导读:本文包含了区域基质论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基质,细胞,区域,蛋白酶,废弃物,骨髓,因子。
区域基质论文文献综述
徐旭敏[1]（2016）在《区域文化基质与文学创作风格的生成——以“京派作家群”创作为例》一文中研究指出在文学创作过程中,区域文化对于作家的影响力是不容忽视的。丹纳在《艺术哲学》中就把艺术家所处的时代环境,包括时代精神和风俗概况看成是文艺产生的基本因素,指出:"要了解一件艺术品,一个艺术家,一群艺术家,必须正确的设想他们所属的时代的精神和风俗概况。这是艺术品最后的解释,也是决定一切的基本原因。"~(1)文学和区域文化的关系,是一种精神血缘的关系。作家的故乡或者是长期的居留地,其所特有的区域性文化通常会对作家的创作具有源头性的影响。从文学史的维度(本文来源于《区域文化与文学研究集刊》期刊2016年00期）
吴琼[2]（2016）在《基质细胞衍生因子促进脂肪干细胞向创伤区域定向迁移的研究》一文中研究指出研究背景由于肿瘤切除、深度烧伤、放射性治疗等导致的组织缺损和各种切口的瘢痕化愈合不仅导致外观畸形和局部功能障碍,还大大降低了病人生活质量,频繁的住院治疗也增加了发病率和死亡率,导致巨大的社会经济损耗。近年来人们都在努力寻求微创化或无瘢痕愈合的治疗方法。当前存在的诸多促修复方案虽然大大提高了创面愈合能力或者减轻了瘢痕的形成,但是还存在一些局限性,如创面覆盖物结合各种细胞因子的疗法价格昂贵且效果有限,组织瓣转移修复导致供区继发损伤和瘢痕遗留,假体填充治疗引起包膜挛缩等等。因此寻找理想的治疗方法促进创面修复以达到愈合组织的解剖重建和功能恢复是一直以来迫切需要解决的问题。随着干细胞研究技术令人鼓舞的革命性进步,在创伤部位有效补充外源性干细胞就成为促进创伤修复的理想策略。干细胞是一类具有多向分化潜能的细胞,在特定的培养条件下可以分化成几种不同类型的细胞(成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌细胞)。到目前为止,干细胞已经被广泛地用于治疗某些疾病。脂肪来源干细胞,主要因其取材方便、可反复获取,发展前景巨大,有望成为最常用的干细胞来源。已有研究证实,脂肪干细胞移植可有效促进创面的修复。2012年,Collawn SS等证实ADSCs可加速创面愈合。随后,亦有研究表明,脂肪干细胞移植可促进扩张皮肤的再生。公认的,干细胞疗法对加强创伤后组织重构和功能恢复具有重要的临床意义,而干细胞在体内的动员与归巢是其发挥作用的关键。干细胞归巢的“归巢”特性是体内干细胞修复损伤组织或替代坏死结构的基础。2004年Chen F等认为干细胞首先被动员从其聚集的组织或器官中移出并进入外周血,感受到指引其归巢的趋化因子浓度梯度,然后按信号指引方向迁移到组织损伤部位并粘附到血管内皮,黏附到血管内皮的干细胞随后要穿过血管壁从而进入靶组织,定植于新的有利于其增殖和免受程序性细胞死亡的微环境中,进一步分化成相关细胞,从而修复缺损组织。为了使移植的干细胞能够最大化被动员到创伤部位参与修复,我们认为首先要选择有利于干细胞存活及迁移的移植途径。目前常用的移植途径主要为局部移植,然而我们认为局部途径植入的干细胞虽然更直接且停留创伤部位的细胞数量更多,但是相比全身途径来说,操作较复杂且细胞植入起始环境差,会导致相当一部分的细胞流失,而且细胞活力会受到很大影响,另外,高密度细胞团在外周组织液中的迁移能力也是有限的。血管内注入的全身途径更有利于干细胞的存活和迁移,因为血液是细胞能够赖以存活的体内环境,不仅提供丰富的营养物质,血管内压力差还提供了促使细胞迁移的动力,但是静脉移植注入的干细胞首先要通过肺循环,肺组织存在丰富的毛细血管网,血流缓慢有利于细胞的贴壁粘附,而且肺组织为干细胞提供给了更适宜生存的氧分压环境,导致循环中大量的干细胞被滞留于肺而难以发挥其有效作用。近年来,有研究表明,动脉移植途径是进行干细胞移植的一条安全有效的途径。Makela T等就在其研究中指出静脉移植干细胞易导致大量的干细胞被滞留于肺而难以发挥其有效作用,而动脉移植有更大的潜能将细胞输送至全身血液循环,最终有效到达细胞疗法的靶器官,然而需要解决的问题是如何更有效地动员并引导循环中的外源性干细胞靶向迁移到待修复组织处。因此,我们想要寻找有效的ADSCs趋化因子。基质细胞衍生因子(SDF-1)由基质细胞产生,也常被称为CXCL12。早期研究者们发现,SDF-1可调节内皮祖细胞向创伤微环境的迁移和归巢,增强创面边缘SDF-1的表达有助于增加内皮祖细胞在创缘的累积,并且加速新生血管化。后来有研究表明,SDF-1也参与调控了外源性移植的骨髓间充质干细胞以及内源性的骨髓间充质干细胞的动员和归巢。