导读:本文包含了胶质化论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细胞,星形,胶质,视网膜,炎症,眼压,受体。
胶质化论文文献综述
王中琳,席加秋,付强[1]（2017）在《复健片干预实验性脑梗死大鼠脑组织明胶酶的表达及对星形细胞胶质化的影响》一文中研究指出目的观察高、中、低叁种剂量复健片治疗实验性脑梗死大鼠过程中对脑组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属白酶-9(MMP-9)表达的变化,探讨复健片对星形细胞胶质化的影响。方法用Tamura法对右侧近端大脑中动脉进行电凝术以制备MCAO大鼠模型。按随机法将45只大鼠分为中药组、模型组以及假手术组,中药组又因复健片灌胃剂量的不同,分为中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组,其他两组予等量的蒸馏水。以上各组均为9只。3组MCAO大鼠分别在给药1周、2周、4周时处死后取脑组织,用酶联免疫吸附法测定大鼠脑组织MMP-2、MMP-9的表达。结果中药组治疗第2周和4周较1周比较,有统计学意义(P<0.05),与模型组同期比较有统计学意义(P<0.05),中药中剂量组较之同期高剂量组和低剂量组作用更为显着,尤其以第4周时最为明显。结论复健片改善实验性脑梗死大鼠神经修复的内环境,激活其内修复机制,通过上调MMP-2、MMP-9的表达而抑制星形细胞过度胶质化,以促进神经功能的重塑,是复健片治疗脑梗死的作用机制之一。(本文来源于《中西医结合心脑血管病杂志》期刊2017年12期）
张梅娟[2]（2016）在《Notch1信号对脂多糖刺激后未成熟星形细胞胶质化的调控机制研究》一文中研究指出脑白质损伤(white matter damage, WMD)是早产儿脑损伤最常见的类型。宫内感染、炎症,可引起神经胶质细胞的损伤,是导致早产儿脑白质损伤的重要原因,宫内感染后脑内炎症反应影响未成熟星形细胞的增殖和胶质化是脑白质损伤关键因素之一,Notch1/Hes (Hairy enhallcer of spli信号可能参与宫内感染/炎症后未成熟星形细胞的增殖和胶质化机制。目的：研究脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)刺激后Notch1信号对未成熟星形细胞胶质化的调控作用及对胶质纤维酸性蛋白(Glail fibrillary acidic protein, GFAP)基因启动子区STAT3结合位点CpG岛甲基化水平的影响,从细胞分化角度进一步阐明官内感染/炎症导致早产儿脑白质损伤的机制。方法：1.取胎鼠脑组织行细胞培养,免疫荧光法检测(GFAP+/BrdU+(5-溴脱氧尿嘧啶核苷,5-Bromo-2-deoxyUridine)及荧光定量RT-PCR法(realtime fluorescence quantitative PCR,QPCR)检测星形细胞增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen, PNCA)、增殖细胞核抗原Ki67 (nuclcar-associated antigen Ki67, Ki67)的表达变化,同时荧光定量RT-PCR法检测LPS刺激后Notch1、Notch1细胞内区域(Notch intracellulardomains, NICD)及Hes1、Hes5在星形胶质细胞的表达变化特点。2.以Notch1 ICD-pEGFP载体转染星形胶质细胞增强Notch1信号通路下游信号的表达,以及构建Notch1 siRNA转染星形胶质细胞,采用RNA干扰(RNAi)技术抑制Notch1基因的表达,此外予MW167干预后荧光定量RT-PCR法检测Notch1、ICD及Hes1、Hes5在星形胶质细胞的表达变化。免疫荧光法检测GFAP+/BrdU+以及QPCR检测星形细胞PNCA、Ki67的表达变化。3.予LPS刺激未成熟星形细胞,构建不同质粒载体转染,对星形细胞Notchl信号予过表达,研究星形细胞GFAP基因启动子区STAT3结合位点CpG岛甲基化水平变化。