信号通路在RANKL诱导的破骨细胞中的作用很小。而以上结果也进一步证实了,在TNF-α诱导的破骨细胞分化中,整合素β1的作用与MAPK信号通路有关。最后,我们又应用了整合素β1抑制剂进行作用,分为空白对照组,2.5μg/mL组和5.(0μg/mL组,结果显示,在RANKL处理中,破骨细胞分化数量没有显着变化,而在TNF-α处理时,整合素β1抑制剂组破骨细胞分化数量显着下降,而且5.0μg/mL组比2.5μg/mL组破骨细胞数量下降更加显着。这一结果进一步证明了整合素β1在TNF-α诱导的破骨细胞分化过程中起着重要的促进作用,而且提示我们这种促进作用和整合素β31的含量呈现一个正相关。同样,我们用MAPK激酶抑制剂做相同的实验,结果整合素β1抑制剂实验结果类似,在RANKL处理中,破骨细胞分化数量没有显着变化,而在TNF-α处理时,整合素β1抑制剂组破骨细胞分化数量显着下降,而且5.0μg/mL组比2.5μg/mL组破骨细胞数量下降更加显着。这也进一步说明了 MAPK信号通路在TNF-α在诱导破骨细胞分化的过程中起着重要作用,抑制此通路可以减少破骨细胞分化。总之,我们的研究结果表明,整合素β1可促进破骨细胞分化,而且是在TNF-α诱导破骨细胞形成中起着重要作用,并且这一作用可能是通过MAPK信号通路来实现的。这一研究结果可以为进一步寻找治疗相关疾病的靶向药物提供理论支持和实验基础。(本文来源于《山东大学》期刊2017-09-21）
谭鹏[10]（2017）在《转录因子FOXO1对破骨细胞分化及功能影响的实验研究》一文中研究指出研究目的:1.研究转录因子FOXO1在破骨细胞分化与功能中的作用。2.研究转录因子FOXO1对破骨细胞分化与功能影响的分子机制。研究方法:1.采用RANKL诱导BMMCs及RAW264.7细胞向破骨细胞分化,Q-PCR、Western blot检测破骨分化过程中FOXO1的基因表达变化;采用病毒感染与抗性基因筛选的方法在RAW264.7细胞中稳定过表达FOXO1-ER融合蛋白,四羟他莫昔芬诱导FOXO1-ER融合蛋白进入细胞核发挥转录活性,检测FOXO1转录激活对破骨细胞分化与功能的影响:RANKL诱导破骨细胞分化后,TRAP染色检测FOXO1转录激活对破骨细胞数目的影响,Q-PCR检测破骨细胞分化相关标志基因TRAP、CK、MMP9及ATP6vOd2的表达变化,骨板吸收试验检测FOXO1转录激活对成熟破骨细胞骨吸收活性的影响;2.采用FOXO1小分子抑制剂AS1842856抑制FOXO1转录活性,检测其对破骨细胞分化及功能的影响:AS1842856处理RANKL诱导分化的BMMCs及RAW264.7细胞,通过TRAP染色计数破骨细胞数目及TRAP酶活性测定检测TRAP酶活性来检测FOXO1转录活性抑制对破骨前体细胞向破骨细胞分化的影响,Q-PCR检测破骨细胞分化相关标志基因TRAP、CK、MMP9及ATP6v0d2的表达变化,RANKL诱导RAW264.7细胞分化为破骨细胞后接种至骨板,AS1842856处理检测FOXO1转录活性抑制对破骨细胞骨吸收活性的影响。3.采用Western blot及化学发光法凝胶电泳迁移率实验(EMSA)的方法检测FOXO1转录活性抑制对MAPKs(JNK、P38、ERK)蛋白磷酸化的影响,以及对NF-κB与AP-1 DNA结合力的影响;采用活性氧(ROS)清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC),检测其能否消除FOXO1转录活性抑制对破骨细胞分化及功能的促进作用,验证活性氧在FOXO1介导的对破骨细胞影响的作用;Q-PCR、Western blot检测FOXO1转录抑制对MYC基因表达水平的影响,应用MYC的小分子抑制剂10058-F4,检测其能否对抗FOXO1转录活性抑制对破骨细胞分化及功能的促进作用,验证MYC在FOXO1介导的对破骨细胞影响中的作用。研究结果:1.加入诱导因子RANKL后,RAW264.7及BMMCs细胞中的FOXO1基因表达水平均降低;在RAW264.7中激活FOXO1转录活性(通过四羟他莫昔芬诱导FOXO1入核)后,RANKL诱导生成的破骨细胞数量减少,破骨细胞分化相关标志基因TRAP、CK、MMP9及ATP6v0d2表达减低;在成熟的破骨细胞中激活FOXO1转录活性后,其骨板吸收面积相较于对照组明显减少。2.