然而相关的对于脂肪干细胞(ADSCs)迁移调控方面的研究尚不成熟。近年来有研究者发现,肝损伤可造成局部肝损伤区域SDF-1的表达升高,通过静脉移植的ADSCs可募集在局部肝损伤区域,证明通过血管移植的全身途径是行之有效的干细胞移植方法,且ADSCs向局部损伤部位的迁移可能与SDF-1的调控有关。目的意义本研究的目的在于探究SDF-1对于诱导ADSCs向创伤组织定向趋化迁移的作用,进一步验证通过调控SDF-1的局部浓度控制ADSCs向创伤组织的趋化迁移是否可行,为充分动员ADSCs发挥促修复作用寻找新策略,对于干细胞疗法的广泛应用也具有重要的临床指导意义。方法1.采用改良的酶消化法分离获得SD大鼠ADSCs,经体外培养、传代扩增细胞,倒置显微镜下观察细胞的形态学特征,通过流式细胞检测细胞表面CD29、CD34^ CD45及CD90的表达,体外诱导细胞成脂成骨分化检测其多向分化能力。2.构建携带eGFP基因的慢病毒载体,以经验感染复数MOI=40转染第3代ADSCs,并且分别于转染后的24h、48h、72h、96h时,于荧光显微镜下观察ADSCs的绿色荧光蛋白的阳性表达情况,并于转染一周后,使用流式细胞检测ADSCs的eGFP阳性表达率。继续传代转染后的细胞至第九代,于荧光显微镜下观察,验证随着细胞的增殖传代,eGFP是否可以稳定表达。用MTT法检测Lentivirus-eGFP转染后ADSCs的细胞活性。对eGFP-ADSCs进行成脂成骨诱导分化,以检测转染后的细胞是否仍具备多向分化能力,且验证分化后的eGFP-ADSCs是否仍可表达绿色荧光蛋白(eGFP)。3.利用含有SDF-1的基础培养基对体外传代至第3代的ADSCs进行培养2天后,流式细胞技术及蛋白质印迹分析法检测其细胞中SDF-1受体CXCR4及CXCR7的表达情况,并与正常传代培养的第3代ADSCs进行比较。4.构建Transwell细胞迁移模型,检测体外SDF-1对ADSCs迁移的影响,并且设置SDF-1的浓度梯度为Oug/L、1ug/L、10ug/L、100ug/L,检测1-100ug/L浓度范围内,ADSCs的迁移与SDF-1浓度有无相关性。5.构建大鼠背部创伤模型,通过动脉移植途径向动物模型中注入eGFP-ADSCs,设置空白对照组(未做创伤处理,仅移植eGFP-ADSCs)、创伤组(大鼠背部创伤+eGFP-ADSCs移植)、SDF-1干预组(大鼠背部创伤+eGFP-ADSCs移植+局部SDF-1给药)。定期取大鼠背部创伤组织,利用Elisa法检测创伤组织中SDF-1在创面愈合过程中的表达趋势；利用RT-PCR检测创伤组织中eGFP基因的表达情况,并在共聚焦显微镜下观察eGFP-ADSCs在创伤组织冰冻切片中的迁移分布情况。定期采集大鼠循环血,利用流式细胞计数及RT-PCR法,对eGFP-ADSCs动员入循环血的情况加以分析。并于细胞移植后的21d,分别取叁组大鼠血供丰富、氧分压较高的实质性器官——肺组织,进行冰冻切片,于共聚焦纤维镜下观察eGFP-ADSCs在肺部组织中的分布,利用RT-PCR检测肺组织中eGFP基因的表达情况。6.实验过程中,分别于创伤后1d、3d、7d、14d、21d,观察记录两组创伤大鼠创面愈合的情况,计算创面愈合率；并于创伤后7d采集两组大鼠创面组织进行CD31免疫组化染色,比较两组创面组织中毛细血管密度。结果1.倒置显微镜下观察,分离培养的大鼠ADSCs呈梭型或多角形,流式细胞技术检测ADSCs表面高表达间充质干细胞的表面标志物CD2、CD90;基本不表达造血及内皮细胞表面标志物标记物CD34、CD45。体外成脂诱导培养14d后,油红O染色阳性,证明其具有成脂分化能力；体外成骨诱导培养28d后,茜素红染色阳性,证明其具有成骨分化的能力。2. Lentivirus-eGFP转染第3代ADSCs,96h时,细胞的绿色荧光表达程度达到高峰,此后维持在较高水平稳定表达。连续传代培养至第9代,细胞绿色荧光表达情况仍无明显变化。转染一周后,经流式细胞仪检测,Lentivirus-eGFP转染后ADSCs的eGFP阳性表达率为81.92%(图2-4),可满足本实验的需求。MTT检测结果显示Lentivirus-eGFP转染后的ADSCs与未转染的ADSCs在细胞活性方面差异无统计学意义。对eGFP-ADSCs进行多向分化能力检测,体外成脂诱导培养14d后,油红O染色阳性,体外成骨诱导培养28d后,茜素红染色阳性,证明慢病毒转染并未对其多向分化能力造成影响。3.流式细胞结果显示,ADSCs在体外培养传至第3代(P3 ADSCs),其表面SDF-1受体CXCR4、CXCR7的阳性表达率很低,分别为3.0%、4.1%,经SDF-1处理2d后,P3 ADSCs表面CXCR4、CXCR7的阳性表达率明显上调至33.7%、26.4%。