猪伪狂犬病病毒MQ18变异株的分离鉴定

猪伪狂犬病病毒MQ18变异株的分离鉴定

论文摘要

为了解福建省猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒株的病原学特性及分子遗传变异情况,本研究用羊胚胎鼻甲细胞(OFTu)从疑似暴发伪狂犬病猪场死亡的育肥猪中分离到1株病毒,该病毒能够产生典型的PRV细胞病变,病毒液接种小鼠(0.1 mL/只)及成年兔(0.5 mL/只)在48~60 h死亡,均表现出典型的伪狂犬病症状。经PCR试验、电镜观察及特异性血清间接免疫荧光试验鉴定为伪狂犬病病毒,命名为MQ18株;并对其进行病毒效价的测定及gC、gE基因核苷酸和氨基酸序列差异性分析。结果显示,分离株TCID50为10-7.71/0.1 mL;将其gC和gE基因序列与国内外17个PRV参考毒株进行同源性比较,核苷酸序列同源性分别为93.5%~99.9%和97.8%~100%,氨基酸序列同源性分别为88.7%~99.8%和95.7%~100%;分子遗传进化树分析显示,gC和gE基因均与国内近6年分离的PRV变异株集聚在一起,属于同一个进化分支;与经典株相比,gC基因编码的氨基酸序列在第63~69位有1个AAASTPA的连续7个氨基酸插入,gE基因编码的氨基酸序列分别在第48位和第496位有1个天冬氨酸(D)的插入,与PRV变异株变异位点相一致。以上结果证实,从发病猪群中分离到1株PRV变异株,本研究结果为选择合适疫苗来防控猪伪狂犬病以及病原学研究提供了参考。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 临床样本的采集与处理
  •   1.2 引物的设计与合成
  •   1.3 病毒DNA提取及PCR扩增
  •   1.4 病毒分离
  •   1.5 病毒粒子的形态观察
  •   1.6 免疫荧光试验
  •   1.7 gC和gE基因的序列分析
  •   1.8 动物感染试验及病毒效价的测定
  • 2 结果
  •   2.1 临床病变及组织病理学观察
  •   2.2 病料的PCR鉴定
  •   2.3 病毒分离
  •   2.4 电镜观察
  •   2.5 间接免疫荧光试验
  •   2.6 动物接种试验及病毒效价的测定
  •   2.7 PRV gC和gE基因的序列分析
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 曾显成,池雪林,潘启东,陈珍珍,林琳,修金生,江斌

    关键词: 伪狂犬病病毒,变异,分离鉴定,序列分析

    来源: 中国兽医科学 2019年08期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 福建农林大学动物科学学院,福建省农业科学院畜牧兽医研究所

    基金: 福建农林大学科技创新专项基金项目(KFA17221A,KFA17222A),国家自然科学基金项目(31602046)

    分类号: S852.65

    DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0137

    页码: 1025-1033

    总页数: 9

    文件大小: 2537K

    下载量: 162

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