导读:本文包含了包含体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:复性,核糖核酸,球蛋白,蛋白质,蛋白,负电荷,族类。
包含体论文文献综述
阮东,郭丽蕊,王芳,袁凡恩,陈谦学[1](2017)在《铜离子代谢结构域包含体1对胶质瘤细胞增殖与凋亡的作用与机制研究》一文中研究指出目的探讨铜离子代谢结构域包含体1(COMMD1)在胶质瘤细胞U87中的作用及机制。方法使用si RNA敲低U87细胞内COMMD1的表达量,使用CCK8检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫印迹技术检测p65、cleaveage-caspase3及BAD蛋白表达量。结果 CCK-8结果显示,0、1、2、3 d时si NC组U87细胞活力为(0.401±0.001)、(0.452±0.002)、(0.621±0.002)、(0.823±0.003),si COMMD1组为(0.402±0.000)、(0.510±0.001)、(1.021±0.002)、(1.612±0.002),两组相比,在2、3 d时细胞活力差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术结果显示,两组细胞凋亡率为(7.121±0.520)%和(2.214±0.325)%,si NC组高于si COMMD1组,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,下调COMMD1后,p65蛋白表达增加40.132%,BAD表达量增加90.157%,cleaveagecaspase3表达减少56.169%。结论 COMMD1可以调节胶质瘤细胞U87的凋亡与增殖。(本文来源于《中国医药导报》期刊2017年29期)
刘建飞,匡瑾瑾,傅晖[2](2017)在《rhG-CSF包含体处理工艺改进》一文中研究指出通过使用管式离心机替代转子离心机对rh G-CSF(赛格力)包含体处理工艺进行改进,使4个亚批次处理的包含体合并为1个批次进行处理,操作时间缩短4倍。通过改进前后的质量对比研究发现,本工序变性蛋白的纯度、内毒素及残余DNA与原工艺相比均无明显差异,且符合企业质量要求,而人工和动力成本下降了75%。(本文来源于《上海医药》期刊2017年15期)
陈然[3](2014)在《同电荷介质促进EGFP包含体复性的研究》一文中研究指出蛋白质复性是基因工程产品生产过程重要的环节。针对蛋白质复性过程中的聚集问题,本文利用本课题组开发的同种电荷介质辅助蛋白质复性的方法,开展同电荷介质辅助绿色荧光蛋白(EGFP)包含体的复性的研究。利用分散聚合反应制备单分散聚甲基丙烯酸缩水甘油酯(pGMA)微球(2.4μm),然后对微球表面的环氧基开环,接枝聚合GMA触须式长链,增加pGMA微球表面的环氧基的密度,通过控制接枝聚合反应,制备不同接枝量的微球,然后对微球表面修饰带负电荷的磺酸基,得到的最高的(pGMA-[GMA-SO3-]n3)介质的离子交换容量达到793μmol/g,约是未进行接枝聚合直接修饰磺酸基得到的(pGMA-SO3-)介质的2.8倍。利用本实验室冻存的含重组质粒pET28a-EGFP的大肠杆菌表达EGFP包含体,用不同电荷密度的带负电的微球用于促进EGFP包含体复性,结果表明,复性收率及复性速率均随着电荷密度的增大而提高,且同电荷介质抑制蛋白质聚集的作用与尿素具有一定的协同作用。另外,同电荷介质对于包含体蛋白具有一定的纯化作用,能吸附52.8%的杂蛋白,且介质的促进作用还具有一定的重复利用性。(本文来源于《天津大学》期刊2014-06-01)