Western blot实验结果同流式细胞结果基本一致,P3 ADSCs中CXCR4与CXCR7表达水平较低,经SDF-1处理后表达明显提高。因此说明经SDF-1诱导可有效提高传代后ADSCs表面CXCR4与CXCR7的表达水平。4. Transwell细胞迁移实验中,当下室加入SDF-1后,ADSCs细胞迁移数目明显增加,SDF-1浓度为Oug/L、lug/L、10ug/L、100ug/L时,ADSCs的细胞迁移率分别为9.77%、13.45%、28.14%、49.14%,各组间差异有统计学意义(P<0.05),证明了SDF-1在体外对ADSCs的迁移有诱导作用,且在0-100ug/L的范围内,诱导作用呈正相关关系,即SDF-1浓度越高ADSCs迁移越明显。5.Elisa法检测组织中SDF-1含量显示,未致创大鼠所取的组织中即正常皮肤组织亦构成性地表达SDF-1,但表达水平较低,在皮肤致创后即刻至第24h,创伤组织中SDF-1水平呈上调趋势,24h时出现SDF-1水平的小高峰,此后在24h-72h间,SDF-1的表达略有下调,72h-7d间SDF-1水平重又上升,7d时达到整个愈伤过程的最高峰,随后SDF-1水平随创伤的愈合逐渐下降。经外源性SDF-1干预后,创伤组织SDF-1水平在24h-7d间呈稳定上升趋势,未出现明显波动,7d后直至21d,随创面愈合,SDF-1水平显着下降。6.共聚焦显微镜下观察发现,细胞移植后的第1天,eGFP-ADSCs开始少量出现在大鼠创伤组织中,随着时间的迁移,eGFP-ADSCs细胞量逐渐增多,并大致分布于表皮组织、腺体及血管周围。我们利用ImagePro Plus图像软件对切片绿荧光强度进行分析,结果显示,SDF-1干预过的创伤大鼠,其创面组织中eGFP-ADSCs的含量在3d、7d、14d及21d均高于未予SDF-1干预的创伤大鼠。RT-PCR检测各组创伤组织中eGFP基因的表达情况,其结果与冰冻切片的观察结果基本吻合。细胞移植后第21d,对各组大鼠的肺部组织取材进行冰冻切片及RT-PCR检测,结果显示,未创伤大鼠肺组织中eGFP-ADSCs含量较另外两组明显较多,其中SDF-1干预的创伤大鼠肺组织中eGFP-ADSCs含量最少。7.流式细胞分析结果提示,创伤组大鼠及SDF-1干预的创伤组大鼠与空白对照组大鼠相比,循环血中eGFP-ADSCs含量较多；RT-PCR检测循环血中eGFP基因表达情况显示,各时间点循环血中eGFP基因的表达情况：SDF-1干预的创伤组大鼠>创伤组大鼠>对照组大鼠。8.移植ADSCs的创伤大鼠在给予外源性SDF-1处理后,其创面愈合速度较未予SDF-1处理的加快,SDF-1处理组的创面愈合率在伤后7d、14d均高于对照组。创伤后7d,取大鼠创面组织进行CD31免疫组化染色,结果显示,SDF-1处理后的创伤组织中毛细血管密度明显高于未予SDF-1处理的创伤组织。结论1.利用携带eGFP基因的慢病毒转染ADSCs获得eGFP标记的ADSCs,可稳定表达eGFP绿色荧光,且不受细胞传代增殖分化的影响,转染后ADSCs的生物学特性亦未受明显影响,因此可满足动物体内实验的需求。2.体外培养传代的ADSCs至P3(第叁代)时,其表面SDF-1受体CXCR4及CXCR7的阳性表达率很低,但在基础培养基中加入SDF-1诱导培养2d后,其表面CXCR4及CXCR7的阳性表达率可明显提高。在体外,SDF-1可促进ADSCs的跨膜迁移,在0-100ug/L的范围内,随SDF-1浓度的提高,ADSCs的迁移越明显。3.动物体内实验中,创伤因素可致创伤组织局部SDF-1水平的上调,创伤本身就可动员ADSCs入血并向创伤组织部位迁移,而外源性SDF-1可迭加该作用,增强移植ADSCs的动员与归巢,减少其向非目的实质性器官的迁移。移植ADSCs可参与皮肤创面愈合过程并能促进创面的愈合,而SDF-1在募集ADSCs参与创面愈合过程中发挥着重要的作用。(本文来源于《南方医科大学》期刊2016-03-18）
梁志[3]（2015）在《MFC电池电极邻近区域基质浓度与温度实时测量研究》一文中研究指出微生物燃料电池(MFC)作为一种清洁新能源的生产技术,在产生新能源的同时,还能降解环境中的污水。在其生化反应过程中影响微生物产电性能的因素众多,如:微生物种类、电池结构、溶液酸碱性、基质浓度和温度等。在这些众多的影响因素中,基质的温度和浓度的影响尤其重要,因为这些参数具有分布不均、瞬时变动的特点,直接影响着微生物的生长状况,进而影响电池的产电性能。通过对该参数的实时测量,可以很好的了解微生物燃料电池的生化反应过程,对产电性能的提高具有重要的意义。