结果：1.LPS(5ug/ml)刺激星形细胞后, GFAP+/BrdU+细胞数较对照组增加(P<0.05)；QPCR检测PCNA、Ki67 mRNA的相对表达量均增加(P<0.05)。随时间增加,Notch1-ICD、Hesl、Hes5 mRNA的表达量均上调(P<0.05)。Notchl、ICD、Hesl、 Hes5蛋白的表达量均上调(P<0.05)。2. LPS (5ug/ml)刺激时,若上调Notchl,可以提高GFAP+/BrdU+的比例(P<0.05); Notchl-ICD、PCNA、Ki67、Hes1、Hes5 mRNA全部都上调(P<0.05); Notch1、 ICD、PCNA、Ki67、Hes1、Hes5蛋白的表达全部上调(P<0.05); cck8增加(P<0.05)。3. LPS (5ug/ml)刺激时,若下调Notchl,可以降低GFAP+/BrdU+的比例(P<0.05); Notchl-ICD、PCNA、Ki67、Hes1、Hes5 mRNA全部都下调(P<0.05); Notchl. ICD、PCNA、Ki67、Hes1、Hes5蛋白的表达全部下调(P<0.05)；cck8减少(P<0.05)。4. Notch1 ICD过表达组较阴性对照组细胞来看,甲基化程度明显降低(P<0.05)。结论：1.LPS刺激促进星形胶质细胞的增殖和胶质化。2.LPS刺激促进Notch1及其下游信号Hes1、Hes5的表达。3.LPS刺激后,Notch1信号通路能正调控星形细胞的增殖及胶质化,有可能通过其下游信号通路Hes1、Hes5发挥作用。4.LPS刺激后Notch1信号对未成熟星形细胞增殖和胶质化行为的调控,可能通过调控GFAP基因启动子区STAT3结合位点CpG岛去甲基化过程。(本文来源于《浙江大学》期刊2016-04-01）
胡凌云,张建英,林宏,苟林,林涛[3]（2015）在《脊髓损伤模型大鼠星形胶质化形成与Akt/mTOR/p70S6K信号通路的激活》一文中研究指出背景:既往研究集中于如何促进大鼠脊髓损伤后的神经再生,但对于如何抑制脊髓损伤后星形胶质细胞过度增殖反应的因素、从而改善神经再生的环境研究尚少。目的:观察Akt/m TOR/p70S6K蛋白激酶信号转导通路对大鼠脊髓损伤后反应性星形胶质化形成的影响,从而为改善脊髓损伤后神经再生环境、修复脊髓损伤提供分子学机制依据。方法:建立SD大鼠轻型脊髓损伤模型,分为4组:实验组造模后行ATP治疗7 d;对照组造模后行等量生理盐水治疗7 d;干预组造模后行等量的ATP联合雷帕霉素治疗7 d;假手术组椎板切除后行等量生理盐水治疗7 d。分别于造模后1,3,7,14 d采用免疫组化、Western blot法检测Akt、p-Akt、m TOR、p-m TOR、p70S6K、p-p70S6K、胶质纤维酸性蛋白表达变化,并采用BBB运动功能评分评价大鼠脊髓损伤后经不同方法治疗后运动功能的恢复情况。结果与结论:假手术组大鼠脊髓中Akt/m TOR/p70S6K信号通路分子呈低水平表达,在脊髓损伤后其表达增加。外源性ATP可显着增强大鼠受损脊髓中Akt/m TOR/p70S6K信号分子的表达,而雷帕霉素可明显抑制ATP诱导的表达上调。激活的Akt/m TOR/p70S6K信号通路可显着减弱受损脊髓组织中胶质纤维酸性蛋白的表达、抑制脊髓损伤后过度的星形胶质细胞增生反应,促进脊髓损伤后BBB运动功能评分增加,而雷帕霉素阻碍了由ATP诱导的上述效应。结果证实,ATP通过诱导Akt/m TOR/p70S6K信号通路激活抑制大鼠脊髓损伤后星形胶质瘢痕的形成,具有改善脊髓损伤后神经再生环境、促进脊髓损伤修复和改善神经功能的潜能,此信号通路是治疗脊髓损伤的重要干预环节。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2015年05期）
费菲,赵海,马海伟[4]（2014）在《视网膜Müller细胞的胶质化激活在实验性青光眼大鼠模型中的作用——复旦大学神经生物学研究所杨雄里院士访谈录》一文中研究指出怎样把基础研究成果、技术与临床问题更紧密地结合起来?在京召开的第六届中国眼科学基础研究大会暨研究生导师论坛上,杨雄里院士开门见山地谈到了他近年来一直思考的这一问题和最大心愿。他所做的"慢性高眼压大鼠视网膜Müller细胞胶质化激活及其机制"的研究报告,反映了他和同事们在这方面所取得的一些成果。这一项目也包含了复旦大学神经生物学研究所研究人员(基础)和复旦大学附属眼耳鼻喉科医院孙兴怀院长(临床)共同合作的出色成果。(本文来源于《中国医药科学》期刊2014年09期）