韩广杰[4](2013)在《核糖核酸酶A包含体高效复性方法的研究》一文中研究指出受二硫键正确生成速率慢和蛋白质聚集的影响,核糖核酸酶A(RNase A)包含体的高浓度复性成为制约RNase A大规模生产的主要因素。因此,本文从促进二硫键形成和抑制蛋白质聚集两方面,研究开发了辅助RNase A包含体高效复性的方法。为了提高RNase A内二硫键正确生成的速率,本研究提出以4-巯基苯乙酸为还原剂(ArSH)、己酰胱胺(HCA)为氧化剂组成新型氧化还原系统(ArSH/HCA)辅助RNase A复性。研究结果显示,相对于传统的氧化还原系统(还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽,GSH/GSSG),ArSH/HCA可以显着加速RNase A的复性,使变性还原的商品RNase A(0.3mg/mL)2h的复性收率达94%,复性速度提高2倍;亦使RNase A包含体(含RNase A0.3mg/mL)3h的复性收率达89%,复性时间缩短了60%。体现出新的氧化还原系统辅助RNase A复性的优势。高浓度RNase A包含体复性时,蛋白质聚集是复性收率低下的主要原因。为了解决这一问题,本研究首先根据本研究室前人发现的同电荷介质通过诱导蛋白质分子在带电介质表面定向排列,从而降低蛋白质聚集促进复性的机理,制备了电荷密度不同的带电介质,考察了它们辅助高浓度RNase A包含体的复性效果。结果显示,带电荷介质可使RNase A包含体(蛋白总浓度为1.4mg/mL,RNase A浓度为0.9mg/mL)的复性收率达63%,较稀释复性收率(49%)提高29%。同时发现,高电荷密度介质在低浓度范围内即可获得显着的辅助复性效果,体现出其在实际应用中的优势。另外,本研究还考察了人工分子伴侣系统(十六烷基叁甲基溴化铵(CTAB)/β-环糊精(β-CD))与新氧化还原系统耦合辅助高浓度RNase A包含体的复性。研究发现,在低脲素浓度(0.8mol/L)时,人工分子伴侣可抑制蛋白质聚集,显着提高RNase A的复性收率,使0.9mg/mL RNase A(包含体蛋白质浓度为1.4mg/mL)复性收率达77%,较稀释复性收率(49%)提高57%。而在高脲素浓度(1.6mol/L)和高包含体浓度(总蛋白质为2.3mg/mL,RNase A浓度为1.5mg/mL)时,不仅复性收率可达62%,而且CTAB还有选择性沉淀杂质蛋白质、纯化RNase A的作用,使RNase A包含体纯度从复性前的65%提高至复性后的87%。上述研究结果对实现高浓度RNase A包含体的高效复性和纯化具有实际指导意义。(本文来源于《天津大学》期刊2013-06-01)
张淑芳,张应爱,王顺兰,肖敬川,黄邓高[5](2013)在《非肌球蛋白重链9相关疾病大家系患者中性粒细胞包含体特点分析》一文中研究指出目的分析一非肌球蛋白重链9相关疾病(MYH9-RD)大家系患者中性粒细胞包涵体的形态和结构特点,阐明MYH9-RD中性粒细胞包涵体形成的特点,以探讨MYH9-RD中性粒细胞包涵体的致病机制。方法应用光学显微镜(瑞姬染色)和电子显微镜观察中性粒细胞包涵体形态和超微结构特点;应用间接免疫荧光复染技术观察MYH9-RD患者与正常对照者之间非肌性肌球蛋白IIA(NMMHC-IIA)在胞浆中的分布情况。结果光学显微镜和电子显微镜下可见中性粒细胞中明显的包涵体,形态多样,大多位于细胞边缘;间接免疫荧光复染技术显示患者和正常人之间NMMHC-IIA在中性粒细胞中的分布有差异,中性粒细胞胞浆中存在明显绿色荧光的包涵体,其形态和轮廓与瑞一姬氏染色显示的包涵体形状、大小基本一致,但更为清晰;正常对照的粒细胞胞浆中未见包涵体。结论光学显微镜和电子显微镜进一步确认了家系患者包涵体的存在。免疫荧光技术显示患者和正常人之间NMMHC-IIA在中性粒细胞中的分布有差异;MYH9-RD患者中性粒细胞包涵体的主要构成成份是NMMHC-IIA;包涵体的形态结构复杂多样可能与本家系临床表型复杂多样有关,该家系对进一步揭示MYH9-RD的致病机制具有重要的意义。(本文来源于《中国实验诊断学》期刊2013年01期)