本文采用一种腐蚀型光纤Bragg光栅(FBG)温度-浓度传感器对MFC电池电极界面基质温度和浓度进行实时测量,通过对温度和浓度同时测量的传感矩阵方程的数值分析,能够有效的解决测量中温度和浓度的交叉敏感的问题,得到精度较高的温度和浓度值。本文的研究主要内容包括以下几点:(1)设计并制作了两室型微生物燃料电池的反应装置。分析了影响电池产电性能的因素,成功运行的了微生物燃料电池,为后续的测量提供了实验基础。(2)通过对普通光纤Bragg光栅的理论分析,研究了腐蚀型光纤Bragg光栅反射谱与与外部介质折射率之间关系,得到了外部介质折射率的变化和光纤光栅传播模式下有效折射率的函数关系。(3)设计并制作了腐蚀型FBG温度-浓度传感器。通过分析传感器独特的结构,得到了敏感矩阵方程,通过实验数据分析,获得了具有温度补偿效果的较高灵敏度传感器。(4)设计并搭建了温度和浓度同时测量的实验系统。利用本文设计制作的腐蚀型FBG温度-浓度传感器通过对蔗糖溶液温度和浓度的同时测量,实验证明了,随着蔗糖溶液的浓度的增加,腐蚀型传感器的中心波长呈线性漂移,灵敏系数达到5.42nm/riu。(5)设计并搭建了微生物燃料电池同时测量基质温度和浓度的实验系统。通过对敏感矩阵中温度和折射率系数的标定,能够很好的对电池基质的温度和浓度进行实时测量。通过实验得到基质温度的变化和电压值的变化呈线正相关关系,而浓度呈不同程度的下降趋势。本文的研究工作可以为微生物燃料电池生化反应过程中微观机理研究提供很好的实验手段。同时对光纤光栅传感器向多参数测量、高灵敏感方向的发展具有一定的推动作用。(本文来源于《重庆理工大学》期刊2015-03-25）
郝英杰,李勇,范立侨,赵群,张志栋[4]（2013）在《胃癌患者区域淋巴结组织中基质金属蛋白酶2及其组织抑制因子的表达与预后的关系》一文中研究指出目的探讨在胃癌患者区域淋巴结组织中基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)及基质金属蛋白酶组织抑制因子2(tissue matrix metalloproteinase inhibitor-2,TIMP-2)的表达情况,分析其与胃癌患者预后的关系。方法选取行胃癌根治术并经病理证实的胃癌患者区域淋巴结组织109例,全部病例均随访5年以上。采用免疫组织化学方法检测上述标本中MMP-2、TIMP-2的表达情况。结果胃癌患者区域淋巴结组织中,有转移淋巴结组与无转移淋巴结组MMP-2的阳性表达率65.1%(41/63)vs 28.3%(13/46)(P<0.01);TIMP-2的阳性表达率22.2%(14/63)vs 41.3%(19/46)(P<0.05)。在<5年生存期的患者中,有转移淋巴结组与无转移淋巴结组中MMP-2阳性表达率75.0%(33/44)vs 47.4%(9/19)(P<0.01)。生存期≥5年患者与生存期<5年的患者,区域淋巴结有转移组,MMP-2阳性表达率42.1%(8/19)vs 75.0%(33/44)(P<0.05),TIMP-2阳性表达率42.1%(8/19)vs 13.6%(6/44)(P<0.05);区域淋巴结无转移组,MMP-2阳性表达率14.8%(4/27)vs 47.4%(9/19)(P<0.05),TIMP-2阳性表达率59.3%(16/27)vs 15.8%(3/19)(P<0.01)。结论 MMP-2、TIMP-2在胃癌患者区域淋巴结组织中的表达差异与胃癌患者的预后有密切关系。检测胃癌患者区域淋巴结组织中MMP-2、TIMP-2对胃癌患者的预后评估及指导合理的综合治疗等具有重要的临床意义。(本文来源于《临床荟萃》期刊2013年09期）
高作文,杨龙,陈乐如,娄金书,张国强[5]（2013）在《~(60)Coγ射线半身照射对非照射区域骨髓造血组织基质细胞衍生因子1表达的影响》一文中研究指出目的探讨局部电离辐射对小鼠非照射区域骨髓造血组织基质细胞衍生因子-1(SDF-1)表达的影响。方法将6～8周龄雄性昆明小鼠随机分为健康对照组、全身照射组、全身屏蔽照射组以及左半身照射组4组,用铅屏蔽建立半身照射模型,以8.0 Gy60Coγ射线照射,观察小鼠外周血白细胞和骨髓有核细胞记数,检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)变化,及骨髓造血组织SDF-1表达的改变。结果与健康对照组比,在半身照射条件下,小鼠外周血白细胞降低,未照射侧骨髓有核细胞记数减少,血清MDA升高,SOD降低(P<0.01);非照射区域骨髓造血组织SDF-1表达明显减少,SDF-1阳性细胞显着下降(P<0.01)。结论局部电离辐射作用后,可导致非照射区域骨髓造血组织增殖抑制,SDF-1表达显着减少,氧自由基参与了该损伤过程。(本文来源于《中国临床保健杂志》期刊2013年02期）