在BMMCs及RAW264.7细胞中采用FOXO1小分子抑制剂AS1842856下调FOXO1转录活性后,RANKL诱导生成的破骨细胞数量增多,破骨细胞分泌的TRAP酶活性增强,破骨细胞相关标志基因TRAP、CK、MMP9及ATP6v0d2表达增加;在成熟破骨细胞中抑制FOXO1转录活性后,其骨板吸收面积相较于对照组明显增多。3.在分子机制方面,FOXO1转录活性抑制后,JNK、P38磷酸化水平升高,NF-κB及AP-1转录活性均增强;在RAW264.7细胞中抑制FOXO1转录活性后,MYC蛋白表达水平升高,采用10058-F4抑制BMMCs及RAW264.7细胞中MYC活性后,FOXO1转录活性抑制对破骨细胞分化的促进作用被阻断;在BMMCs及RAW264.7细胞中采用N-乙酰半胱氨酸清除活性氧ROS后,FOXO1转录活性抑制对破骨细胞分化的促进作用也被阻断。结论:1.转录因子FOXO1在破骨细胞形成及功能中均具有抑制作用。2.MYC、ROS、MAPKs、AP-1及NF-κB信号通路均介导了 FOXO1对破骨细胞的抑制作用,转录因子FOXO1有望成为抗骨质疏松药物治疗新的靶点。(本文来源于《华中科技大学》期刊2017-03-01）
破骨细胞分化因子论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的研究姜黄素对类风湿关节炎(RA)破骨细胞(OC)分化中核因子κB受体活化因子(RANK)基因及蛋白表达的影响。方法采用核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)诱导RA病人外周血单个核细胞(PBMC)向OC分化,给予不同浓度的姜黄素(2.5、5及10μmol/L)进行干预,并设空白对照组。抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色标记成熟OC并计数;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白质印迹法(Western Blot)检测各组细胞RANK基因表达和蛋白水平。结果 RA病人PBMC经RANKL诱导后能获得大量TRAP阳性的OC,经姜黄素(2.5、5及10μmol/L)干预后,TRAP阳性细胞数明显减少(P<0.05);与空白对照组相比,姜黄素各浓度组细胞RANK基因表达显着降低(P<0.05);姜黄素(2.5、5及10μmol/L)各浓度组细胞RANK蛋白的表达分别为(0.46±0.09)、(0.36±0.08)和(0.25±0.07),与空白对照组(0.68±0.11)相比均显着降低(F=21.278,P=0.000)。结论姜黄素可能通过下调RANK基因和相关蛋白的表达,抑制RA病人OC分化。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
破骨细胞分化因子论文参考文献
[1].桑龙,韩红德,吴克第,付昆.丹参素通过核因子κB受体活化因子配体通路抑制破骨细胞分化治疗大鼠骨质疏松症的研究[J].中国临床药理学杂志.2019
[2].徐子涵,蔡佳宇,李婧,商玮,赵智明.姜黄素对类风湿关节炎破骨细胞分化中核因子κB受体活化因子基因及蛋白表达的影响[J].安徽医药.2019
[3].季秋实,董明,许诺,姜龙,牛卫东.小眼畸形相关转录因子及其信号通路在破骨细胞分化中的作用[J].中国组织工程研究.2019
[4].赵昱,彭军,刘汝利.破骨细胞分化因子及基质金属蛋白酶-2在外耳道胆脂瘤中的表达及意义[J].中国眼耳鼻喉科杂志.2019
[5].刘志远.转录因子Nrf1和Nrf2对破骨细胞分化的调控及Nrf2在砷致骨代谢障碍中的作用[D].中国医科大学.2019
[6].占允中,叶舟,占蓓蕾,张俊超.骨质疏松性椎体骨折患者血清破骨细胞生成抑制因子和破骨细胞分化因子的表达及意义[J].中华全科医学.2019
[7].商玮,徐子涵,刘春丽,李婧,郭郡浩.肿瘤坏死因子α对类风湿关节炎患者外周血单核细胞向破骨细胞分化的影响[J].广西医学.2018
[8].刘璐,段智霞,池红万.血清及尿液中破骨细胞分化因子检测在诊断骨质疏松中的可行性[J].深圳中西医结合杂志.2018
[9].鲁兴.整合素β1在细胞因子诱导的破骨细胞分化中的作用及其机制[D].山东大学.2017
[10].谭鹏.转录因子FOXO1对破骨细胞分化及功能影响的实验研究[D].华中科技大学.2017
论文知识图