苏吉儿[5]（2013）在《Müller细胞反应性胶质化在急性高眼压致大鼠视网膜损伤中作用》一文中研究指出青光眼是一种常见的致盲性眼病，其病理基础是视网膜神经节细胞(RGCs)及其神经纤维的丧失。多种因素与其发病有关，其中病理性高眼压可以造成视网膜的缺血低氧性损伤并导致RGCs最终主要以凋亡的形式丢失。RGCs凋亡在青光眼的病理损害中起重要作用，因此研究具有抗凋亡作用的RGCs保护药物，对青光眼的防治有重要意义。视网膜Müller细胞是视网膜内最主要的神经胶质细胞，不仅起着支持和营养神经元的作用，还有维持细胞外离子的稳定及参与谷氨酸盐循环、突触传递等作用。此外，Müller细胞参与RGCs的代谢、内环境稳态以及神经递质的运输、摄取，因此它在RGCs的生长、损伤、修复和再生中都起到重要的作用。最新研究发现，Müller细胞参与多种病理和生理过程，并且在视网膜的多种疾病中都发现Müller细胞的活化，即反应性胶质化(Reactivegliosis)。中间丝蛋白胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)高表达致胞体肥大是Müller细胞活化最主要的特征性改变。本实验利用前房灌注升高眼内压的方法建立急性高眼压(AOH)动物模型，探讨视网膜Müller细胞在急性高眼压大鼠视网膜中的活化情况，以及抑制其反应性胶质化对高眼压视网膜的影响，为青光眼患者神经保护的治疗提供实验依据。实验在室温20-22oC下进行，选用成年雄性SD大鼠(8-10W,200-250g)，动物实验操作遵循美国视觉与眼科学研究会(ARVO)有关眼科和视觉科学实验动物使用规范，并得到首都医科大学动物管理委员会的许可。所用药物为胶质毒素α-氨基己二酸(AAA)，给药方式是玻璃体内注射5μl (50μg/μl)，其能选择性抑制Müller细胞反应性胶质化。实验动物分组如下：正常对照组(Ctrl)、急性高眼压(AOH，14.63kPa)1h后再灌注1、3和5d组、急性高眼压+给药(AOH+AAA)后再灌注1、3和5d组、单纯AAA给药及AOH+PBS对照组。造模后不同时间点，GFAP免疫荧光染色观察Müller细胞反应性胶质化程度，TdT介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色检测细胞凋亡情况，Thy-1染色标记视网膜RGCs细胞，蛋白免疫印迹(Western blot)方法检测视网膜肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的蛋白表达水平。实验数据使用单一因素方差分析(One way ANOVA)和Bonferroni显着性检验进行统计学处理，数值以均数±标准误(X±SEM)表示，其中p<0.05为差异显着。实验结果如下：1. AOH对大鼠视网膜的影响应用Hochest荧光染料标记视网膜内细胞核的结果表明，AOH(14.63kPa,1h)后再灌注1、3和5d组大鼠眼视网膜内丛状层(IPL)和内核层(INL)均显着变薄，且随再灌时间延长，损伤加重(P<0.05,每组n=4)。同时，再灌注3和5d组神经节细胞层(GCL)和INL细胞排列紊乱，GCL细胞核数目明显减少。GFAP免疫组化检测结果示，正常大鼠视网膜内Müller细胞不表达或很少表达GFAP；AOH后再灌注1d，Müller细胞开始表达GFAP，再灌注3-5d后，视网膜内Müller细胞GFAP表达增加显着，甚至贯穿视网膜全层(P<0.05,每组n=4)。结果提示，AOH确实引起视网膜损伤，并诱发Müller细胞反应性胶质化，即急性闭角型青光眼造模成功。2. AAA对AOH鼠视网膜内Müller细胞反应性胶质化的影响与AOH组相应再灌注时间点相比，应用玻璃体内注射AAA(5μl,50μg/μl)抑制Müller细胞反应性胶质化，即AOH+AAA组，可明显抑制视网膜Müller细胞内GFAP的表达(P<0.05,每组n=4)，但对GFAP在星形胶质细胞的表达没有明显影响。此外，AOH+PBS组视网膜内GFAP的表达与高眼压组相近，排除了溶剂干扰。