李鹏,张俊飚[6]（2013）在《资源性农业废弃物循环利用绩效及区域差异问题的实证研究——以农户基质化为例》一文中研究指出利用叁阶段DEA模型,剔除外部环境因素和统计噪声的影响,测度农业生产废弃物循环利用绩效,并对各决策单元的技术效率进行分解,寻找循环利用效率较低的主因,并在此基础上探讨了区域绩效差异及原因。得出以下结论:(1)规模效率较低是导致资源性农业废弃物循环利用效率较低的主要原因。具体来看,农业废弃物基质化循环利用的综合效率均值仅为0.4089,还有59.11%的提升空间,纯技术效率均值高达0.9701,表现良好,规模效率均值仅为0.4215,成为农业废弃物循环利用效率较低的主因。(2)区域资源性农业废弃物循环利用绩效存在差异性,未剔除环境变量及统计噪声影响下,区域资源性农业废弃物循环利用绩效排序为:福建>山东>湖北>河南;剔除环境变量及统计噪声影响后,且优劣排序为河南>福建>山东>湖北,究其原因,环境变量及经营环境与运气差异是重要原因。据此,提出了相应的对策建议。(本文来源于《农业环境与生态安全——第五届全国农业环境科学学术研讨会论文集》期刊2013-04-19）
李鹏,杨志海,张俊飚,邱泽媛[7]（2013）在《资源性农业废弃物循环利用绩效的区域差异问题研究——以农户基质化为例》一文中研究指出利用叁阶段DEA模型,剔除外部环境因素和统计噪声的影响,测度农业生产废弃物循环利用绩效,并对各决策单元的技术效率进行分解,寻找循环利用效率较低的主因,并在此基础上探讨了区域绩效差异及原因。得出以下结论:①规模效率较低是导致资源性农业废弃物循环利用效率较低的主要原因。具体来看,农业废弃物基质化循环利用的综合效率均值仅为0.4089,还有59.11%的提升空间,纯技术效率均值高达0.9701,表现良好,规模效率均值仅为0.4215,成为农业废弃物循环利用效率较低的主因。②区域资源性农业废弃物循环利用绩效存在差异性,未剔除环境变量及统计噪声影响下,区域资源性农业废弃物循环利用绩效排序为:福建>山东>湖北>河南;剔除环境变量及统计噪声影响后,且优劣排序为河南>福建>山东>湖北,环境变量及经营环境与运气差异是重要原因。据此,提出了相应的对策建议。(本文来源于《经济地理》期刊2013年03期）
丁桂花,王剑,李卫东,汤海涛,肖求如[8]（2012）在《适于亚热带区域兰花栽培基质筛选研究》一文中研究指出兰花栽培过程中基质的选择极其重要,适宜的栽培基质可为兰花产业化研究及开发提供科学依据,而栽培基质理化性质是评价基质的质量标准。以亚热带地区含量丰富的半风化紫色砂页岩及其他易于收集的工、农业废弃物为原料,进行混配获得不同的兰花栽培基质,对栽培基质的理化性质进行测定,并调查不同基质对兰花生长的影响,以筛选适宜于的亚热带区域专用型兰花栽培基质。研究结果表明,通气孔隙在25%～50%、持水量为40%～50%、pH在5.5～6.5间基质较适宜于兰花生长。而其中以半风化紫色砂页岩:炉渣:耕层土壤:稻壳:食用菌栽培残余料:松树皮为20%:12%:10%:18%:18%:22%比例混合的基质2,其通气孔隙为39.8%、持水量48.7%、有机质含量44.2%,水解氮、速效磷、速效钾含量分别为283.4mg/kg、183.0mg/kg和309.4mg/kg。该基质最适宜于兰花生长,是一种较好的兰花栽培基质,可广泛应用于亚热带区域兰花的栽培。(本文来源于《中国农学通报》期刊2012年34期）
曹雪莹,种云霄,余光伟,仲海涛[9]（2012）在《人工湿地不同区域基质磷含量的差异分析》一文中研究指出基质吸附是人工湿地磷去除的主要途径,吸附能力易受环境条件的影响,为了探讨人工湿地运行时内部多样化理化环境对基质磷吸附的影响,以相同基质的无植物和有植物水平潜流人工湿地实验系统为对象,在对人工配制有机污水进行5个月处理后,分析了2个系统不同区域基质中总磷及各主要无机态磷的含量.结果表明,植物系统各部分基质中总磷含量呈现较大的差异,总磷最高的进水区根际基质达0.75 g·kg-1,其次是进水区抖落和出水区根际基质,最低的出水区非根际基质只有0.21 g·kg-1,无植物系统各部分基质总磷含量比较接近,在0.21～0.27 g·kg-1之间,总体来看,植物系统基质总磷含量高于无植物系统;与实验前相比,两系统各部分基质中铁磷、铝磷和钙磷含量都升高,是基质吸附无机磷的主要赋存形式,铁磷和铝磷在两系统不同区域基质中变化特点相似,植物系统进水区根际、抖落基质铁磷、铝磷含量大幅增加,而出水区和无植物系统各部分增加量相对较少;两系统各部分基质钙磷含量升高相对较均衡,但植物系统进水区和出水区根际基质含量也略高于其他部分;两系统各部分基质松散结合态磷和闭蓄态磷含量都比较低;植物根系对基质磷含量具有明显影响,总磷、铁磷、铝磷、钙磷和松散结合态磷含量呈现距离植物根系越近含量越高的特点.(本文来源于《环境科学》期刊2012年11期）
