SOE-PCR技术在羊口疮病毒真核表达质粒构建中的应用

论文摘要

为了构建羊口疮病毒B2L和F1L基因融合真核表达质粒pVAX1-B2L-F1L,探讨制备安全可靠羊口疮病毒核酸双基因疫苗的可行性,试验通过Primer Premier 5.0软件设计B2L和F1L融合基因2对引物,应用SOE-PCR技术将B2L和F1L连接起来,用限制性内切酶消化后插入pVAX1真核表达载体中,构建B2L-F1L融合基因表达质粒,再转入大肠杆菌DH5α感受态细胞中,对真核表达质粒进行PCR鉴定、双酶切鉴定及序列测定。结果表明:利用SOE-PCR技术成功扩增出B2L-F1L融合基因;对真核表达质粒pVAX1-B2L-F1L进行PCR鉴定和双酶切鉴定后,均可得到与预期大小一致的DNA片段;测序发现,真核表达质粒目的基因序列与预期设计一致。说明真核表达质粒pVAX1-B2L-F1L构建成功。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 钱林,李婷,鲜思美,曹熠,张友,徐松平,陈元翠,张益,包细明,饶体宇,吴伯梅

关键词: 羊口疮病毒,基因融合,基因,真核表达质粒

来源: 黑龙江畜牧兽医 2019年09期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 贵州大学动物科学学院,贵州省动物疫病研究所

基金: 贵州省科技计划项目(黔科合支撑[2018]2264),贵州省科学技术基金项目(黔科合LH字[2014]7667),贵州省动物疫病防控与兽医公共卫生保障科技创新人才团队项目(黔科合人才团队[2015]4016号),贵州大学2017年大学生创新创业训练计划项目(贵大(省)创字2017[002]),贵州大学2016年大学生“SRT计划”项目(贵大SRT字[2016]186号)

分类号: S852.65

DOI: 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2018.04.0213

页码: 95-98

总页数: 4

文件大小: 304K

下载量: 173

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