结果提示，AAA确实可以选择性抑制AOH鼠视网膜内Müller细胞反应性胶质化的发生。3. AAA对AOH鼠视网膜损伤的影响与Ctrl和单纯AAA组(未见凋亡细胞)相比，AOH可引起视网膜GCL层凋亡细胞(TUNEL阳性)显着增加，而AOH+AAA组凋亡细胞数明显减少(P<0.05,每组n=4)。与Ctrl组相比，AOH引起视网膜内RGCs细胞(Thy-1阳性)大量丢失，而AOH+AAA组RGCs的丢失有所减轻(P<0.05,每组n=4)。应用Hochest染色观察视网膜形态，AOH+AAA组缓解了AOH所引起的视网膜厚度变薄、细胞核排列紊乱及视网膜GCL层细胞数目的减少。结果提示，应用AAA抑制Müller细胞反应性胶质化的发生，可对AOH鼠视网膜起到保护作用。4.抑制Müller细胞反应性胶质化对AOH鼠视网膜内TNF-α表达的影响Western blot结果表明，AOH处理后5d，视网膜内TNF-α蛋白的表达量明显高于Ctrl组，而AOH+AAA组视网膜内TNF-α蛋白表达水平较AOH组显着降低(P<0.05,每组n=4)。同时，AOH+PBS组视网膜内TNF-α蛋白的表达水平与AOH组相近，即可排除溶剂干扰。结果提示，AAA抑制Müller细胞反应性胶质化可能是通过降低视网膜内TNF-α蛋白的表达，来减少其对RGCs细胞的毒性作用，从而促进神经节细胞的存活。综上所述，我们的研究结果表明，Müller细胞反应性胶质化参与了AOH所致视网膜损伤，应用AAA抑制Müller细胞反应性胶质化可降低视网膜内TNF-α蛋白的表达水平，从而有效保护高眼压视网膜。所获成果丰富了人们对AOH致视网膜损伤的分子机制，同时为临床改善急性闭角型青光眼视网膜病变提供了一种有效治疗方法。(本文来源于《首都医科大学》期刊2013-04-01）
苏吉儿,丁静文,韩松,罗宏,李俊发[6]（2013）在《Müller细胞反应性胶质化在急性高眼压致大鼠视网膜损伤中作用》一文中研究指出目的观察Müller细胞反应性胶质化在急性高眼压(AOH)大鼠视网膜中变化及其抑制对视网膜损伤的影响。方法建立大鼠AOH青光眼模型,分为正常对照(Ctrl)、AOH和AOH+玻璃体内注射胶质毒素α-氨基己二酸(AAA)后再灌注1、3和5d组,以及单纯AAA和AOH+PBS对照组。TUNEL染色检测细胞凋亡,GFAP免疫荧光染色反应Müller细胞反应性胶质化程度,Thy-1染色标记视网膜神经节细胞(RGCs)。结果 AOH可致大鼠视网膜内丛状层和内核层明显变薄、神经节细胞层内细胞排列紊乱和数量减少,并诱发Müller细胞反应性胶质化(GFAP表达增加)。同时,AAA抑制Müller细胞反应性胶质化可明显缓解AOH所致RGCs丢失和凋亡发生。结论 Müller细胞反应性胶质化参与AOH所致视网膜损伤,抑制其反应性胶质化可能是改善高眼压性青光眼视网膜病变的一种有效治疗方法。(本文来源于《基础医学与临床》期刊2013年02期）
袁天明,俞惠民,顾伟忠[7]（2012）在《TP-EGCG对感染/炎症时未成熟星形细胞的增殖和胶质化行为的作用机制研究》一文中研究指出目的研究TP-EGCG对感染/炎症后未成熟星形细胞增殖和胶质化行为的作用及这一作用是否影响炎症信号及Notch1信号。方法以LPS(5μg/mL)刺激1天和3天,同时予TP-EGCG干预后,免疫荧光法检测GFAP~+/BrdU~+表达变化;以及荧光定量RT-PCR法检测星形细胞TLR-4、NF-κB以及细胞因子(TNF-α、IL-1β、MIP-1α、MIP-1β)mRNA的表达变化和Notch1、Hes1、Hes5 mRNA的表达变化。结果予TP-EGCG干预后星形细胞GFAP~+/BrdU~+细胞数较LPS组下降(P<0.05),且与对照组比(本文来源于《中华医学会第十七次全国儿科学术大会论文汇编（下册）》期刊2012-09-13）