范斌,何志义[10]（2011）在《静脉注射骨髓基质细胞对大鼠局灶性脑缺血区域ICAM-1表达的影响》一文中研究指出目的探讨静脉注射骨髓基质细胞治疗大鼠局限性脑缺血后的ICAM-1的表达。方法贴壁+胰酶消化法分离培养大鼠骨髓基质细胞,取传至第8代前的细胞用于移植,接种前1d进行BrdU标记,制成单细胞悬液,调整细胞密度为3×109/ml。各组大鼠均采用改良Longa线栓法建立大脑中动脉栓塞1h模型,造模后24h,细胞移植组每只大鼠股静脉注射骨髓基质细胞悬液1ml,盐水对照组同法注射等量生理盐水,空白对照组不做任何处理。造模后3、7、14d对各组大鼠进行神经功能评分。免疫组化测定脑缺血再灌注3、7、14d ICAM-1蛋白表达。结果股静脉注射骨髓基质细胞后,骨髓基质细胞可在缺血半球大量存活,在对侧半球也有少量存活,并可使大鼠的神经功能改善,抑制梗死后ICAM-1的表达。结论经静脉注射骨髓基质细胞可改善大鼠神经功能评分,抑制ICAM-1表达,从而减轻脑缺血再灌注的危害。(本文来源于《中风与神经疾病杂志》期刊2011年11期）
区域基质论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
研究背景由于肿瘤切除、深度烧伤、放射性治疗等导致的组织缺损和各种切口的瘢痕化愈合不仅导致外观畸形和局部功能障碍,还大大降低了病人生活质量,频繁的住院治疗也增加了发病率和死亡率,导致巨大的社会经济损耗。近年来人们都在努力寻求微创化或无瘢痕愈合的治疗方法。当前存在的诸多促修复方案虽然大大提高了创面愈合能力或者减轻了瘢痕的形成,但是还存在一些局限性,如创面覆盖物结合各种细胞因子的疗法价格昂贵且效果有限,组织瓣转移修复导致供区继发损伤和瘢痕遗留,假体填充治疗引起包膜挛缩等等。因此寻找理想的治疗方法促进创面修复以达到愈合组织的解剖重建和功能恢复是一直以来迫切需要解决的问题。随着干细胞研究技术令人鼓舞的革命性进步,在创伤部位有效补充外源性干细胞就成为促进创伤修复的理想策略。干细胞是一类具有多向分化潜能的细胞,在特定的培养条件下可以分化成几种不同类型的细胞(成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌细胞)。到目前为止,干细胞已经被广泛地用于治疗某些疾病。脂肪来源干细胞,主要因其取材方便、可反复获取,发展前景巨大,有望成为最常用的干细胞来源。已有研究证实,脂肪干细胞移植可有效促进创面的修复。2012年,Collawn SS等证实ADSCs可加速创面愈合。随后,亦有研究表明,脂肪干细胞移植可促进扩张皮肤的再生。公认的,干细胞疗法对加强创伤后组织重构和功能恢复具有重要的临床意义,而干细胞在体内的动员与归巢是其发挥作用的关键。干细胞归巢的“归巢”特性是体内干细胞修复损伤组织或替代坏死结构的基础。2004年Chen F等认为干细胞首先被动员从其聚集的组织或器官中移出并进入外周血,感受到指引其归巢的趋化因子浓度梯度,然后按信号指引方向迁移到组织损伤部位并粘附到血管内皮,黏附到血管内皮的干细胞随后要穿过血管壁从而进入靶组织,定植于新的有利于其增殖和免受程序性细胞死亡的微环境中,进一步分化成相关细胞,从而修复缺损组织。为了使移植的干细胞能够最大化被动员到创伤部位参与修复,我们认为首先要选择有利于干细胞存活及迁移的移植途径。目前常用的移植途径主要为局部移植,然而我们认为局部途径植入的干细胞虽然更直接且停留创伤部位的细胞数量更多,但是相比全身途径来说,操作较复杂且细胞植入起始环境差,会导致相当一部分的细胞流失,而且细胞活力会受到很大影响,另外,高密度细胞团在外周组织液中的迁移能力也是有限的。血管内注入的全身途径更有利于干细胞的存活和迁移,因为血液是细胞能够赖以存活的体内环境,不仅提供丰富的营养物质,血管内压力差还提供了促使细胞迁移的动力,但是静脉移植注入的干细胞首先要通过肺循环,肺组织存在丰富的毛细血管网,血流缓慢有利于细胞的贴壁粘附,而且肺组织为干细胞提供给了更适宜生存的氧分压环境,导致循环中大量的干细胞被滞留于肺而难以发挥其有效作用。近年来,有研究表明,动脉移植途径是进行干细胞移植的一条安全有效的途径。Makela T等就在其研究中指出静脉移植干细胞易导致大量的干细胞被滞留于肺而难以发挥其有效作用,而动脉移植有更大的潜能将细胞输送至全身血液循环,最终有效到达细胞疗法的靶器官,然而需要解决的问题是如何更有效地动员并引导循环中的外源性干细胞靶向迁移到待修复组织处。因此,我们想要寻找有效的ADSCs趋化因子。基质细胞衍生因子(SDF-1)由基质细胞产生,也常被称为CXCL12。