刘建荣,王慧,赵晓瑜,静天玉[6](2011)在《化学渗透法破碎基因重组E.coli提取重组人SOD包含体和复性》一文中研究指出以化学渗透法破碎重组大肠杆菌细胞释放重组人超氧化物歧化酶(rhSOD)包含体并对其复性。选择四种化学试剂(Triton X-100、EDTA、NaOH和SDS)对rhSOD重组大肠杆菌细胞进行破碎实验,以SDS-PAGE检测破菌效果,结果0.5%Triton X-100和10 mmol·L-1 EDTA可以较好地破碎重组大肠杆菌细胞,所提取的包含体溶解液纯度与超声法相近,可达65%左右。采用透析法复性包含体,尿素终浓度0.1 mol·L-1时rhSOD包含体复性效果优于1.0 mol·L-1,比活分别为:Triton法2800 U·mg-1,EDTA法3200 U·mg-1,超声法2800 U·mg-1,复性rhSOD纯度达85%左右。本研究建立的用于破碎重组大肠杆菌释放rhSOD包含体的Triton法和EDTA法,包含体复性后比活等于或高于超声法,与机械破菌法相比,简便有效,成本低廉,无需特殊破菌设备,为放大规模破菌提取重组大肠杆菌包含体和复性奠定了实验基础。(本文来源于《高校化学工程学报》期刊2011年01期)
马骄,俞丹,毛萌[7](2010)在《丝酶抑制蛋白与丝酶抑制蛋白包含体家族性脑病》一文中研究指出神经丝酶抑制蛋白(neuroserpin,NSP)是组织型纤维蛋白溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activator,tPA)在神经系统中的特异性抑制剂,主要参与并调节学习、记忆及行为等活动,在神经发育及重塑中发挥着重要作用。N S P在缺血性脑损伤及癫痫发生时具有神经保护作用。N S P突变体可以导致一种常染色体显性遗传性痴呆,即N S P包含体家族性脑病(familial encephalopathy with neuroserpin inclusion bodies,FENIB)。本文就该病发生的分子结构基础,突变型和表现型之间的对应关系,以及治疗进展叁方面进行综述。(本文来源于《生命的化学》期刊2010年05期)
陈宇萍,乔媛媛,解鹏,何立东,王琰[8](2010)在《抗RBC/HBsAg ds-diabody包含体复性条件的优化》一文中研究指出目的优化以包含体形式表达的抗RBC/HBsAg ds-diabody的复性条件。方法在大肠杆菌BL21/λDE3中诱导表达抗RBC/HBsAg ds-diabody,收获包含体,变性后,分别经透析复性和稀释复性方法复性,并以两种特异性结合活性检测复性效果,对pH值、复性时间和温度进行优化。结果包含体经变性后,pTH-dsR30KD特异蛋白占总蛋白的85%,pTdsR-H30KD特异蛋白占总蛋白的96%;ds-diabody抗体以稀释复性效果较好;在碱性(pH8.8~10)、低温(4℃)条件下复性72h效果最好。结论优化了抗RBC/HBsAg ds-diabody包含体的复性条件。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2010年09期)
周欣[9](2010)在《包含体蛋白质的分离与复性研究概况》一文中研究指出本文概述了近年来包含体分离和复性方面的研究结果,总结了包含体的形成、分离、纯化和复性条件,展望了该领域的研究前景。(本文来源于《科技信息》期刊2010年20期)