袁天明,俞惠民,顾伟忠[8]（2012）在《TP-EGCG对感染/炎症时未成熟星形细胞的增殖和胶质化行为的作用机制研究》一文中研究指出目的研究TP-EGCG对感染/炎症后未成熟星形细胞增殖和胶质化行为的作用及这一作用是否影响炎症信号及Notch1信号。方法以LPS(5μg/mL)刺激1天和3天,同时予TP-EGCG干预后,免疫荧光法检测GFAP+/BrdU+表达变化;以及荧光定量RT-PCR法检测星形细胞TLR-4、NF-κB以及细胞因子(TNF-α、IL-1β、MIP-1α、MIP-1β)mRNA的表达变化和Notch1、Hes1、Hes5 mRNA的表达变化。结果予TP-EGCG干预后星形细胞GFAP+/BrdU+细胞数较LPS组下降(P<0.05),且与对照组比较差异不明显(P>0.05)。LPS组与LPS+EGCG组比较星形细胞TLR-4mRNA表达差异无意义(P>0.05),但两组比较星形细胞NF-κBp65 mRNA表达减少均差异有意义(P<0.05),而两组比较星形细胞TNF-α、IL-1β、MIP-1α、MIP-1βmRNA表达差异均无意义(P>0.05)。LPS组与LPS+EGCG组星形细胞Notch1、Hes1 mRNA表达差异有意义(P<0.05),但两组比较星形细胞Hes5 mRNA表达差异无意义(P>0.05)。结论 TP-EGCG对LPS刺激3天后的星形细胞增殖能力有一定的改变,但对TLR-4mRNA及细胞因子的表达变化影响不明显,TP-EGCG对感染/炎症时星形细胞NF-κBp65 mRNA表达抑制有改善作用,而且TP-EGCG对感染/炎症条件下星形细胞的Notch1、Hes1 mRNA的表达减少有影响。(本文来源于《2012年浙江省妇产科学及围产医学学术年会暨《妇产科常见疾病规范化治疗新进展》及《围产医学热点追踪》学习班论文集》期刊2012-05-31）
袁天明,俞惠民,顾伟忠[9]（2011）在《感染/炎症对未成熟脑星形细胞增殖和胶质化行为的研究》一文中研究指出目的探讨感染/炎症对未成熟星形细胞增殖和胶质化的影响以及TLR-4、NF-κBp65和细胞因子(TNF-α、IL-1β)的表达特点以及Notch1信号的表达变化。方法以不同浓度脂多糖(LPS:1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL)刺激不同时间(1、3、7天)后,免疫荧光法检测星形细胞GFAP+/BrdU+的表达变化,观察星形细胞增值活性的变化,ELISA法检测星形细胞培养液细胞因子(TNF-α、IL-1β)浓度变化,同时荧光定量RT-PCR法检测LPS刺激后星形细胞TLR-4、NF-κB以及细胞因子(TNF-α、IL-1β)的表达变化,以及Notch1、Hes1、Hes5 mRNA的表达变化。结果 LPS(10μg/mL)刺激早期GFAP+/BrdU+细胞数与对照组比较减少(P<0.05),而LPS(5μg/mL)刺激后GFAP+/BrdU+细胞数较对照组增加(P<0.05)。LPS(5μg/mL)刺激早期星形细胞培养液TNF-α、IL-1β浓度较对照组升高明显(P<0.05)。LPS(1μg/mL)刺激1天时星形细胞TLR-4mRNA表达较对照组降低明显(P<0.05),而LPS(5μg/mL)刺激3天时星形细胞TLR-4 mRNA表达升高(P<0.05)。LPS(1μg/mL)刺激3天时星形细胞NF-κBp65 mRNA表达减少(P<0.05),而LPS(5μg/ml和10μg/mL)刺激7天时NF-κBp65 mRNA表达均较对照组升高(P<0.05)。LPS(1μg/mL)刺激后星形细胞Notch1 mRNA表达较对照组下降(P<0.05),但LPS(10μg/mL)刺激1天、LPS(5μg/mL)刺激7天时Notch1 mRNA表达升高(P<0.05)。LPS(10μg/mL)刺激1天、LPS(1μg/mL)刺激7天时Hes1 mRNA表达减少(P<0.05),而LPS(1μg/mL)刺激早期星形细胞Hes5 mRNA表达增加与对照组比较有明显差异(P<0.05)。结论不同的感染/炎症条件下对未成熟星形细胞的增值活性影响是不同的,LPS刺激后星形细胞细胞因子(TNF-α、IL-1β)存在短暂的表达增加现象,且不同的感染/炎症条件下TLR-4/NF-κB及Notch1/Hes信号的表达特点是不同的。(本文来源于《2011年浙江省医学会儿科学分会学术年会暨儿内科疾病诊治新进展国家级学习班论文汇编》期刊2011-07-07）