早期研究者们发现,SDF-1可调节内皮祖细胞向创伤微环境的迁移和归巢,增强创面边缘SDF-1的表达有助于增加内皮祖细胞在创缘的累积,并且加速新生血管化。后来有研究表明,SDF-1也参与调控了外源性移植的骨髓间充质干细胞以及内源性的骨髓间充质干细胞的动员和归巢。然而相关的对于脂肪干细胞(ADSCs)迁移调控方面的研究尚不成熟。近年来有研究者发现,肝损伤可造成局部肝损伤区域SDF-1的表达升高,通过静脉移植的ADSCs可募集在局部肝损伤区域,证明通过血管移植的全身途径是行之有效的干细胞移植方法,且ADSCs向局部损伤部位的迁移可能与SDF-1的调控有关。目的意义本研究的目的在于探究SDF-1对于诱导ADSCs向创伤组织定向趋化迁移的作用,进一步验证通过调控SDF-1的局部浓度控制ADSCs向创伤组织的趋化迁移是否可行,为充分动员ADSCs发挥促修复作用寻找新策略,对于干细胞疗法的广泛应用也具有重要的临床指导意义。方法1.采用改良的酶消化法分离获得SD大鼠ADSCs,经体外培养、传代扩增细胞,倒置显微镜下观察细胞的形态学特征,通过流式细胞检测细胞表面CD29、CD34^ CD45及CD90的表达,体外诱导细胞成脂成骨分化检测其多向分化能力。2.构建携带eGFP基因的慢病毒载体,以经验感染复数MOI=40转染第3代ADSCs,并且分别于转染后的24h、48h、72h、96h时,于荧光显微镜下观察ADSCs的绿色荧光蛋白的阳性表达情况,并于转染一周后,使用流式细胞检测ADSCs的eGFP阳性表达率。继续传代转染后的细胞至第九代,于荧光显微镜下观察,验证随着细胞的增殖传代,eGFP是否可以稳定表达。用MTT法检测Lentivirus-eGFP转染后ADSCs的细胞活性。对eGFP-ADSCs进行成脂成骨诱导分化,以检测转染后的细胞是否仍具备多向分化能力,且验证分化后的eGFP-ADSCs是否仍可表达绿色荧光蛋白(eGFP)。3.利用含有SDF-1的基础培养基对体外传代至第3代的ADSCs进行培养2天后,流式细胞技术及蛋白质印迹分析法检测其细胞中SDF-1受体CXCR4及CXCR7的表达情况,并与正常传代培养的第3代ADSCs进行比较。4.构建Transwell细胞迁移模型,检测体外SDF-1对ADSCs迁移的影响,并且设置SDF-1的浓度梯度为Oug/L、1ug/L、10ug/L、100ug/L,检测1-100ug/L浓度范围内,ADSCs的迁移与SDF-1浓度有无相关性。5.构建大鼠背部创伤模型,通过动脉移植途径向动物模型中注入eGFP-ADSCs,设置空白对照组(未做创伤处理,仅移植eGFP-ADSCs)、创伤组(大鼠背部创伤+eGFP-ADSCs移植)、SDF-1干预组(大鼠背部创伤+eGFP-ADSCs移植+局部SDF-1给药)。定期取大鼠背部创伤组织,利用Elisa法检测创伤组织中SDF-1在创面愈合过程中的表达趋势；利用RT-PCR检测创伤组织中eGFP基因的表达情况,并在共聚焦显微镜下观察eGFP-ADSCs在创伤组织冰冻切片中的迁移分布情况。定期采集大鼠循环血,利用流式细胞计数及RT-PCR法,对eGFP-ADSCs动员入循环血的情况加以分析。并于细胞移植后的21d,分别取叁组大鼠血供丰富、氧分压较高的实质性器官——肺组织,进行冰冻切片,于共聚焦纤维镜下观察eGFP-ADSCs在肺部组织中的分布,利用RT-PCR检测肺组织中eGFP基因的表达情况。6.实验过程中,分别于创伤后1d、3d、7d、14d、21d,观察记录两组创伤大鼠创面愈合的情况,计算创面愈合率；并于创伤后7d采集两组大鼠创面组织进行CD31免疫组化染色,比较两组创面组织中毛细血管密度。结果1.倒置显微镜下观察,分离培养的大鼠ADSCs呈梭型或多角形,流式细胞技术检测ADSCs表面高表达间充质干细胞的表面标志物CD2、CD90;基本不表达造血及内皮细胞表面标志物标记物CD34、CD45。体外成脂诱导培养14d后,油红O染色阳性,证明其具有成脂分化能力；体外成骨诱导培养28d后,茜素红染色阳性,证明其具有成骨分化的能力。2. Lentivirus-eGFP转染第3代ADSCs,96h时,细胞的绿色荧光表达程度达到高峰,此后维持在较高水平稳定表达。连续传代培养至第9代,细胞绿色荧光表达情况仍无明显变化。转染一周后,经流式细胞仪检测,Lentivirus-eGFP转染后ADSCs的eGFP阳性表达率为81.92%(图2-4),可满足本实验的需求。MTT检测结果显示Lentivirus-eGFP转染后的ADSCs与未转染的ADSCs在细胞活性方面差异无统计学意义。对eGFP-ADSCs进行多向分化能力检测,体外成脂诱导培养14d后,油红O染色阳性,体外成骨诱导培养28d后,茜素红染色阳性,证明慢病毒转染并未对其多向分化能力造成影响。