韩广杰[10](2010)在《氧化还原体系对RNaseA包含体复性的影响》一文中研究指出在含二硫键蛋白质复性的过程中,二硫键的正确形成通常是复性的限速步骤,二硫键的错误形成也是引起蛋白质聚集而导致复性收率低下的重要原因。为了开发辅助含二硫键蛋白质高效复性的方法,本研究将两种具有辅助二硫键快速生成功能的小分子4-巯基苯乙酸(ArSH)和己酰胱胺(HCA)组合成为新型的氧化还原系统(ArSH/ HCA),以RNase A为模型蛋白进行复性条件的优化,最终将优化的条件应用于RNase A包含体复性,并就复性效果与传统的氧化还原系统进行了比较。经优化确定的最佳复性条件为在pH8.3 Tris- acetate溶液中,内含0.4M urea,1 mM EDTA,1 mM ArSH,0.25 mM HCA,可使0.3 mg·mL~(-1)在上述工作的基础上,结合RNase A包含体复性实际情况进一步对复性条件进行优化之后,在pH8.3 Tris- acetate溶液中,内含1 M urea,1 mM EDTA,4 mM ArSH,0.5 mM HCA的条件下,复性1 h可使0.3 mg·mLRNase A复性3 h达到复性平衡,最终复性收率达到92%。若其它条件相同,以传统氧化还原体系(1 mM GSH/0.25 mM GSSG)辅助相同浓度的RNase A复性时,达到复性平衡需6 h,最终复性收率仅为65%。-1RNase A包含体复性收率达50%,5h复性达到平衡,最终复性收率约70%。而以GSH/GSSG、GSH/HCA为氧化还原体系复性RNase A包含体,复性速度很慢,活性低于35%。虽然在ArSH/GSSG辅助下RNase A包含体最终的复性收率也能达到60%,但是复性平衡时间为7 h。本文开发的复性方法较前人的工作得到了明显改善,RNase A浓度从0.12 mg mL~(-1)提至0.3 mg mL~(-1),复性平衡时间从24 h降至5 h,复性收率从50%提高至70%,基本实现了高收率,高浓度、快速的复性效果。(本文来源于《天津大学》期刊2010-06-01)
包含体论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
通过使用管式离心机替代转子离心机对rh G-CSF(赛格力)包含体处理工艺进行改进,使4个亚批次处理的包含体合并为1个批次进行处理,操作时间缩短4倍。通过改进前后的质量对比研究发现,本工序变性蛋白的纯度、内毒素及残余DNA与原工艺相比均无明显差异,且符合企业质量要求,而人工和动力成本下降了75%。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
包含体论文参考文献
[1].阮东,郭丽蕊,王芳,袁凡恩,陈谦学.铜离子代谢结构域包含体1对胶质瘤细胞增殖与凋亡的作用与机制研究[J].中国医药导报.2017
[2].刘建飞,匡瑾瑾,傅晖.rhG-CSF包含体处理工艺改进[J].上海医药.2017
[3].陈然.同电荷介质促进EGFP包含体复性的研究[D].天津大学.2014
[4].韩广杰.核糖核酸酶A包含体高效复性方法的研究[D].天津大学.2013
[5].张淑芳,张应爱,王顺兰,肖敬川,黄邓高.非肌球蛋白重链9相关疾病大家系患者中性粒细胞包含体特点分析[J].中国实验诊断学.2013
[6].刘建荣,王慧,赵晓瑜,静天玉.化学渗透法破碎基因重组E.coli提取重组人SOD包含体和复性[J].高校化学工程学报.2011
[7].马骄,俞丹,毛萌.丝酶抑制蛋白与丝酶抑制蛋白包含体家族性脑病[J].生命的化学.2010
[8].陈宇萍,乔媛媛,解鹏,何立东,王琰.抗RBC/HBsAgds-diabody包含体复性条件的优化[J].中国生物制品学杂志.2010
[9].周欣.包含体蛋白质的分离与复性研究概况[J].科技信息.2010
[10].韩广杰.氧化还原体系对RNaseA包含体复性的影响[D].天津大学.2010