袁天明[10]（2011）在《宫内感染/炎症后未成熟脑星形细胞胶质化的作用及机制研究》一文中研究指出脑白质损伤(White matter damage, WMD)是早产儿最重要的脑损伤,其病理特点主要是脑白质损伤部位出现反应性星形细胞胶质化、小胶质细胞浸润、少突胶质细胞损伤和髓鞘损害以及轴突损伤等。宫内感染/炎症、早产和早产儿脑白质密切相关,而且神经胶质细胞和炎症信号在宫内感染/炎症导致的脑损伤中起重要作用。宫内感染后脑内炎症反应影响未成熟星形细胞的增殖和胶质化是脑白质损伤的关键之一,Toll-like受体-4(TLR-4)/核因子κB (NF-κB)信号和Notch1/Hes信号可能参与宫内感染/炎症后未成熟星形细胞的增殖和胶质化机制。本研究通过建立宫内感染的大鼠模型,研究官内感染/炎症后未成熟脑星形细胞增殖和胶质化的时空性；以及通过星形细胞培养,研究感染/炎症对未成熟星形细胞增殖和胶质化的影响和TLR-4/NF-κB及Notch1/Hes信号是否参与这一过程；而且予茶多酚(TP-EGCG)干预,探讨TP-EGCG对感染/炎症后未成熟星形细胞增殖和胶质化行为的作用及是否影响星形细胞TLR-4/NF-κB及Notch1/Hes信号等,从炎症和发育信号角度进一步说明宫内感染/炎症后未成熟星形细胞的损伤机制,为将来防治早产儿脑白质损伤提供理论依据。目的：研究宫内感染/炎症后不同时间脑内不同部位(脑室旁白质、海马、胼胝体和皮层)星形细胞的增殖特点,探讨感染／炎症对未成熟星形细胞增殖和胶质化的影响以及TLR-4、NF-κBp65和细胞因子(TNF-α、IL-1β、MlP-1α、MIP-1β等)的表达特点以及Notch1信号的表达变化,研究TP-EGCG对感染/炎症后未成熟星形细胞增殖和胶质化行为的作用及这一作用是否影响炎症信号及Notch1信号。方法：1.动物模型：宫内感染组孕15天母鼠宫颈左右两侧各注射大肠杆菌稀释液0.2 mL,对照组注入等量生理盐水。取新生1、3、7、14、21日龄大鼠脑组织,测定各时点仔鼠体重、脑重,苏木素-伊红(HE)染色和免疫组化方法研究新生1、3、7、14、21日龄大鼠脑白质组织病理特点和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达变化。2.星形细胞培养：不同浓度脂多糖(LPS:1μg/mL.5μg/mL,10μg/mL)刺激不同时间(1、3、7天)后,免疫荧光法检测星形细胞GFAP+/BrdU+的表达变化,观察星形细胞增殖活性的变化,ELISA法检测星形细胞培养液细胞因子(TNF-a、IL-1β, IL-10等)浓度变化,同时荧光定量RT-PCR法检测LPS刺激后星形细胞TLR-4. NF-κB以及细胞因子(TNF-a、IL-1β、MIP-lα、MIP-1β) mRNA的表达变化,以及Notch1、Hes1、Hes5 mRNA的表达变化。3. TP-EGCG干预：以LPS (5μg/mL)刺激1天和3天,同时予TP-EGCG干预后,免疫荧光法检测GFAP＋/BrdU＋表达变化；以及荧光定量RT-PCR法检测星形细胞TLR-4、NF-κB以及细胞因子(TNF-a、IL-1β、MIP-1a、MIP-1β) mRNA的表达变化和Notchl、Hes1、Hes5 mRNA的表达变化。结果：1.宫内感染组子宫及胎盘内血管充血、水肿,并见大量中性粒细胞浸润,宫内感染组新生1日龄(P1)仔鼠体重和脑重均较同日龄对照组减轻(P<0.05)。宫内感染组与对照组P1和P3大鼠仅脑室旁脑白质区可见少许GFAP阳性细胞,两组比较差异无显着意义(P>0.05)；官内感染组P7大鼠脑室旁白质区和海马区GFAP阳性细胞胞浆明显、突起增多,细胞数量多于对照组(P<0.05)；宫内感染组P14大鼠脑室旁白质、肼胝体和皮层区GFAP阳性细胞数量多于对照组(P<0.01)；两组P21大鼠各脑区GFAP阳性细胞数均无显着差异(P>0.05)。2. LPS(10μg/mL)刺激早期GFAP+/BrdU+细胞数与对照组比较减少(P<0.05),而LPS(5μg/mL)刺激后GFAP+/BrdU+细胞数较对照组增加(P<0.05)。LPS(5μg/mL)刺激早期星形细胞培养液TNF-αIL-1β浓度较对照组升高明显(P<0.05)。LPS (lμg/mL)刺激1天时星形细胞TLR-4 mRNA表达较对照组降低明显(P<0.05),而LPS (5μg/mL)刺激3天时星形细胞TLR-4 mRNA表达升高(P＜0.05)。