论文摘要
【目的】猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）引起的一种对养猪业造成巨大损失的高致死率的传染性疫病。CRISPR/Cas13b系统精准切割和编辑RNA的功能提供了一种靶向抑制RNA病毒的策略。本研究尝试利用CRISPR/Cas13b的RNA干扰功能对PEDV的基因组RNA进行切割,以探索一种新型的PEDV病毒抑制策略。【方法】设计了4对靶向PEDV基因组不同区域的CRISPR RNA（crRNA）位点,构建了CRISPR/Cas13b打靶载体,以打靶载体转染Vero细胞,并利用PEDV感染转染细胞,检测PEDV在CRISPR/Cas13b转染细胞内的增殖情况。【结果】CRISPR/Cas13b系统对PEDV在Vero细胞的增殖具有明显的抑制作用。打靶载体U6-crRNA3和U6-crRNA4转染组相较于正常细胞组,病毒免疫荧光试验中荧光团明显减少;定量PCR结果显示,打靶载体转染组在细胞水平抑制50%以上病毒增殖量。【结论】本研究构建的CRISPR/Cas13b系统能有效抑制PEDV增殖,为开发有效的RNA病毒防控手段、建立抗病动物模型提供了新的研究策略。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 梅彦,杨化强,吴珍芳
关键词: 猪流行性腹泻病毒,系统,打靶质粒,病毒,基因编辑
来源: 华南农业大学学报 2019年06期
年度: 2019
分类: 农业科技,基础科学
专业: 生物学,畜牧与动物医学
单位: 华南农业大学动物科学学院,温氏研究院
基金: 广东省科技计划项目(2017B020201009)
分类号: S852.651
页码: 1-7
总页数: 7
文件大小: 1523K
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相关论文文献
- [1].应用CRISPR/Cas13b编辑技术治疗TNNT2~(R141W)转基因小鼠的扩张型心肌病[J]. 中国生物化学与分子生物学报 2020(01)
标签：猪流行性腹泻病毒论文; 系统论文; 打靶质粒论文; 病毒论文; 基因编辑论文;