3.流式细胞结果显示,ADSCs在体外培养传至第3代(P3 ADSCs),其表面SDF-1受体CXCR4、CXCR7的阳性表达率很低,分别为3.0%、4.1%,经SDF-1处理2d后,P3 ADSCs表面CXCR4、CXCR7的阳性表达率明显上调至33.7%、26.4%。Western blot实验结果同流式细胞结果基本一致,P3 ADSCs中CXCR4与CXCR7表达水平较低,经SDF-1处理后表达明显提高。因此说明经SDF-1诱导可有效提高传代后ADSCs表面CXCR4与CXCR7的表达水平。4. Transwell细胞迁移实验中,当下室加入SDF-1后,ADSCs细胞迁移数目明显增加,SDF-1浓度为Oug/L、lug/L、10ug/L、100ug/L时,ADSCs的细胞迁移率分别为9.77%、13.45%、28.14%、49.14%,各组间差异有统计学意义(P<0.05),证明了SDF-1在体外对ADSCs的迁移有诱导作用,且在0-100ug/L的范围内,诱导作用呈正相关关系,即SDF-1浓度越高ADSCs迁移越明显。5.Elisa法检测组织中SDF-1含量显示,未致创大鼠所取的组织中即正常皮肤组织亦构成性地表达SDF-1,但表达水平较低,在皮肤致创后即刻至第24h,创伤组织中SDF-1水平呈上调趋势,24h时出现SDF-1水平的小高峰,此后在24h-72h间,SDF-1的表达略有下调,72h-7d间SDF-1水平重又上升,7d时达到整个愈伤过程的最高峰,随后SDF-1水平随创伤的愈合逐渐下降。经外源性SDF-1干预后,创伤组织SDF-1水平在24h-7d间呈稳定上升趋势,未出现明显波动,7d后直至21d,随创面愈合,SDF-1水平显着下降。6.共聚焦显微镜下观察发现,细胞移植后的第1天,eGFP-ADSCs开始少量出现在大鼠创伤组织中,随着时间的迁移,eGFP-ADSCs细胞量逐渐增多,并大致分布于表皮组织、腺体及血管周围。我们利用ImagePro Plus图像软件对切片绿荧光强度进行分析,结果显示,SDF-1干预过的创伤大鼠,其创面组织中eGFP-ADSCs的含量在3d、7d、14d及21d均高于未予SDF-1干预的创伤大鼠。RT-PCR检测各组创伤组织中eGFP基因的表达情况,其结果与冰冻切片的观察结果基本吻合。细胞移植后第21d,对各组大鼠的肺部组织取材进行冰冻切片及RT-PCR检测,结果显示,未创伤大鼠肺组织中eGFP-ADSCs含量较另外两组明显较多,其中SDF-1干预的创伤大鼠肺组织中eGFP-ADSCs含量最少。7.流式细胞分析结果提示,创伤组大鼠及SDF-1干预的创伤组大鼠与空白对照组大鼠相比,循环血中eGFP-ADSCs含量较多；RT-PCR检测循环血中eGFP基因表达情况显示,各时间点循环血中eGFP基因的表达情况：SDF-1干预的创伤组大鼠>创伤组大鼠>对照组大鼠。8.移植ADSCs的创伤大鼠在给予外源性SDF-1处理后,其创面愈合速度较未予SDF-1处理的加快,SDF-1处理组的创面愈合率在伤后7d、14d均高于对照组。创伤后7d,取大鼠创面组织进行CD31免疫组化染色,结果显示,SDF-1处理后的创伤组织中毛细血管密度明显高于未予SDF-1处理的创伤组织。结论1.利用携带eGFP基因的慢病毒转染ADSCs获得eGFP标记的ADSCs,可稳定表达eGFP绿色荧光,且不受细胞传代增殖分化的影响,转染后ADSCs的生物学特性亦未受明显影响,因此可满足动物体内实验的需求。2.体外培养传代的ADSCs至P3(第叁代)时,其表面SDF-1受体CXCR4及CXCR7的阳性表达率很低,但在基础培养基中加入SDF-1诱导培养2d后,其表面CXCR4及CXCR7的阳性表达率可明显提高。在体外,SDF-1可促进ADSCs的跨膜迁移,在0-100ug/L的范围内,随SDF-1浓度的提高,ADSCs的迁移越明显。3.动物体内实验中,创伤因素可致创伤组织局部SDF-1水平的上调,创伤本身就可动员ADSCs入血并向创伤组织部位迁移,而外源性SDF-1可迭加该作用,增强移植ADSCs的动员与归巢,减少其向非目的实质性器官的迁移。移植ADSCs可参与皮肤创面愈合过程并能促进创面的愈合,而SDF-1在募集ADSCs参与创面愈合过程中发挥着重要的作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
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论文知识图
![神经支架内轴突再生进程[39]-22-](http://image.cnki.net/GetImage.ashx?id=1012038791.nh0004&suffix=.jpg)