LPS (lμg/mL)刺激3天时星形细胞NF-κBp65 mRNA表达减少(P<0.05),而LPS(5μg/ml和10μg/mL)刺激7天时NF-κBP65 mRNA表达均较对照组升高(P<0.05)。LPS (1μg/mL)刺激后星形细胞Notch1 mRNA表达较对照组下降(P<0.05),但LPS (10μg/mL)刺激1天、LPS (5μg/mL)刺激7天时Notch1 mRNA表达升高(P＜0.05)。LPS (10μg/mL)刺激1天、LPS (lμg/mL)刺激7天时Hesl mRNA表达减少(P<0.05),而LPS (lμg/mL)刺激早期星形细胞Hes5 mRNA表达增加与对照组比较有明显差异(P<0.05)。3.予TP-EGCG干预后星形细胞GFAP+/BrdU+细胞数较LPS组下降(P<0.05),且与对照组比较差异不明显(P>0.05). LPS组与LPS+EGCG组比较星形细胞TLR-4mRNA表达差异无意义(P>0.05),但两组比较星形细胞NF-κBp65 mRNA表达减少均差异有意义(P<0.05),而两组比较星形细胞TNF-a. IL-1p, MIP-lαMIP-1βmRNA表达差异均无意义(P>0.05)。LPS组与LPS+EGCG组星形细胞Notchl、Hesl mRNA表达差异有意义(P<0.05),但两组比较星形细胞Hes5 mRNA表达差异无意义(P>0.05)。结论：1.宫内感染／炎症后未成熟脑不同脑区不同日龄的GFAP表达呈一定的时空性,表明宫内感染／炎症可能改变未成熟脑星形细胞的功能。2.不同的感染／炎症条件下对未成熟星形细胞的增殖活性影响是不同的,LPS刺激后星形细胞细胞因子(TNF-αIL-1β, MIP-1α, MIP-1β, IL-10等)存在短暂的表达增加现象,且不同的感染/炎症条件下TLR-4/NF-κB及Notch1/Hes信号的表达特点是不同的。3. TP-EGCG对LPS刺激3天后的星形细胞增殖能力有一定的改变,但对TLR-4 mRNA及细胞因子的表达变化影响不明显,TP-EGCG对感染/炎症时星形细胞NF-KBp65 mRNA表达抑制有改善作用,而且TP-EGCG对感染/炎症条件下星形细胞的Notch1、Hes1 mRNA的表达减少有影响。(本文来源于《浙江大学》期刊2011-04-01）
胶质化论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
脑白质损伤(white matter damage, WMD)是早产儿脑损伤最常见的类型。宫内感染、炎症,可引起神经胶质细胞的损伤,是导致早产儿脑白质损伤的重要原因,宫内感染后脑内炎症反应影响未成熟星形细胞的增殖和胶质化是脑白质损伤关键因素之一,Notch1/Hes (Hairy enhallcer of spli信号可能参与宫内感染/炎症后未成熟星形细胞的增殖和胶质化机制。目的：研究脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)刺激后Notch1信号对未成熟星形细胞胶质化的调控作用及对胶质纤维酸性蛋白(Glail fibrillary acidic protein, GFAP)基因启动子区STAT3结合位点CpG岛甲基化水平的影响,从细胞分化角度进一步阐明官内感染/炎症导致早产儿脑白质损伤的机制。方法：1.取胎鼠脑组织行细胞培养,免疫荧光法检测(GFAP+/BrdU+(5-溴脱氧尿嘧啶核苷,5-Bromo-2-deoxyUridine)及荧光定量RT-PCR法(realtime fluorescence quantitative PCR,QPCR)检测星形细胞增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen, PNCA)、增殖细胞核抗原Ki67 (nuclcar-associated antigen Ki67, Ki67)的表达变化,同时荧光定量RT-PCR法检测LPS刺激后Notch1、Notch1细胞内区域(Notch intracellulardomains, NICD)及Hes1、Hes5在星形胶质细胞的表达变化特点。2.以Notch1 ICD-pEGFP载体转染星形胶质细胞增强Notch1信号通路下游信号的表达,以及构建Notch1 siRNA转染星形胶质细胞,采用RNA干扰(RNAi)技术抑制Notch1基因的表达,此外予MW167干预后荧光定量RT-PCR法检测Notch1、ICD及Hes1、Hes5在星形胶质细胞的表达变化。免疫荧光法检测GFAP+/BrdU+以及QPCR检测星形细胞PNCA、Ki67的表达变化。3.予LPS刺激未成熟星形细胞,构建不同质粒载体转染,对星形细胞Notchl信号予过表达,研究星形细胞GFAP基因启动子区STAT3结合位点CpG岛甲基化水平变化。结果：1.LPS(5ug/ml)刺激星形细胞后, GFAP+/BrdU+细胞数较对照组增加(P<0.05)；QPCR检测PCNA、Ki67 mRNA的相对表达量均增加(P<0.05)。随时间增加,Notch1-ICD、Hesl、Hes5 mRNA的表达量均上调(P<0.05)。Notchl、ICD、Hesl、 Hes5蛋白的表达量均上调(P<0.05)。2. LPS (5ug/ml)刺激时,若上调Notchl,可以提高GFAP+/BrdU+的比例(P<0.05); Notchl-ICD、PCNA、Ki67、Hes1、Hes5 mRNA全部都上调(P<0.05); Notch1、 ICD、PCNA、Ki67、Hes1、Hes5蛋白的表达全部上调(P<0.05); cck8增加(P<0.05)。3. LPS (5ug/ml)刺激时,若下调Notchl,可以降低GFAP+/BrdU+的比例(P<0.05); Notchl-ICD、PCNA、Ki67、Hes1、Hes5 mRNA全部都下调(P<0.05); Notchl. ICD、PCNA、Ki67、Hes1、Hes5蛋白的表达全部下调(P<0.05)；cck8减少(P<0.05)。4. Notch1 ICD过表达组较阴性对照组细胞来看,甲基化程度明显降低(P<0.05)。结论：1.LPS刺激促进星形胶质细胞的增殖和胶质化。2.LPS刺激促进Notch1及其下游信号Hes1、Hes5的表达。3.LPS刺激后,Notch1信号通路能正调控星形细胞的增殖及胶质化,有可能通过其下游信号通路Hes1、Hes5发挥作用。4.LPS刺激后Notch1信号对未成熟星形细胞增殖和胶质化行为的调控,可能通过调控GFAP基因启动子区STAT3结合位点CpG岛去甲基化过程。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
胶质化论文参考文献
[1].王中琳,席加秋,付强.复健片干预实验性脑梗死大鼠脑组织明胶酶的表达及对星形细胞胶质化的影响[J].中西医结合心脑血管病杂志.2017
[2].张梅娟.Notch1信号对脂多糖刺激后未成熟星形细胞胶质化的调控机制研究[D].浙江大学.2016
[3].胡凌云,张建英,林宏,苟林,林涛.脊髓损伤模型大鼠星形胶质化形成与Akt/mTOR/p70S6K信号通路的激活[J].中国组织工程研究.2015
[4].费菲,赵海,马海伟.视网膜Müller细胞的胶质化激活在实验性青光眼大鼠模型中的作用——复旦大学神经生物学研究所杨雄里院士访谈录[J].中国医药科学.2014
[5].苏吉儿.Müller细胞反应性胶质化在急性高眼压致大鼠视网膜损伤中作用[D].首都医科大学.2013
[6].苏吉儿,丁静文,韩松,罗宏,李俊发.Müller细胞反应性胶质化在急性高眼压致大鼠视网膜损伤中作用[J].基础医学与临床.2013
[7].袁天明,俞惠民,顾伟忠.TP-EGCG对感染/炎症时未成熟星形细胞的增殖和胶质化行为的作用机制研究[C].中华医学会第十七次全国儿科学术大会论文汇编（下册）.2012
[8].袁天明,俞惠民,顾伟忠.TP-EGCG对感染/炎症时未成熟星形细胞的增殖和胶质化行为的作用机制研究[C].2012年浙江省妇产科学及围产医学学术年会暨《妇产科常见疾病规范化治疗新进展》及《围产医学热点追踪》学习班论文集.2012
[9].袁天明,俞惠民,顾伟忠.感染/炎症对未成熟脑星形细胞增殖和胶质化行为的研究[C].2011年浙江省医学会儿科学分会学术年会暨儿内科疾病诊治新进展国家级学习班论文汇编.2011
[10].袁天明.宫内感染/炎症后未成熟脑星形细胞胶质化的作用及机制研究[D].浙江大学.2011
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